| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 蓝舌病病毒概述 | 第12-15页 |
| 1.1.1 蓝舌病病毒的病原特征及分类地位 | 第12页 |
| 1.1.2 蓝舌病病毒基因组结构 | 第12-13页 |
| 1.1.3 蓝舌病病毒编码的蛋白 | 第13页 |
| 1.1.4 蓝舌病流行病学特征 | 第13-14页 |
| 1.1.5 蓝舌病临床症状和病理变化 | 第14页 |
| 1.1.6 蓝舌病病毒疫苗的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2 蓝舌病病毒的诊断方法 | 第15-17页 |
| 1.2.1 BTV血清学检测方法 | 第15-16页 |
| 1.2.2 BTV分子生物学检测方法 | 第16-17页 |
| 1.3 蓝舌病病毒的生物安全 | 第17-18页 |
| 1.4 单克隆抗体的研究进展 | 第18页 |
| 1.4.1 单克隆抗体的概述 | 第18页 |
| 1.4.2 蓝舌病病毒蛋白单克隆抗体的制备 | 第18页 |
| 1.5 研究的目的意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-37页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-24页 |
| 2.1.1 细胞、病毒与抗体 | 第20页 |
| 2.1.2 质粒与菌株 | 第20页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第20页 |
| 2.1.4 引物 | 第20页 |
| 2.1.5 培养基和主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.6 主要试剂的配制 | 第21-23页 |
| 2.1.7 主要实验仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-37页 |
| 2.2.1 重组VP7和VP2蛋白的表达与鉴定 | 第24-29页 |
| 2.2.2 重组VP7和VP2蛋白的纯化 | 第29-30页 |
| 2.2.3 免疫动物 | 第30页 |
| 2.2.4 杂交瘤筛选方法的建立 | 第30-31页 |
| 2.2.5 杂交瘤细胞株的建立与筛选 | 第31-33页 |
| 2.2.6 单克隆抗体效价的测定 | 第33页 |
| 2.2.7 单克隆抗体生物学特性鉴定 | 第33-37页 |
| 3 结果 | 第37-49页 |
| 3.1 S7基因重组表达载体的构建 | 第37页 |
| 3.2 L2基因表达载体的构建 | 第37-39页 |
| 3.3 VP7重组蛋白的表达 | 第39页 |
| 3.4 VP7重组蛋白的Western blot检测 | 第39-41页 |
| 3.5 VP2重组蛋白的表达与鉴定 | 第41-42页 |
| 3.6 重组蛋白的表达纯化及Western blot鉴定 | 第42页 |
| 3.7 动物免疫和杂交瘤细胞筛选方法的建立 | 第42-44页 |
| 3.8 杂交瘤细胞株建立和筛选 | 第44页 |
| 3.9 单克隆抗体效价的测定 | 第44页 |
| 3.10 单克隆抗体生物学特性鉴定 | 第44-49页 |
| 3.10.1 单克隆抗体亚类鉴定 | 第44页 |
| 3.10.2 杂交瘤细胞分泌单克隆抗体稳定性的鉴定结果 | 第44-45页 |
| 3.10.3 杂交瘤细胞染色体计数 | 第45页 |
| 3.10.4 间接免疫荧光试验结果 | 第45-46页 |
| 3.10.5 3H7免疫印迹鉴定 | 第46-47页 |
| 3.10.6 单克隆抗体的特异性分析 | 第47页 |
| 3.10.7 抗体叠加实验和单抗针对蛋白的初步鉴定 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 4.1 应用原核表达系统表达外源蛋白 | 第49页 |
| 4.2 以两种不同重组蛋白为抗原制备单克隆抗体的选择策略 | 第49-50页 |
| 4.3 单克隆抗体制备过程中的几个关键性环节 | 第50-51页 |
| 4.4 重组蛋白及单克隆抗体潜在应用价值 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录 | 第60-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第62页 |
