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BMP2对猪前体脂肪细胞分化的影响及其机制研究

中文摘要第3-5页
Abstract第5-6页
引言第10-11页
第一篇 文献综述第11-27页
    1.1 脂肪细胞与脂质沉积第11-22页
        1.1.1 脂肪细胞的来源第11-12页
        1.1.2 脂肪细胞的种类第12-13页
        1.1.3 前体脂肪细胞分化的转录调控第13-21页
        1.1.4 肌间脂肪与肉质的关系第21-22页
    1.2 BMP2的研究进展第22-25页
        1.2.1 BMP2基因第22-23页
        1.2.2 BMP2基因的信号转导第23-25页
        1.2.3 BMP2基因在诱导脂肪形成过程中的生物学功能第25页
    1.3 本研究目的及意义第25-27页
第二篇 研究内容第27-63页
    第1章 BMP2对猪前体脂肪细胞分化的影响第27-39页
        1.1 实验材料第27-28页
            1.1.1 实验动物第27页
            1.1.2 实验试剂第27页
            1.1.3 实验仪器及设备第27-28页
            1.1.4 配制的实验试剂第28页
        1.2 实验方法第28-31页
            1.2.1 猪前体脂肪细胞的分离培养第28-29页
            1.2.2 不同浓度BMP2的添加第29页
            1.2.3 油红O染色鉴定细胞形态第29页
            1.2.4 甘油三酯含量检测第29页
            1.2.5 细胞总RNA提取和浓度检测第29-30页
            1.2.6 RNA浓度测定及电泳检测第30页
            1.2.7 细胞cDNA的制备第30页
            1.2.8 实时荧光定量PCR检测第30-31页
            1.2.9 数据统计分析第31页
        1.3 结果第31-35页
            1.3.1 猪成熟脂肪细胞的鉴定第31-32页
            1.3.2 PPARγ、a P2、C/EBPα、BMP2的表达量变化第32-34页
            1.3.3 不同浓度BMP2对猪前体脂肪细胞分化的影响第34-35页
        1.4 讨论第35-38页
            1.4.1 猪原代前体脂肪细胞分离过程中的影响因素第35-36页
            1.4.2 猪前体脂肪细胞分化的诱导鉴定第36-37页
            1.4.3 BMP2对猪前体脂肪细胞分化的影响第37-38页
        1.5 小结第38-39页
    第2章 BMP2介导的猪前体脂肪细胞分化差异表达基因分析第39-53页
        2.1 实验材料第39页
        2.2 实验方法第39-42页
            2.2.1 猪前体脂肪细胞的复苏第39页
            2.2.2 添加BMP2并进行诱导分化第39页
            2.2.3 细胞总RNA提取和浓度检测第39页
            2.2.4 高通量测序分析第39-42页
            2.2.5 荧光定量PCR检测测序结果第42页
            2.2.6 数据分析第42页
        2.3 结果第42-49页
            2.3.1 BMP2处理组与未处理组细胞形态学检测第42-43页
            2.3.2 BMP2处理组与未处理(NC)组甘油三酯含量变化第43-45页
            2.3.3 BMP2处理组与未处理组标志基因PPARγ、aP2、C/EBPα mRNA表达量变化第45页
            2.3.4 测序用RNA质量鉴定第45-46页
            2.3.5 BMP2处理组与未处理(NC)组差异基因的筛选第46-47页
            2.3.6 通过荧光定量PCR对高通量测序结果的验证第47-49页
        2.4 讨论第49-52页
            2.4.1 BMP2对前体脂肪细胞的基因调控第50页
            2.4.2 BMP2在脂肪细胞增殖与分化中的作用第50-51页
            2.4.3 参与脂肪分化和脂肪细胞因子信号通路的基因第51页
            2.4.4 差异表达基因的筛选第51-52页
        2.5 小结第52-53页
    第3章 RGS2和FAD3基因在前体脂肪细胞分化中的作用第53-63页
        3.1 实验材料第53页
        3.2 研究方法第53-56页
            3.2.1 si RNA的合成第53页
            3.2.2 细胞转染第53页
            3.2.3 荧光定量PCR第53页
            3.2.4 蛋白提取及Western Blot第53-56页
            3.2.5 数据分析第56页
        3.3 结果第56-60页
            3.3.1 荧光定量PCR的结果第56-57页
            3.3.2 Western Blot结果第57-58页
            3.3.3 形态学检测第58-60页
            3.3.4 甘油三酯含量检测第60页
        3.4 讨论第60-62页
            3.4.1 RGS2在脂肪分化中的作用第60-61页
            3.4.2 FAD3在脂肪分化中的作用第61-62页
        3.5 小结第62-63页
结论第63-64页
致谢第64-65页
参考文献第65-80页
作者简介第80页

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