| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 术语及符号说明 | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-24页 |
| 1.1 几丁质及其降解产物的应用 | 第11-12页 |
| 1.2 β-N-乙酰己糖胺酶研究概况 | 第12-20页 |
| 1.2.1 几丁质酶与 β-N-乙酰己糖胺酶 | 第12-14页 |
| 1.2.2 β-N-乙酰己糖胺酶的分类 | 第14页 |
| 1.2.3 β-N-乙酰己糖胺酶的来源与性质 | 第14-16页 |
| 1.2.4 β-N-乙酰己糖胺酶的结构 | 第16-17页 |
| 1.2.5 β-N-乙酰己糖胺酶的酶学性质 | 第17-19页 |
| 1.2.6 β-N-乙酰己糖胺酶的功能 | 第19-20页 |
| 1.3 β-N-乙酰己糖胺酶的应用 | 第20-22页 |
| 1.3.1 β-N-乙酰己糖胺酶在几丁质降解中的应用 | 第20页 |
| 1.3.2 β-N-乙酰己糖胺酶在绿色农药中的应用 | 第20-21页 |
| 1.3.3 β-N-乙酰己糖胺酶在医学上的应用 | 第21页 |
| 1.3.4 β-N-乙酰己糖胺酶在水生生态毒理学中的应用 | 第21-22页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 1.5 研究内容 | 第23-24页 |
| 第2章 重组 β-N-乙酰己糖胺酶基因的异源表达及纯化 | 第24-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第24页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.4 常用溶液 | 第25-26页 |
| 2.1.5 常用培养基 | 第26-27页 |
| 2.1.6 DNA测序与引物合成 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-33页 |
| 2.2.1 序列分析 | 第27页 |
| 2.2.2 原核表达载体的构建 | 第27-29页 |
| 2.2.3 重组质粒的转化 | 第29-30页 |
| 2.2.4 重组 β-N-乙酰己糖胺酶在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中的诱导表达 | 第30页 |
| 2.2.5 重组 β-N-乙酰己糖胺酶的纯化和鉴定 | 第30-33页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第33-43页 |
| 2.3.1 重组 β-N-乙酰己糖胺酶的基因表达 | 第33-34页 |
| 2.3.2 重组 β-N-乙酰己糖胺酶的纯化和鉴定 | 第34-37页 |
| 2.3.3 重组 β-N-乙酰己糖胺酶的序列分析 | 第37-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-44页 |
| 2.5 本章小结 | 第44-46页 |
| 第3章 重组 β-N-乙酰己糖胺酶的酶学性质 | 第46-82页 |
| 3.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第46页 |
| 3.1.2 常用溶液 | 第46-47页 |
| 3.2 实验方法 | 第47-57页 |
| 3.2.1 重组 β-N-乙酰己糖胺酶的定量 | 第47页 |
| 3.2.2 重组 β-N-乙酰己糖胺酶的酶活测定方法 | 第47-49页 |
| 3.2.3 重组 β-N-乙酰己糖胺酶的酶学特性分析 | 第49-57页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第57-79页 |
| 3.3.1 重组 β-N-乙酰己糖胺酶r HL1nag的酶学性质研究 | 第57-65页 |
| 3.3.2 重组 β-N-乙酰己糖胺酶r JB10nag的酶学性质研究 | 第65-72页 |
| 3.3.3 重组 β-N-乙酰己糖胺酶r HJ5nag的酶学性质研究 | 第72-79页 |
| 3.4 讨论 | 第79-81页 |
| 3.5 本章小结 | 第81-82页 |
| 第4章 总结与展望 | 第82-86页 |
| 4.1 总结 | 第82-85页 |
| 4.2 创新 | 第85页 |
| 4.3 展望 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-96页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文和研究成果 | 第96-97页 |
| 附录 | 第97-105页 |
| 附录A 实验中所使用的缓冲液的配置 | 第97-99页 |
| A1 不同pH值的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液的配制 | 第97-98页 |
| A2 不同pH值的甘氨酸-NaOH缓冲液的配制 | 第98页 |
| A3 不同pH值的Tris-HCl缓冲液的配制 | 第98-99页 |
| 附录B 三个重组 β-N-乙酰己糖胺酶基因序列 | 第99-103页 |
| B1 HL1nag的核酸序列 | 第99-100页 |
| B2 JB10nag的核酸序列 | 第100-101页 |
| B3 HJ5nag的核酸序列 | 第101-103页 |
| 附录C 三个重组 β-N-乙酰己糖胺酶氨基酸序列 | 第103-105页 |
| C1 HL1nag的氨基酸序列 | 第103页 |
| C2 JB10nag的氨基酸序列 | 第103-104页 |
| C3 HJ5nag的氨基酸序列 | 第104-105页 |
| 附录D 氨基酸中英文对照及缩写表 | 第105页 |
