摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-23页 |
1.1 植物病害生物防治的现状及研究进展 | 第12页 |
1.2 植物的系统抗性 | 第12-16页 |
1.2.1 植物系统抗性的类型 | 第12-13页 |
1.2.2 植物系统抗性的信号转导途径 | 第13-14页 |
1.2.3 水杨酸和茉莉酸/乙烯信号转导途径的交联作用 | 第14-15页 |
1.2.4 信号转导途径中的关键点 | 第15-16页 |
1.3 侧孢短芽孢杆菌在生物防治中的应用 | 第16-17页 |
1.3.1 侧孢短芽孢杆菌的简介 | 第16页 |
1.3.2 侧孢短芽孢杆菌的杀虫功能 | 第16页 |
1.3.3 侧孢短芽孢杆菌的杀菌功能 | 第16页 |
1.3.4 侧孢短芽孢杆菌的诱导抗性功能 | 第16-17页 |
1.3.5 侧孢短芽孢杆菌应用现状及存在的问题 | 第17页 |
1.4 诱导植物防御反应的激发子 | 第17-21页 |
1.4.1 激发子的分类 | 第17-19页 |
1.4.2 激发子引起的植物防御反应 | 第19页 |
1.4.3 生防菌激发子 | 第19-21页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第21页 |
1.6 本研究技术路线 | 第21-23页 |
第二章 侧孢短芽孢杆菌激发子的分离纯化及特性研究 | 第23-34页 |
2.1 引言 | 第23页 |
2.2 实验材料 | 第23-24页 |
2.2.1 菌株与植物材料 | 第23页 |
2.2.2 实验试剂与仪器 | 第23-24页 |
2.2.3 培养基与试剂配方 | 第24页 |
2.3 实验方法 | 第24-27页 |
2.3.1 侧孢短芽孢杆菌A60的培养及发酵液制备 | 第24页 |
2.3.2 粗蛋白的制备和生物活性的检测 | 第24-25页 |
2.3.3 蛋白激发子的分离纯化 | 第25-26页 |
2.3.4 蛋白激发子的特性研究 | 第26-27页 |
2.4 实验结果与分析 | 第27-33页 |
2.4.1 侧孢短芽孢杆菌蛋白激发子的分离纯化 | 第27-30页 |
2.4.2 蛋白激发子PeBL1的特性研究 | 第30-33页 |
2.5 本章小结与讨论 | 第33-34页 |
第三章 激发子PeBL1的质谱鉴定、基因克隆及原核表达 | 第34-46页 |
3.1 引言 | 第34页 |
3.2 实验材料 | 第34-35页 |
3.2.1 菌株与植物材料 | 第34页 |
3.2.2 实验试剂与仪器 | 第34-35页 |
3.2.3 培养基与试剂配方 | 第35页 |
3.3 实验方法 | 第35-40页 |
3.3.1 蛋白激发子的质谱分析 | 第35页 |
3.3.2 侧孢短芽孢杆菌A60基因组DNA提取 | 第35-36页 |
3.3.3 PeBL1基因的PCR扩增 | 第36页 |
3.3.4 PCR产物的连接和转化 | 第36-37页 |
3.3.5 PeBL1-pMD18-T重组质粒的提取 | 第37页 |
3.3.6 PeBL1原核表达载体的构建 | 第37-39页 |
3.3.7 PeBL1的原核表达 | 第39页 |
3.3.8 重组蛋白的纯化及活性检测 | 第39-40页 |
3.4 实验结果与分析 | 第40-45页 |
3.4.1 蛋白激发子的质谱分析 | 第40页 |
3.4.2 PeBL1基因的克隆 | 第40-41页 |
3.4.3 PeBL1-pMD18-T质粒的获得 | 第41页 |
3.4.4 PeBL1的原核表达载体构建 | 第41-42页 |
3.4.5 重组蛋白的原核表达及纯化 | 第42-44页 |
3.4.6 重组蛋白的生物活性监测 | 第44-45页 |
3.5 本章小结与讨论 | 第45-46页 |
第四章 PeBL1诱导的烟草防御反应 | 第46-53页 |
4.1 引言 | 第46页 |
4.2 实验材料 | 第46-47页 |
4.2.1 植物材料 | 第46页 |
4.2.2 实验试剂与仪器 | 第46页 |
4.2.3 培养基与试剂配方 | 第46-47页 |
4.3 实验方法 | 第47-48页 |
4.3.1 烟草的培养 | 第47页 |
4.3.2 烟草悬浮细胞的制作 | 第47页 |
4.3.3 PeBL1诱导烟草氧爆发的检测 | 第47-48页 |
4.3.4 PeBL1诱导烟草悬浮细胞胞外介质的碱化 | 第48页 |
4.3.5 PeBL1诱导烟草细胞酚类物质的积累 | 第48页 |
4.3.6 PeBL1诱导烟草细胞木质素的积累 | 第48页 |
4.4 实验结果与分析 | 第48-52页 |
4.4.1 烟草悬浮细胞的培养 | 第48-49页 |
4.4.2 PeBL1诱导烟草活性氧的积累 | 第49-50页 |
4.4.3 PeBL1诱导烟草悬浮细胞胞外介质的碱化 | 第50-51页 |
4.4.4 PeBL1诱导烟草细胞酚类物质的积累 | 第51页 |
4.4.5 PeBL1诱导烟草细胞木质素的积累 | 第51-52页 |
4.5 本章小结与讨论 | 第52-53页 |
第五章 PeBL1激活的烟草系统抗性及其机制研究 | 第53-62页 |
5.1 引言 | 第53页 |
5.2 实验材料 | 第53-54页 |
5.2.1 菌株与植物材料 | 第53页 |
5.2.2 实验试剂与仪器 | 第53-54页 |
5.2.3 培养基与试剂配方 | 第54页 |
5.3 实验方法 | 第54-56页 |
5.3.1 PeBL1诱导烟草对TMV-GFP的抗性实验 | 第54页 |
5.3.2 PeBL1诱导烟草对假单胞杆菌的抗性实验 | 第54-55页 |
5.3.3 实时荧光定量PCR检测烟草防御相关基因 | 第55-56页 |
5.4 实验结果与分析 | 第56-60页 |
5.4.1 PeBL1诱导烟草对TMV-GFP的抗性实验 | 第56-57页 |
5.4.2 PeBL1诱导烟草对假单胞杆菌的抗性实验 | 第57-59页 |
5.4.3 实时荧光定量PCR检测烟草防御相关基因的表达 | 第59-60页 |
5.5 本章小结与讨论 | 第60-62页 |
第六章 全文总结 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
作者简历 | 第72页 |