| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语/符号说明 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 研究现状、成果 | 第13-15页 |
| 研究目的、方法 | 第15-17页 |
| 一、HMGB1对DC免疫功能及细胞内miRNA-449b变化的影响 | 第17-31页 |
| 1.1 对象和方法 | 第17-23页 |
| 1.1.1 实验仪器 | 第17-19页 |
| 1.1.2 实验动物 | 第19页 |
| 1.1.3 试剂与耗材 | 第19-20页 |
| 1.1.4 脾脏来源CD11c~＋DC的分选及鉴定 | 第20-21页 |
| 1.1.5 HMGB1对DC表面分子、细胞因子及凋亡影响的检测 | 第21-22页 |
| 1.1.6 HMGB1对DC内miR-449b表达变化的检测 | 第22-23页 |
| 1.1.7 统计学处理 | 第23页 |
| 1.2 结果 | 第23-28页 |
| 1.2.1 小鼠脾脏分选的CD11c~＋DC纯度及细胞活力的检测 | 第23页 |
| 1.2.2 HMGB1对DC表面分子、细胞因子及凋亡的影响 | 第23-26页 |
| 1.2.3 HMGB1对DC内miR-449b表达的影响 | 第26-28页 |
| 1.3 讨论 | 第28-30页 |
| 1.4 小结 | 第30-31页 |
| 二、miRNA-449b对DC免疫功能及凋亡的影响 | 第31-47页 |
| 2.1 对象和方法 | 第31-38页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第31-33页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第33页 |
| 2.1.3 实验试剂及耗材 | 第33-34页 |
| 2.1.4 小鼠脾脏来源的CD11c~＋树突状细胞的提取、鉴定以及流式检测表面分子、凋亡的方法步骤 | 第34-35页 |
| 2.1.5 树突状细胞转染microRNA步骤及转染效率的检测 | 第35-36页 |
| 2.1.6 小鼠CD4~＋T细胞的分选及混合型淋巴细胞培养 | 第36页 |
| 2.1.7 蛋白的提取及定量 | 第36页 |
| 2.1.8 生物信息学分析mmu-miRNA-449b及其靶基因的预测 | 第36-37页 |
| 2.1.9 Western blot检测蛋白Notch1及Sirt1表达量变化 | 第37-38页 |
| 2.1.10 ELISA检测细胞上清中的细胞因子 | 第38页 |
| 2.1.11 统计学处理 | 第38页 |
| 2.2 实验结果 | 第38-44页 |
| 2.2.1 最佳转染效率的确定及检测 | 第38-41页 |
| 2.2.2 miR-449b促进DC表面分子CD86表达、增加IL-10分泌及凋亡 | 第41-42页 |
| 2.2.3 miR-449b介导DC对T细胞增殖的抑制及向Th2极化 | 第42-44页 |
| 2.2.4 HMGB1可通过miR-449b抑制靶蛋白Sirt1及Notch1的表达 | 第44页 |
| 2.3 讨论 | 第44-46页 |
| 2.4 结论 | 第46-47页 |
| 三、抑制miRNA-449b改善脓毒症小鼠晚期病死率及免疫功能 | 第47-66页 |
| 3.1 对象和方法 | 第47-56页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第47-49页 |
| 3.1.2 试剂及耗材 | 第49-50页 |
| 3.1.3 小鼠CLP模型的制备 | 第50-51页 |
| 3.1.4 小鼠尾静脉注射miR-449b antagomir、对照及腹腔注射LPS | 第51-52页 |
| 3.1.5 眼球取血收集血清 | 第52页 |
| 3.1.6 脾脏来源CD11c~+树 突状细胞的分离及在脾脏中所占比例检测 | 第52-53页 |
| 3.1.7 各组CD11c~+树突状细胞的表面分子、凋亡变化以及与T细胞共培养变化 | 第53-54页 |
| 3.1.8 western blot检测各组靶分子的Notch1及Sirt1的改变 | 第54-55页 |
| 3.1.9 检测各组血清及分选DC与T细胞共培养上清中细胞因子变化 | 第55-56页 |
| 3.1.10 统计学处理 | 第56页 |
| 3.2 实验结果 | 第56-63页 |
| 3.2.1 CLP及尾静脉注射miR-449b antagomir后小鼠脾脏DC中miR-449b改变 | 第56-57页 |
| 3.2.2 体内阻断miR-449b可提高脓毒症小鼠的生存率 | 第57页 |
| 3.2.3 抑制miRNA-449b后可上调晚期脓毒症小鼠脾脏来源CD11c~＋树突状细胞的比例及改善DC免疫活性 | 第57-61页 |
| 3.2.4 mmu-miR-449b antagomir能促进脓毒症后期脾脏来源的DC对T细胞的增殖及向Th1分化 | 第61-62页 |
| 3.2.5 miRNA-449b antagomir能明显的上调CLP后小鼠脾脏来源CD11c~+DC中蛋白Notch1及Sirt1的表达 | 第62-63页 |
| 3.3 讨论 | 第63-65页 |
| 3.4 小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第72-73页 |
| 综述 微小RNA对树突状细胞功能的影响及在脓毒症中的作用 | 第73-85页 |
| 综述参考文献 | 第81-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 个人简历 | 第86页 |
