| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要符号对照表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-28页 |
| 1.1 马铃薯介绍 | 第13页 |
| 1.2 转基因植物中常用的遗传转化方法 | 第13-14页 |
| 1.3 T-DNA在植物基因组中的整合分子特性 | 第14-15页 |
| 1.4 转基因植物外源基因拷贝数分析方法研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4.1 荧光原位杂交方法 | 第15页 |
| 1.4.2 Southern blot方法 | 第15-16页 |
| 1.4.3 实时荧光定量PCR方法 | 第16页 |
| 1.5 植物赤霉素研究进展 | 第16-25页 |
| 1.5.1 赤霉素的生物学功能 | 第16-17页 |
| 1.5.2 赤霉素的合成代谢途径 | 第17-19页 |
| 1.5.3 赤霉素代谢途径中的关键酶 | 第19-21页 |
| 1.5.4 赤霉素代谢途径中的调控机制 | 第21-24页 |
| 1.5.5 赤霉素的信号转导 | 第24-25页 |
| 1.6 本研究的意义目的和研究内容 | 第25-28页 |
| 1.6.1 研究的意义及目的 | 第25-26页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第26-27页 |
| 1.6.3 技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 马铃薯外源基因拷贝数检测方法的建立 | 第28-40页 |
| 2.1 材料 | 第28页 |
| 2.2 方法 | 第28-32页 |
| 2.2.1 DNA的提取和标准品的稀释 | 第28-30页 |
| 2.2.2 引物的设计及合成 | 第30页 |
| 2.2.3 马铃薯外源基因PCR检测 | 第30-31页 |
| 2.2.4 标准曲线的建立和目的基因的扩增 | 第31-32页 |
| 2.2.5 估算外源基因拷贝数 | 第32页 |
| 2.2.6 马铃薯田间表型鉴定 | 第32页 |
| 2.3 结果与分析 | 第32-39页 |
| 2.3.1 转基因马铃薯PCR检测 | 第32-34页 |
| 2.3.2 标准曲线的建立 | 第34页 |
| 2.3.3 转基因材料中Real-time PCR检测 | 第34-37页 |
| 2.3.4 外源基因插入对转基因马铃薯农艺性状的影响 | 第37-39页 |
| 2.4 小结 | 第39-40页 |
| 第三章 马铃薯植株不同部位的GA代谢途径关键酶基因的表达量分析 | 第40-57页 |
| 3.1 材料 | 第40-41页 |
| 3.1.1 马铃薯材料 | 第40页 |
| 3.1.2 仪器和试剂 | 第40-41页 |
| 3.2 方法 | 第41-44页 |
| 3.2.1 RNA的提取 | 第41页 |
| 3.2.2 第一链cDNA的合成 | 第41-42页 |
| 3.2.3 引物的设计与合成 | 第42-43页 |
| 3.2.4 荧光定量PCR反应 | 第43页 |
| 3.2.5 相对定量qRT-PCR分析 | 第43-44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-55页 |
| 3.3.1 M4P9材料基因表达量分析 | 第44-53页 |
| 3.3.2 青薯9号材料基因表达量分析 | 第53-55页 |
| 3.4 小结 | 第55-57页 |
| 第四章 马铃薯GA2-氧化酶基因的克隆与功能分析 | 第57-94页 |
| 4.1 材料 | 第57-58页 |
| 4.1.1 供试材料 | 第57页 |
| 4.1.2 菌株与质粒载体 | 第57页 |
| 4.1.3 试验用酶及试剂盒 | 第57页 |
| 4.1.4 储液配制 | 第57-58页 |
