| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 RBM4α的概述 | 第10-14页 |
| 1.1.1 RBM4α的发现 | 第10页 |
| 1.1.2 RBM4α的基本结构 | 第10-11页 |
| 1.1.3 RBM4α的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.2 雌激素受体α概述 | 第14-18页 |
| 1.2.1 ERα简介 | 第14-15页 |
| 1.2.2 雌激素受体信号通路 | 第15-17页 |
| 1.2.3 ER与乳腺癌 | 第17-18页 |
| 1.3 本论文的选题依据和研究内容 | 第18-20页 |
| 1.3.1 选题依据 | 第18-19页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第19-20页 |
| 2 RBM4α与ERα之间的相互作用 | 第20-36页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第20-23页 |
| 2.2.1 仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.2 试剂和耗材 | 第21-22页 |
| 2.2.3 溶液的配制 | 第22-23页 |
| 2.2.4 菌种、细胞及质粒 | 第23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-31页 |
| 2.3.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
| 2.3.2 质粒的构建 | 第24-25页 |
| 2.3.3 质粒的转化与提取 | 第25-26页 |
| 2.3.4 细胞培养 | 第26页 |
| 2.3.5 质粒转染 | 第26-27页 |
| 2.3.6 免疫荧光(IF) | 第27页 |
| 2.3.7 免疫共沉淀(Co-IP) | 第27-28页 |
| 2.3.8 蛋白质印迹(Western blotting,WB) | 第28-30页 |
| 2.3.9 考马斯亮蓝(Bradfold)法测蛋白浓度 | 第30页 |
| 2.3.10 哺乳动物双杂交 | 第30-31页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第31-35页 |
| 2.4.1 IF检测RBM4α与ERα的共定位 | 第31-32页 |
| 2.4.2 哺乳动物双杂交检测RBM4α与ERα之间的相互作用 | 第32-34页 |
| 2.4.3 Co-IP检测RBM4α与ERα之间的相互作用 | 第34-35页 |
| 2.5 小结 | 第35-36页 |
| 3 RBM4α对ERα蛋白水平的影响 | 第36-43页 |
| 3.1 引言 | 第36页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第36-37页 |
| 3.2.1 仪器 | 第36页 |
| 3.2.2 试剂和耗材 | 第36页 |
| 3.2.3 溶液的配制 | 第36页 |
| 3.2.4 菌种、细胞及质粒 | 第36-37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第37页 |
| 3.3.2 质粒转染 | 第37页 |
| 3.3.3 免疫共沉淀实验(Co-IP) | 第37页 |
| 3.3.4 蛋白质印迹(Western blotting,WB) | 第37页 |
| 3.3.5 考马斯亮蓝(Bradfold)法测蛋白浓度 | 第37页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第37-42页 |
| 3.4.1 RBM4α对ERα表达的影响 | 第37-39页 |
| 3.4.2 RBM4α对ERα稳定性的影响 | 第39-40页 |
| 3.4.3 RBM4α对ERα蛋白降解的影响 | 第40-42页 |
| 3.5 小结 | 第42-43页 |
| 4 RBM4α对ERα功能的调控 | 第43-56页 |
| 4.1 引言 | 第43页 |
| 4.2 仪器与试剂 | 第43-44页 |
| 4.2.1 仪器 | 第43页 |
| 4.2.2 试剂和耗材 | 第43-44页 |
| 4.2.3 溶液的配制 | 第44页 |
| 4.2.4 菌种、细胞及质粒 | 第44页 |
| 4.3 实验方法 | 第44-49页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第44页 |
| 4.3.2 质粒转染 | 第44页 |
| 4.3.3 荧光素酶报告基因实验 | 第44-45页 |
| 4.3.4 RNA提取及检测 | 第45-46页 |
| 4.3.5 反转录PCR(Reverse Transcription,RT-PCR) | 第46-48页 |
| 4.3.6 琼脂糖凝胶电泳(Agarose gel electrophoresis) | 第48页 |
| 4.3.7 平板克隆形成 | 第48-49页 |
| 4.3.8 MTT比色法 | 第49页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第49-55页 |
| 4.4.1 RBM4α对ERα转录活性的影响 | 第49-51页 |
| 4.4.2 RBM4α对ERα下游靶基因mRNA水平的影响 | 第51-53页 |
| 4.4.3 RBM4α对ERα促乳腺癌细胞增殖能力的影响 | 第53-55页 |
| 4.5 小结 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
