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侧孢短芽孢杆菌A60激发子PeBL1鉴定和基因功能的研究

摘要第5-6页
Abstract第6页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-23页
    1.1 植物病害生物防治的现状及研究进展第12页
    1.2 植物的系统抗性第12-16页
        1.2.1 植物系统抗性的类型第12-13页
        1.2.2 植物系统抗性的信号转导途径第13-14页
        1.2.3 水杨酸和茉莉酸/乙烯信号转导途径的交联作用第14-15页
        1.2.4 信号转导途径中的关键点第15-16页
    1.3 侧孢短芽孢杆菌在生物防治中的应用第16-17页
        1.3.1 侧孢短芽孢杆菌的简介第16页
        1.3.2 侧孢短芽孢杆菌的杀虫功能第16页
        1.3.3 侧孢短芽孢杆菌的杀菌功能第16页
        1.3.4 侧孢短芽孢杆菌的诱导抗性功能第16-17页
        1.3.5 侧孢短芽孢杆菌应用现状及存在的问题第17页
    1.4 诱导植物防御反应的激发子第17-21页
        1.4.1 激发子的分类第17-19页
        1.4.2 激发子引起的植物防御反应第19页
        1.4.3 生防菌激发子第19-21页
    1.5 本研究的目的与意义第21页
    1.6 本研究技术路线第21-23页
第二章 侧孢短芽孢杆菌激发子的分离纯化及特性研究第23-34页
    2.1 引言第23页
    2.2 实验材料第23-24页
        2.2.1 菌株与植物材料第23页
        2.2.2 实验试剂与仪器第23-24页
        2.2.3 培养基与试剂配方第24页
    2.3 实验方法第24-27页
        2.3.1 侧孢短芽孢杆菌A60的培养及发酵液制备第24页
        2.3.2 粗蛋白的制备和生物活性的检测第24-25页
        2.3.3 蛋白激发子的分离纯化第25-26页
        2.3.4 蛋白激发子的特性研究第26-27页
    2.4 实验结果与分析第27-33页
        2.4.1 侧孢短芽孢杆菌蛋白激发子的分离纯化第27-30页
        2.4.2 蛋白激发子PeBL1的特性研究第30-33页
    2.5 本章小结与讨论第33-34页
第三章 激发子PeBL1的质谱鉴定、基因克隆及原核表达第34-46页
    3.1 引言第34页
    3.2 实验材料第34-35页
        3.2.1 菌株与植物材料第34页
        3.2.2 实验试剂与仪器第34-35页
        3.2.3 培养基与试剂配方第35页
    3.3 实验方法第35-40页
        3.3.1 蛋白激发子的质谱分析第35页
        3.3.2 侧孢短芽孢杆菌A60基因组DNA提取第35-36页
        3.3.3 PeBL1基因的PCR扩增第36页
        3.3.4 PCR产物的连接和转化第36-37页
        3.3.5 PeBL1-pMD18-T重组质粒的提取第37页
        3.3.6 PeBL1原核表达载体的构建第37-39页
        3.3.7 PeBL1的原核表达第39页
        3.3.8 重组蛋白的纯化及活性检测第39-40页
    3.4 实验结果与分析第40-45页
        3.4.1 蛋白激发子的质谱分析第40页
        3.4.2 PeBL1基因的克隆第40-41页
        3.4.3 PeBL1-pMD18-T质粒的获得第41页
        3.4.4 PeBL1的原核表达载体构建第41-42页
        3.4.5 重组蛋白的原核表达及纯化第42-44页
        3.4.6 重组蛋白的生物活性监测第44-45页
    3.5 本章小结与讨论第45-46页
第四章 PeBL1诱导的烟草防御反应第46-53页
    4.1 引言第46页
    4.2 实验材料第46-47页
        4.2.1 植物材料第46页
        4.2.2 实验试剂与仪器第46页
        4.2.3 培养基与试剂配方第46-47页
    4.3 实验方法第47-48页
        4.3.1 烟草的培养第47页
        4.3.2 烟草悬浮细胞的制作第47页
        4.3.3 PeBL1诱导烟草氧爆发的检测第47-48页
        4.3.4 PeBL1诱导烟草悬浮细胞胞外介质的碱化第48页
        4.3.5 PeBL1诱导烟草细胞酚类物质的积累第48页
        4.3.6 PeBL1诱导烟草细胞木质素的积累第48页
    4.4 实验结果与分析第48-52页
        4.4.1 烟草悬浮细胞的培养第48-49页
        4.4.2 PeBL1诱导烟草活性氧的积累第49-50页
        4.4.3 PeBL1诱导烟草悬浮细胞胞外介质的碱化第50-51页
        4.4.4 PeBL1诱导烟草细胞酚类物质的积累第51页
        4.4.5 PeBL1诱导烟草细胞木质素的积累第51-52页
    4.5 本章小结与讨论第52-53页
第五章 PeBL1激活的烟草系统抗性及其机制研究第53-62页
    5.1 引言第53页
    5.2 实验材料第53-54页
        5.2.1 菌株与植物材料第53页
        5.2.2 实验试剂与仪器第53-54页
        5.2.3 培养基与试剂配方第54页
    5.3 实验方法第54-56页
        5.3.1 PeBL1诱导烟草对TMV-GFP的抗性实验第54页
        5.3.2 PeBL1诱导烟草对假单胞杆菌的抗性实验第54-55页
        5.3.3 实时荧光定量PCR检测烟草防御相关基因第55-56页
    5.4 实验结果与分析第56-60页
        5.4.1 PeBL1诱导烟草对TMV-GFP的抗性实验第56-57页
        5.4.2 PeBL1诱导烟草对假单胞杆菌的抗性实验第57-59页
        5.4.3 实时荧光定量PCR检测烟草防御相关基因的表达第59-60页
    5.5 本章小结与讨论第60-62页
第六章 全文总结第62-63页
参考文献第63-71页
致谢第71-72页
作者简历第72页

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