中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
引言 | 第12-16页 |
第一部分 沙门菌质粒毒力基因spvB的原核表达及其抗体的制备 | 第16-31页 |
1. 材料与方法 | 第16-25页 |
1.1 材料 | 第16-20页 |
1.2 方法 | 第20-25页 |
2. 结果 | 第25-29页 |
2.1 spvB的一般生物信息学特征 | 第25-26页 |
2.2 spvB基因的PCR扩增及原核表达载体的构建 | 第26-27页 |
2.3 SpvB蛋白的诱导表达 | 第27-28页 |
2.4 SpvB蛋白的纯化及鉴定 | 第28-29页 |
2.5 SpvB多克隆抗体的鉴定 | 第29页 |
3. 讨论 | 第29-31页 |
第二部分 沙门菌质粒毒力基因spvB对NF-κB信号通路的影响 | 第31-50页 |
1. 材料与方法 | 第33-40页 |
1.1 材料 | 第33-34页 |
1.2 方法 | 第34-40页 |
2. 结果 | 第40-47页 |
2.1 平板菌落计数法计数胞内活菌数 | 第40页 |
2.2 Western blot检测IκBα、p65、Phospho-p65 蛋白的表达 | 第40-41页 |
2.3 荧光显微镜下观察p65 在细胞中的定位 | 第41-42页 |
2.4 免疫共沉淀检测IκBα的泛素化水平 | 第42-43页 |
2.5 Western blot和比色法检测Caspase-3 的活性 | 第43-44页 |
2.6 真核表达载体pEGFP-N1-SpvB的构建及鉴定 | 第44页 |
2.7 双荧光素酶报告基因检测系统检测spvB对NF-κB通路的影响 | 第44-46页 |
2.8 Western blot检测spvB对NF-κB通路的影响 | 第46-47页 |
3. 讨论 | 第47-50页 |
小结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
综述 模式生物酵母在自噬研究中的应用 | 第55-65页 |
参考文献 | 第61-65页 |
攻读学位期间公开发表论文 | 第65-66页 |
本课题所获的基金资助 | 第66-67页 |
英文缩略词表 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-70页 |