| 4.2 方法 | 第58-73页 |
| 4.2.1 马铃薯GA2ox1基因的克隆 | 第58-63页 |
| 4.2.2 植物表达载体的改造 | 第63-66页 |
| 4.2.3 植物表达载体 1383-GA2ox1的构建 | 第66-69页 |
| 4.2.4 植物表达载体的遗传转化 | 第69-71页 |
| 4.2.5 转化苗GA2ox1基因表达量的检测 | 第71-72页 |
| 4.2.6 StGA2ox1基因的半定量分析 | 第72-73页 |
| 4.2.7 转基因材料生理指标的测定 | 第73页 |
| 4.2.8 转基因材料外源基因拷贝数检测 | 第73页 |
| 4.3 结果与分析 | 第73-92页 |
| 4.3.1 马铃薯GA2ox1基因的克隆 | 第73-75页 |
| 4.3.2 马铃薯GA2ox1基因的生物信息学分析 | 第75-83页 |
| 4.3.3 植物表达载体的改造 | 第83-84页 |
| 4.3.4 植物表达载体的构建 | 第84-86页 |
| 4.3.5 遗传转化 | 第86页 |
| 4.3.6 转基因植株的鉴定 | 第86-87页 |
| 4.3.7 转基因植株中GA2ox1基因的表达量分析 | 第87-88页 |
| 4.3.8 转基因植株对非生物胁迫的响应 | 第88-89页 |
| 4.3.9 转基因植株生理指标测定 | 第89-91页 |
| 4.3.10 外源基因拷贝数检测 | 第91-92页 |
| 4.4 小结 | 第92-94页 |
| 第五章 马铃薯GA20-氧化酶基因的克隆与功能分析 | 第94-121页 |
| 5.1 材料 | 第94-95页 |
| 5.1.1 供试材料 | 第94页 |
| 5.1.2 菌株与质粒载体 | 第94页 |
| 5.1.3 试验用酶及试剂盒 | 第94-95页 |
| 5.1.4 储液配制 | 第95页 |
| 5.2 方法 | 第95-102页 |
| 5.2.1 马铃薯GA20ox1基因的克隆 | 第95-98页 |
| 5.2.2 植物表达载体的改造 | 第98页 |
| 5.2.3 植物表达载体 1383-GA2ox1的构建 | 第98-101页 |
| 5.2.4 植物表达载体的遗传转化 | 第101页 |
| 5.2.5 转化苗GA20ox1基因表达量的检测 | 第101页 |
| 5.2.6 StGA20ox1基因的半定量分析 | 第101页 |
| 5.2.7 转基因材料外源基因拷贝数检测 | 第101-102页 |
| 5.3 结果与分析 | 第102-119页 |
| 5.3.1 马铃薯GA20ox1基因的克隆 | 第102-104页 |
| 5.3.2 马铃薯GA20ox1基因的生物信息学分析 | 第104-111页 |
| 5.3.3 植物表达载体的构建 | 第111-113页 |
| 5.3.4 遗传转化 | 第113-114页 |
| 5.3.5 转基因植株的鉴定 | 第114-115页 |
| 5.3.6 转基因植株中GA20ox1基因的表达量分析 | 第115-116页 |
| 5.3.7 过量表达StGA20ox1基因对植株的影响 | 第116-118页 |
| 5.3.8 外源基因拷贝数检测 | 第118-119页 |
| 5.4 小结 | 第119-121页 |
| 第六章 讨论 | 第121-126页 |
| 6.1 荧光定量PCR检测拷贝数方法的应用 | 第121页 |
| 6.2 马铃薯材料M4P9体内赤霉素合成关键酶基因的表达分析 | 第121-122页 |
| 6.3 马铃薯对外源GA3的敏感性分析 | 第122-123页 |
| 6.4 马铃薯StGA20ox1基因的特性与功能分析 | 第123-124页 |
| 6.5 马铃薯StGA2ox1基因的特性与功能分析 | 第124-126页 |
| 第七章 结论 | 第126-128页 |
| 展望 | 第128-129页 |
| 参考文献 | 第129-143页 |
| 致谢 | 第143-144页 |
| 附录 | 第144-147页 |
| 个人简介 | 第147页 |
