中英文缩略词表 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
前言 | 第11-13页 |
实验一 电针调控OA软骨Ras-Raf-MEK1/2-ERK1/2信号通路的实验研究 | 第13-28页 |
目的 | 第13页 |
引言 | 第13页 |
1 实验材料 | 第13-14页 |
2 实验方法与步骤 | 第14-17页 |
2.1 动物分组及饲养 | 第14-15页 |
2.2 实验动物骨关节炎模型的建立 | 第15页 |
2.3 实验动物处理措施 | 第15页 |
2.4 实验动物取材及材料处理 | 第15-16页 |
2.5 实验检测 | 第16-17页 |
2.6 统计学处理 | 第17页 |
3 结果 | 第17-23页 |
3.1 大体形态学观察及OA模型测评 | 第17-19页 |
3.2 体重变化情况 | 第19-20页 |
3.3 滑膜IL-1β表达变化 | 第20-21页 |
3.4 软骨组织ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-3、MMP-13、Ras、Raf、MEK1/2、p-ERK1/2、c-fos、c-jun及c-myc蛋白表达的变化 | 第21-23页 |
4 讨论 | 第23-27页 |
4.1 改良Hulth法建立膝骨关节炎动物模型是研究软骨退变的经典方法 | 第23-24页 |
4.2 手术造模改变关节的力学平衡是诱导大鼠OA模型的发病机理 | 第24页 |
4.3 电针治疗大鼠OA模型的选穴依据 | 第24页 |
4.4 形态学观察和滑膜炎症因子检测共同判定大鼠OA模型 | 第24页 |
4.5 电针抑制OA滑膜IL-1β表达 | 第24-25页 |
4.6 电针有效缓解关节软骨组织形态的改变 | 第25-26页 |
4.7 ERK1/2信号转导通路参与炎症因子介导的软骨退变 | 第26页 |
4.8 电针抑制OA ERK1/2信号转导通路及其下游因子表达 | 第26-27页 |
5 小结 | 第27-28页 |
实验二 电针后血清调控炎症软骨细胞Ras-Raf-MEK1/2-ERK1/2信号通路的实验研究 | 第28-47页 |
目的 | 第28页 |
引言 | 第28页 |
1 实验材料 | 第28-30页 |
2 实验方法与步骤 | 第30-34页 |
2.1 软骨细胞的分离与培养 | 第30-31页 |
2.2 软骨细胞鉴定 | 第31页 |
2.3 Elisa确定脂多糖时效、量效;检测电针后血清对炎症性软骨细胞的影响 | 第31-32页 |
2.4 电针后血清及U0126干预脂多糖诱导软骨细胞炎症模型的方法 | 第32页 |
2.5 软骨细胞蛋白的提取 | 第32页 |
2.6 Western-blot检测软骨细胞Ras、Raf、 MEK1/2、p-ERK1/2、c-fos、c-jun及c-myc蛋白表达变化 | 第32页 |
2.7 激光共聚焦检测软骨细胞collagenⅡ及ADAMTS-4蛋白表达变化 | 第32-33页 |
2.8 实时荧光定量PCR检测软骨细胞miRNAs表达 | 第33-34页 |
2.9 统计学处理 | 第34页 |
3 结果 | 第34-42页 |
3.1 软骨细胞形态学观察 | 第35页 |
3.2 软骨细胞鉴定 | 第35页 |
3.3 脂多糖诱导体外软骨细胞炎症的量效、时效 | 第35-37页 |
3.4 电针后血清对软骨细胞炎症模型MMP-3、MMP-9及MMP-13的影响 | 第37-38页 |
3.5 电针后血清对软骨细胞炎症模型Ras、Raf、 MEK、p-ERK、c-fos、c-jun及c-myc蛋白的影响 | 第38-40页 |
3.6 免疫荧光观察电针后血清对软骨细胞炎症模型ADAMTS4及CollagenⅡ蛋白的影响 | 第40-41页 |
3.7 电针后血清对软骨细胞炎症模型miR-34a、miR-27b及miR-146a基因的影响 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
4.1 Ⅱ型胶原免疫组化染色是鉴定体外软骨细胞的经典方法 | 第42页 |
4.2 LPS诱导建立体外软骨细胞炎症模型 | 第42-43页 |
4.3 电针后血清抑制软骨细胞炎症模型MMP-3、MMP-9及MMP-13表达 | 第43页 |
4.4 电针后血清抑制软骨细胞炎症模型ERK1/2信号通路及下游转录因子表达 | 第43-45页 |
4.5 电针后血清调控软骨细胞炎症模型miRNAs表达 | 第45页 |
5 小结 | 第45-47页 |
结论 | 第47-48页 |
不足与展望 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
附录 | 第53-55页 |
文献综述 | 第55-60页 |
参考文献 | 第58-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简历 | 第61-62页 |