摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第13-30页 |
1.1 细菌非编码RNA研究进展 | 第13-23页 |
1.1.1 非编码RNA概述 | 第13-14页 |
1.1.2 非编码RNA的功能与鉴定 | 第14-19页 |
1.1.3 非编码RNA调控作用的分子机制 | 第19-23页 |
1.2 耐辐射异常球菌及其非编码RNA | 第23-28页 |
1.2.1 耐辐射异常球菌基本特征 | 第23-24页 |
1.2.2 耐辐射异常球菌极端抗性 | 第24-26页 |
1.2.3 耐辐射异常球菌的非编码RNA | 第26-28页 |
1.3 立题依据和技术路线 | 第28-30页 |
1.3.1 立题依据 | 第28-29页 |
1.3.2 技术路线 | 第29-30页 |
第二章 耐辐射异常球菌中drrA的进化分析与表达特性 | 第30-44页 |
2.1 材料和方法 | 第30-36页 |
2.1.1 实验菌株及培养基 | 第30页 |
2.1.2 实验材料 | 第30-31页 |
2.1.3 细菌的培养 | 第31页 |
2.1.4 细菌总RNA的提取 | 第31-32页 |
2.1.5 总RNA基因组的消化与反转录 | 第32页 |
2.1.6 荧光实时定量PCR | 第32-34页 |
2.1.7 Northern blot | 第34-36页 |
2.1.8 5‘RACE | 第36页 |
2.2 结果与分析 | 第36-42页 |
2.2.1 drrA基因的基本特征和生物信息学分析 | 第36-38页 |
2.2.2 drrA的Northern blot验证 | 第38页 |
2.2.3 drrA转录起始位点和方向 | 第38-39页 |
2.2.4 不同生长时期drrA的表达特征 | 第39-40页 |
2.2.5 不同非生物胁迫条件下drrA的表达 | 第40-41页 |
2.2.6 氧化胁迫条件下drrA的表达 | 第41-42页 |
2.3 讨论 | 第42-44页 |
第三章 耐辐射异常球菌 ΔdrrA突变株的构建和氧化功能分析 | 第44-61页 |
3.1 材料和方法 | 第45-52页 |
3.1.1 实验菌株和质粒 | 第45页 |
3.1.2 试剂耗材与仪器 | 第45页 |
3.1.3 培养基与抗生素 | 第45-46页 |
3.1.4 细菌的培养 | 第46页 |
3.1.5 细菌基因组总DNA和质粒DNA的提取 | 第46页 |
3.1.6 引物设计与PCR反应 | 第46-48页 |
3.1.7 DNA片段回收与纯化 | 第48页 |
3.1.8 DNA片段的酶切与连接 | 第48-49页 |
3.1.9 E.coli大肠杆菌细胞感受态的转化 | 第49-50页 |
3.1.10 耐辐射异常球菌感受态制备及DNA线性转化 | 第50页 |
3.1.11 耐辐射异常球菌生长曲线测定 | 第50页 |
3.1.12 氧化胁迫条件下菌株的生长 | 第50-51页 |
3.1.13 其他非生物胁迫条件下菌株的生长 | 第51页 |
3.1.14 细菌总RNA的提取 | 第51页 |
3.1.15 总RNA中基因组的消化与反转录 | 第51页 |
3.1.16 荧光实时定量PCR | 第51页 |
3.1.17 β-半乳糖苷酶活性测定 | 第51-52页 |
3.2 结果与分析 | 第52-58页 |
3.2.1 缺失突变株 ΔdrrA的构建和验证 | 第52-54页 |
3.2.2 drrA基因缺失对邻近基因表达的影响 | 第54-55页 |
3.2.3 drrA基因缺失对菌株生长的影响 | 第55-56页 |
3.2.4 drrA基因缺失降低菌株的氧化胁迫抗性 | 第56-57页 |
3.2.5 drrA基因缺失对菌株耐受其他非生物胁迫的影响 | 第57页 |
3.2.6 drrA基因缺失对氧化相关基因表达的影响 | 第57-58页 |
3.3 讨论 | 第58-61页 |
第四章 全文结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
作者简历 | 第73页 |