| 目录 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 縮略词 | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-29页 |
| 1 植物逆境生理 | 第15-19页 |
| 1.1 高温胁迫对植物的影响 | 第15-17页 |
| 1.1.1 高温胁迫抑制植物生长发育 | 第15页 |
| 1.1.2 高温胁迫破坏细胞膜结构 | 第15-16页 |
| 1.1.3 高温胁迫抑制光合作用和呼吸作用 | 第16页 |
| 1.1.4 高温胁迫对内源激素的影响 | 第16-17页 |
| 1.2 干旱胁迫对植物的影响 | 第17-18页 |
| 1.3 高盐胁迫对植物的影响 | 第18-19页 |
| 2 植物热激蛋白的研究进展 | 第19-23页 |
| 2.1 HSP的分类 | 第19页 |
| 2.2 HSP的特点 | 第19-20页 |
| 2.2.1 HSPs种类的多样性 | 第19-20页 |
| 2.2.2 HSPs的保守性 | 第20页 |
| 2.2.3 热激反应的短时性 | 第20页 |
| 2.3 HSP的主要功能 | 第20-22页 |
| 2.3.1 HSP具有分子伴侣功能 | 第20-21页 |
| 2.3.2 HSP与植物的耐热性 | 第21页 |
| 2.3.3 HSP与植物的耐冷性 | 第21-22页 |
| 2.3.4 HSP与植物的其他抗性 | 第22页 |
| 2.4 HSP70基因的表达调控 | 第22-23页 |
| 3 菊花抗性育种研究进展 | 第23-28页 |
| 3.1 常规抗性育种 | 第23页 |
| 3.2 分子抗性育种 | 第23-27页 |
| 3.2.1 抗性基因的克隆 | 第24页 |
| 3.2.2 抗病虫分子育种 | 第24-26页 |
| 3.2.3 抗非生物胁迫分子育种 | 第26-27页 |
| 3.3 存在的问题 | 第27-28页 |
| 3.3.1 基因来源问题 | 第27页 |
| 3.3.2 转化效率问题 | 第27-28页 |
| 3.3.3 转基因菊花的生态和安全性问题 | 第28页 |
| 4 本研究的目的意义 | 第28-29页 |
| 第二章 菊花CgHSP70基因的克隆及序列分析 | 第29-45页 |
| 摘要 | 第29页 |
| 1 材料与方法 | 第29-36页 |
| 1.1 植物材料 | 第29-30页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第30-31页 |
| 1.2.1 试剂及菌株 | 第30页 |
| 1.2.2 仪器设备 | 第30页 |
| 1.2.3 引物序列 | 第30-31页 |
| 1.3 实验方法 | 第31-36页 |
| 1.3.1 基因特异性引物设计 | 第31页 |
| 1.3.2 RNA提取 | 第31页 |
| 1.3.3 1~(st)-Strand cDNA合成及检测 | 第31-32页 |
| 1.3.4 PCR扩增及电泳 | 第32-33页 |
| 1.3.5 目的片段纯化、连接与转化 | 第33-34页 |
| 1.3.6 重组子筛选与测序 | 第34页 |
| 1.3.7 3’RACE PCR | 第34-35页 |
| 1.3.8 cDNA全长的获得 | 第35-36页 |
| 1.3.9 序列比对、分析与进化树构建 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-43页 |
| 2.1 RNA提取质量与反转录效果检测 | 第36-37页 |
| 2.2 CgHSP70基因的EST序列特征 | 第37页 |
| 2.3 CgHSP70基因3'RACE结果 | 第37-38页 |
| 2.4 CgHSP70基因全长序列的获得 | 第38页 |
| 2.5 CgHSP70基因的序列分析 | 第38页 |
| 2.6 CgHSP70的氨基酸序列分析 | 第38-42页 |
| 2.7 CgHSP70的进化树分析 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 菊花CgHSP70基因转化拟南芥的研究 | 第45-55页 |
| 摘要 | 第45页 |
| 1 材料与方法 | 第45-48页 |
| 1.1 植物材料 | 第45-46页 |
| 1.2 实验方法 | 第46-48页 |
| 1.2.1 拟南芥的培养 | 第46页 |
| 1.2.2 花序浸染法转化拟南芥 | 第46页 |
| 1.2.3 转基因拟南芥的筛选 | 第46-47页 |
| 1.2.4 转基因植株的抗性分析 | 第47页 |
| 1.2.5 不同处理下转基因植株中CgHSP70基因的表达分析 | 第47-48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-53页 |
| 2.1 拟南芥的转基因植株的获得 | 第48页 |
| 2.2 转基因植株的抗性鉴定 | 第48-51页 |
| 2.2.1 转基因拟南芥的抗热性 | 第48-49页 |
| 2.2.2 转基因拟南芥的抗旱性 | 第49页 |
| 2.2.3 转基因拟南芥的耐盐性 | 第49-51页 |
| 2.3 不同胁迫下转基因植株中CgHSP70基因的表达特性 | 第51-53页 |
| 2.3.1 高温胁迫下转基因植株的表达 | 第51-52页 |
| 2.3.2 干旱胁迫下转基因植株的表达 | 第52页 |
| 2.3.3 高盐胁迫下转基因植株的表达 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 菊花CgHSP70基因的遗传转化研究 | 第55-81页 |
| 摘要 | 第55-56页 |
| 1 材料与方法 | 第56-64页 |
| 1.1 植物材料 | 第56页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第56页 |
| 1.2.1 主要生化试剂 | 第56页 |
| 1.2.2 实验所用培养基 | 第56页 |
| 1.2.3 实验仪器 | 第56页 |
| 1.2.4 菌株和质粒 | 第56页 |
| 1.3 实验方法 | 第56-64页 |
| 1.3.1 CgHSP70正义表达载体的构建 | 第56-59页 |
| 1.3.2 菊花的遗传转化 | 第59-61页 |
| 1.3.3 转基因植株的分子鉴定 | 第61-62页 |
| 1.3.4 转基因植株的抗性分析 | 第62-64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-77页 |
| 2.1 菊花CgHSP70基因正义表达载体 | 第64-67页 |
| 2.2 菊花CgHSP70转基因植株的获得及分子鉴定 | 第67-69页 |
| 2.2.1 转基因植株的PCR检测 | 第67-69页 |
| 2.2.2 转基因植株的荧光定量PCR检测 | 第69页 |
| 2.3 转基因植株的抗性的表型鉴定 | 第69-72页 |
| 2.3.1 高温胁迫处理后转基因株系及野生型植株恢复生长存活率分析 | 第69-71页 |
| 2.3.2 干旱胁迫处理后转基因株系及野生型植株恢复生长存活率分析 | 第71页 |
| 2.3.3 转基因株系及野生型植株盐胁迫处理恢复生长存活率分析 | 第71-72页 |
| 2.4 转基因植株的定量及生理指标的测定结果 | 第72-77页 |
| 2.4.1 转基因植株对高温胁迫的抗性检测 | 第72-75页 |
| 2.4.2 转基因植株对干旱胁迫的抗性检测 | 第75-76页 |
| 2.4.3 转基因植株对盐胁迫的抗性检测 | 第76-77页 |
| 3 结果与讨论 | 第77-81页 |
| 全文结论 | 第81-83页 |
| 创新点 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-93页 |
| 附录 | 第93-97页 |
| 发表论文和参加的科研项目情况及所获奖励 | 第97-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
