中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
引言 | 第10-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-27页 |
1.1 脂肪细胞与脂质沉积 | 第11-22页 |
1.1.1 脂肪细胞的来源 | 第11-12页 |
1.1.2 脂肪细胞的种类 | 第12-13页 |
1.1.3 前体脂肪细胞分化的转录调控 | 第13-21页 |
1.1.4 肌间脂肪与肉质的关系 | 第21-22页 |
1.2 BMP2的研究进展 | 第22-25页 |
1.2.1 BMP2基因 | 第22-23页 |
1.2.2 BMP2基因的信号转导 | 第23-25页 |
1.2.3 BMP2基因在诱导脂肪形成过程中的生物学功能 | 第25页 |
1.3 本研究目的及意义 | 第25-27页 |
第二篇 研究内容 | 第27-63页 |
第1章 BMP2对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第27-39页 |
1.1 实验材料 | 第27-28页 |
1.1.1 实验动物 | 第27页 |
1.1.2 实验试剂 | 第27页 |
1.1.3 实验仪器及设备 | 第27-28页 |
1.1.4 配制的实验试剂 | 第28页 |
1.2 实验方法 | 第28-31页 |
1.2.1 猪前体脂肪细胞的分离培养 | 第28-29页 |
1.2.2 不同浓度BMP2的添加 | 第29页 |
1.2.3 油红O染色鉴定细胞形态 | 第29页 |
1.2.4 甘油三酯含量检测 | 第29页 |
1.2.5 细胞总RNA提取和浓度检测 | 第29-30页 |
1.2.6 RNA浓度测定及电泳检测 | 第30页 |
1.2.7 细胞cDNA的制备 | 第30页 |
1.2.8 实时荧光定量PCR检测 | 第30-31页 |
1.2.9 数据统计分析 | 第31页 |
1.3 结果 | 第31-35页 |
1.3.1 猪成熟脂肪细胞的鉴定 | 第31-32页 |
1.3.2 PPARγ、a P2、C/EBPα、BMP2的表达量变化 | 第32-34页 |
1.3.3 不同浓度BMP2对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第34-35页 |
1.4 讨论 | 第35-38页 |
1.4.1 猪原代前体脂肪细胞分离过程中的影响因素 | 第35-36页 |
1.4.2 猪前体脂肪细胞分化的诱导鉴定 | 第36-37页 |
1.4.3 BMP2对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第37-38页 |
1.5 小结 | 第38-39页 |
第2章 BMP2介导的猪前体脂肪细胞分化差异表达基因分析 | 第39-53页 |
2.1 实验材料 | 第39页 |
2.2 实验方法 | 第39-42页 |
2.2.1 猪前体脂肪细胞的复苏 | 第39页 |
2.2.2 添加BMP2并进行诱导分化 | 第39页 |
2.2.3 细胞总RNA提取和浓度检测 | 第39页 |
2.2.4 高通量测序分析 | 第39-42页 |
2.2.5 荧光定量PCR检测测序结果 | 第42页 |
2.2.6 数据分析 | 第42页 |
2.3 结果 | 第42-49页 |
2.3.1 BMP2处理组与未处理组细胞形态学检测 | 第42-43页 |
2.3.2 BMP2处理组与未处理(NC)组甘油三酯含量变化 | 第43-45页 |
2.3.3 BMP2处理组与未处理组标志基因PPARγ、aP2、C/EBPα mRNA表达量变化 | 第45页 |
2.3.4 测序用RNA质量鉴定 | 第45-46页 |
2.3.5 BMP2处理组与未处理(NC)组差异基因的筛选 | 第46-47页 |
2.3.6 通过荧光定量PCR对高通量测序结果的验证 | 第47-49页 |
2.4 讨论 | 第49-52页 |
2.4.1 BMP2对前体脂肪细胞的基因调控 | 第50页 |
2.4.2 BMP2在脂肪细胞增殖与分化中的作用 | 第50-51页 |
2.4.3 参与脂肪分化和脂肪细胞因子信号通路的基因 | 第51页 |
2.4.4 差异表达基因的筛选 | 第51-52页 |
2.5 小结 | 第52-53页 |
第3章 RGS2和FAD3基因在前体脂肪细胞分化中的作用 | 第53-63页 |
3.1 实验材料 | 第53页 |
3.2 研究方法 | 第53-56页 |
3.2.1 si RNA的合成 | 第53页 |
3.2.2 细胞转染 | 第53页 |
3.2.3 荧光定量PCR | 第53页 |
3.2.4 蛋白提取及Western Blot | 第53-56页 |
3.2.5 数据分析 | 第56页 |
3.3 结果 | 第56-60页 |
3.3.1 荧光定量PCR的结果 | 第56-57页 |
3.3.2 Western Blot结果 | 第57-58页 |
3.3.3 形态学检测 | 第58-60页 |
3.3.4 甘油三酯含量检测 | 第60页 |
3.4 讨论 | 第60-62页 |
3.4.1 RGS2在脂肪分化中的作用 | 第60-61页 |
3.4.2 FAD3在脂肪分化中的作用 | 第61-62页 |
3.5 小结 | 第62-63页 |
结论 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-80页 |
作者简介 | 第80页 |