摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
论文中常用缩写词英汉对照表 | 第12-13页 |
第一部分 综述 | 第13-31页 |
1. 哺乳动物性别决定机制及其相关基因研究进展 | 第14-20页 |
1.1 SRY基因 | 第14-17页 |
1.2 Sox9基因 | 第17-18页 |
1.3 Wt1基因 | 第18页 |
1.4 Amh基因 | 第18页 |
1.5 Sf1基因 | 第18-19页 |
1.6 Dax1基因 | 第19-20页 |
1.7 ZFY基因 | 第20页 |
2. 哺乳动物性别控制主要方法 | 第20-23页 |
2.1 X、Y精子的分离 | 第20-22页 |
2.2 胚胎性别鉴定 | 第22-23页 |
3. RNA干扰(RNA interference,RNAi)的研究进展 | 第23-31页 |
3.1 RNAi的发现 | 第24页 |
3.2 RNAi的作用机制 | 第24-25页 |
3.3 RNAi特点 | 第25-26页 |
3.4 siRNA设计 | 第26-28页 |
3.5 siRNA的导入方式 | 第28-29页 |
3.6 RNAi的应用 | 第29-31页 |
第二部分 试验研究 | 第31-50页 |
试验一 猪ZFY基因RNAi表达载体的构建及干扰效果的检测 | 第31-46页 |
1. 材料 | 第31-33页 |
1.1 试剂 | 第31-32页 |
1.2 仪器 | 第32-33页 |
1.3 实验材料 | 第33页 |
2. 实验方法 | 第33-40页 |
2.1 shRNA表达载体的选择 | 第33-34页 |
2.2 shRNA序列的设计 | 第34-35页 |
2.3 双链寡聚核苷酸的合成 | 第35页 |
2.4 shRNA重组表达载体的构建 | 第35-37页 |
2.5 猪生精细胞的分离、培养 | 第37-39页 |
2.6 qRT-PCR检测ZFY基因的表达 | 第39-40页 |
3 结果 | 第40-44页 |
3.1 siRNA序列的筛选 | 第40-41页 |
3.2 双链寡聚核苷酸的合成 | 第41页 |
3.3 重组表达载体的测序鉴定 | 第41-42页 |
3.4 生精细胞的培养及转染 | 第42页 |
3.5 qRT-PCR检测猪ZFY基因的表达水平 | 第42-44页 |
4 讨论与小结 | 第44-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
试验二 猪ZFY基因shRNA重组表达载体的体内RNAi实验 | 第46-50页 |
1. 材料 | 第46-47页 |
1.1 试剂 | 第46页 |
1.2 仪器 | 第46-47页 |
1.3 实验动物 | 第47页 |
2. 方法 | 第47页 |
2.1 重组表达载体的选择与提取 | 第47页 |
2.2 猪体内ZFY基因RNAi实验 | 第47页 |
3. 结果与分析 | 第47-48页 |
4. 讨论与小结 | 第48-49页 |
5. 结论 | 第49-50页 |
全文总结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-63页 |
附录 | 第63-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
作者简介 | 第69-70页 |
导师评阅表 | 第70页 |