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大连紫海胆KLF8、KLF10、KLF13基因的克隆与表达及C/EBPs基因启动子活性研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 文献综述第12-19页
    1.1 引言第12页
    1.2 脂类的研究第12-13页
        1.2.1 脂类生理功能第12页
        1.2.2 脂类代谢第12页
        1.2.3 大连紫海胆中的脂类物质第12-13页
    1.3 脂类代谢中转录因子的研究第13-15页
        1.3.1 PPARγ第13页
        1.3.2 C/EBPs第13-14页
        1.3.3 SREBPs第14-15页
    1.4 KLF家族与脂类物质代谢第15-18页
        1.4.1 KLFs概述第15页
        1.4.2 LKF家族转录因子的结构特征第15-16页
        1.4.3 KLF家族转录因子的功能第16-18页
    1.5 研究意义和目的第18-19页
第二章 大连紫海胆KLF8、KLF10和KLF13基因的克隆和表达模式分析第19-37页
    2.1 材料与方法第19-25页
        2.1.1 实验材料第19页
        2.1.2 感受态的制备第19-20页
        2.1.3 总RNA的提取及cDNA第一链的合成第20页
        2.1.4 SnKLF8/10/13转录因子片段克隆和序列验证第20-21页
        2.1.5 获得SnKLF8/10/13转录因子全长cDNA第21-23页
        2.1.6 生物信息学分析第23页
        2.1.7 实时定量PCR检测SnKLF8/10/13基因的表达差异第23-25页
    2.2 结果和分析第25-35页
        2.2.1 SnKLF8/10/13基因的克隆和序列分析第25-31页
        2.2.2 SnKLF8/10/13蛋白氨基酸序列比对和系统进化树构建第31-34页
        2.2.3 SnKLF8/10/13基因的组织分布表达第34-35页
        2.2.4 SnKLF8/10/13基因在不同发育阶段雌雄性腺的表达差异第35页
    2.3 讨论第35-37页
第三章 大连紫海胆C/EBPS基因克隆和表达模式分析第37-59页
    3.1 材料与方法第37-42页
        3.1.1 实验材料第37页
        3.1.2 感受态的制备第37页
        3.1.3 总RNA和cDNA第一链的合成第37页
        3.1.4 大连紫海胆肌肉组织DNA的提取第37页
        3.1.5 SnC/EBPs转录因子第一片段的验证第37-38页
        3.1.6 检测SnC/EBPs 5`序列区域是否存在内含子第38-39页
        3.1.7 克隆SnC/EBPs转录因子启动子序列第39-41页
        3.1.8 生物信息学分析第41页
        3.1.9 qRT-PCR检测SnC/EBPs的表达差异第41-42页
    3.2 结果和分析第42-56页
        3.2.1 SnC/EBPα、SnC/EBPγ、SnC/EBPζ转录因子的克隆和序列分析第42-53页
        3.2.2 SnC/EBPα、SnC/EBPγ、SnC/EBPζ转录因子氨基酸序列比对和系统进化树构建第53-55页
        3.2.3 SnC/EBPs的组织分布表达第55-56页
        3.2.4 SnC/EBPs在不同发育阶段雌雄性腺的表达差异第56页
    3.3 讨论第56-59页
第四章 大连紫海胆C/EBPS启动子活性分析及介导KLF8/10/13 调控功能的研究第59-70页
    4.1 材料与方法第59-64页
        4.1.1 实验材料第59页
        4.1.2 感受态的制备第59页
        4.1.3 总RNA和cDNA第一链的合成第59页
        4.1.4 大连紫海胆肌肉组织DNA的提取第59-60页
        4.1.5 细胞准备第60页
        4.1.8 荧光素酶报告基因实验第60-64页
        4.1.9 SnC/EBPα、SnC/EBPγ、SnC/EBPζ 5`侧翼序列转录结合位点的预测第64页
    4.2 结果第64-68页
        4.2.1 SnC/EBPα启动子活性分析第64-65页
        4.2.2 SnC/EBPγ启动子活性分析第65页
        4.2.3 SnC/EBPζ启动子活性分析第65-66页
        4.2.4 SnKLF8/10/13转录因子与SnC/EBPs 5`侧翼调控区的互作第66-67页
        4.2.5 SnC/EBPs 5`侧翼调控区转录结合位点的预测第67-68页
    4.3 讨论第68-70页
第五章 结论和创新点第70-71页
    5.1 本研究得到以下结论第70页
    5.2 本研究创新点第70-71页
参考文献第71-78页
附录第78-86页
缩略词第86-87页
致谢第87-88页
作者简介第88页

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