| 目录 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-31页 |
| 1 转基因作物的发展 | 第11-13页 |
| 1.1 基因工程的发展 | 第11-12页 |
| 1.2 转基因作物的类型 | 第12页 |
| 1.3 基因工程在粮食作物上的应用 | 第12页 |
| 1.4 基因工程在经济作物上的应用 | 第12-13页 |
| 2 转基因作物对经济社会的贡献 | 第13页 |
| 3 转基因作物可能存在的风险 | 第13-15页 |
| 3.1 转基因作物有可能破坏自然生态系统 | 第14页 |
| 3.2 转基因作物有可能对非靶标生物尤其有益生物产生危害 | 第14页 |
| 3.3 转基因作物本身可能演变为农田杂草 | 第14页 |
| 3.4 基因漂移对近缘物种的影响 | 第14-15页 |
| 3.5 转基因作物可能对环境微生物的多样性产生影响 | 第15页 |
| 4 转基因作物的安全评价 | 第15-24页 |
| 4.1 转基因作物安全评价的必要性 | 第15页 |
| 4.2 微生物群落结构研究方法 | 第15-24页 |
| 4.2.1 传统可培养技术 | 第16页 |
| 4.2.2 生物标记法 | 第16-17页 |
| 4.2.3 分子生物学方法 | 第17-24页 |
| 5 PCR方法简介 | 第24-28页 |
| 5.1 PCR技术的基本原理 | 第24-25页 |
| 5.2 不同策略的PCR技术简介 | 第25-28页 |
| 5.2.1 锚定PCR(anchored PCR) | 第25-26页 |
| 5.2.2 不对称PCR(asymmetric PCR) | 第26页 |
| 5.2.3 反向PCR(inverse PCR) | 第26-27页 |
| 5.2.4 逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR) | 第27页 |
| 5.2.5. 荧光定量PCR(Q-PCR) | 第27-28页 |
| 6 本研究的意义、研究目标与研究内容 | 第28-31页 |
| 6.1 研究意义 | 第28-29页 |
| 6.2 研究目标 | 第29页 |
| 6.3 研究内容 | 第29-31页 |
| 第二章 小麦根际土壤细菌DNA提取方法的选择与优化 | 第31-49页 |
| 1 材料与方法 | 第31-43页 |
| 1.1 材料 | 第31-36页 |
| 1.1.1 土壤样品 | 第31-33页 |
| 1.1.2 土壤采集的经纬度 | 第33-35页 |
| 1.1.3 主要仪器与设备 | 第35-36页 |
| 1.1.4 主要试剂 | 第36页 |
| 1.2 方法 | 第36-43页 |
| 1.2.1 土壤样品采集点的确定方案 | 第36-38页 |
| 1.2.2 采集点的确定 | 第38-39页 |
| 1.2.3 土壤样品的预处理 | 第39页 |
| 1.2.4 小麦根际土壤微生物总DNA的提取 | 第39-42页 |
| 1.2.5 DNA质量测定 | 第42页 |
| 1.2.6 DNA纯度测定 | 第42页 |
| 1.2.7 不同提取方法对后期实验适应性分析 | 第42-43页 |
| 2 结果 | 第43-46页 |
| 2.1 不同提取方法对DNA粗提取产物质量的影响 | 第43-45页 |
| 2.2 不同提取方法对DNA粗提物纯度的影响 | 第45页 |
| 2.3 不同提取方法对后期实验适应性分析结果 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| 第三章 PCR-DGGE对小麦根际细菌群落多样性的分析 | 第49-77页 |
| 1 材料与方法 | 第49-58页 |
| 1.1 主要试剂 | 第49-50页 |
| 1.2 主要溶液 | 第50-52页 |
| 1.3 方法 | 第52-58页 |
| 1.3.1 PCR条件的优化 | 第52页 |
| 1.3.2 DGGE条件的选择和优化 | 第52-53页 |
| 1.3.3 凝胶的制备 | 第53-54页 |
| 1.3.4 银染步骤 | 第54页 |
| 1.3.5 Quantity one软件分析DGGE结果 | 第54页 |
| 1.3.6 DGGE条带的克隆 | 第54-57页 |
| 1.3.7 序列测定和系统发育分析 | 第57-58页 |
| 2 结果 | 第58-73页 |
| 2.1 DGGE变性剂梯度选择的结果 | 第58-59页 |
| 2.2 DGGE电泳最佳时间的选择结果 | 第59-60页 |
| 2.3 六合转基因试验田小麦各生长期细菌群落变化分析DGGE图谱 | 第60-63页 |
| 2.4 河南新乡转基因试验田小麦各生长期细菌群落变化分析DGGE图 | 第63-66页 |
| 2.5 扬州农科所转基因试验田小麦各生长期微生物菌群变化分析 | 第66-68页 |
| 2.6 扬州农科所转基因试验田小麦各生长期微生物菌群变化分析 | 第68-70页 |
| 2.7 DGGE条带的克隆测序结果 | 第70-72页 |
| 2.8 DGGE条带同源性比较结果 | 第72-73页 |
| 3 讨论 | 第73-77页 |
| 全文总结 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
