摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-19页 |
1.1 引言 | 第12页 |
1.2 脂类的研究 | 第12-13页 |
1.2.1 脂类生理功能 | 第12页 |
1.2.2 脂类代谢 | 第12页 |
1.2.3 大连紫海胆中的脂类物质 | 第12-13页 |
1.3 脂类代谢中转录因子的研究 | 第13-15页 |
1.3.1 PPARγ | 第13页 |
1.3.2 C/EBPs | 第13-14页 |
1.3.3 SREBPs | 第14-15页 |
1.4 KLF家族与脂类物质代谢 | 第15-18页 |
1.4.1 KLFs概述 | 第15页 |
1.4.2 LKF家族转录因子的结构特征 | 第15-16页 |
1.4.3 KLF家族转录因子的功能 | 第16-18页 |
1.5 研究意义和目的 | 第18-19页 |
第二章 大连紫海胆KLF8、KLF10和KLF13基因的克隆和表达模式分析 | 第19-37页 |
2.1 材料与方法 | 第19-25页 |
2.1.1 实验材料 | 第19页 |
2.1.2 感受态的制备 | 第19-20页 |
2.1.3 总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第20页 |
2.1.4 SnKLF8/10/13转录因子片段克隆和序列验证 | 第20-21页 |
2.1.5 获得SnKLF8/10/13转录因子全长cDNA | 第21-23页 |
2.1.6 生物信息学分析 | 第23页 |
2.1.7 实时定量PCR检测SnKLF8/10/13基因的表达差异 | 第23-25页 |
2.2 结果和分析 | 第25-35页 |
2.2.1 SnKLF8/10/13基因的克隆和序列分析 | 第25-31页 |
2.2.2 SnKLF8/10/13蛋白氨基酸序列比对和系统进化树构建 | 第31-34页 |
2.2.3 SnKLF8/10/13基因的组织分布表达 | 第34-35页 |
2.2.4 SnKLF8/10/13基因在不同发育阶段雌雄性腺的表达差异 | 第35页 |
2.3 讨论 | 第35-37页 |
第三章 大连紫海胆C/EBPS基因克隆和表达模式分析 | 第37-59页 |
3.1 材料与方法 | 第37-42页 |
3.1.1 实验材料 | 第37页 |
3.1.2 感受态的制备 | 第37页 |
3.1.3 总RNA和cDNA第一链的合成 | 第37页 |
3.1.4 大连紫海胆肌肉组织DNA的提取 | 第37页 |
3.1.5 SnC/EBPs转录因子第一片段的验证 | 第37-38页 |
3.1.6 检测SnC/EBPs 5`序列区域是否存在内含子 | 第38-39页 |
3.1.7 克隆SnC/EBPs转录因子启动子序列 | 第39-41页 |
3.1.8 生物信息学分析 | 第41页 |
3.1.9 qRT-PCR检测SnC/EBPs的表达差异 | 第41-42页 |
3.2 结果和分析 | 第42-56页 |
3.2.1 SnC/EBPα、SnC/EBPγ、SnC/EBPζ转录因子的克隆和序列分析 | 第42-53页 |
3.2.2 SnC/EBPα、SnC/EBPγ、SnC/EBPζ转录因子氨基酸序列比对和系统进化树构建 | 第53-55页 |
3.2.3 SnC/EBPs的组织分布表达 | 第55-56页 |
3.2.4 SnC/EBPs在不同发育阶段雌雄性腺的表达差异 | 第56页 |
3.3 讨论 | 第56-59页 |
第四章 大连紫海胆C/EBPS启动子活性分析及介导KLF8/10/13 调控功能的研究 | 第59-70页 |
4.1 材料与方法 | 第59-64页 |
4.1.1 实验材料 | 第59页 |
4.1.2 感受态的制备 | 第59页 |
4.1.3 总RNA和cDNA第一链的合成 | 第59页 |
4.1.4 大连紫海胆肌肉组织DNA的提取 | 第59-60页 |
4.1.5 细胞准备 | 第60页 |
4.1.8 荧光素酶报告基因实验 | 第60-64页 |
4.1.9 SnC/EBPα、SnC/EBPγ、SnC/EBPζ 5`侧翼序列转录结合位点的预测 | 第64页 |
4.2 结果 | 第64-68页 |
4.2.1 SnC/EBPα启动子活性分析 | 第64-65页 |
4.2.2 SnC/EBPγ启动子活性分析 | 第65页 |
4.2.3 SnC/EBPζ启动子活性分析 | 第65-66页 |
4.2.4 SnKLF8/10/13转录因子与SnC/EBPs 5`侧翼调控区的互作 | 第66-67页 |
4.2.5 SnC/EBPs 5`侧翼调控区转录结合位点的预测 | 第67-68页 |
4.3 讨论 | 第68-70页 |
第五章 结论和创新点 | 第70-71页 |
5.1 本研究得到以下结论 | 第70页 |
5.2 本研究创新点 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
附录 | 第78-86页 |
缩略词 | 第86-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
作者简介 | 第88页 |