| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1 鲤疱疹病毒II型研究进展 | 第12-18页 |
| 1.1 鲫养殖现状 | 第12页 |
| 1.2 鲫造血器官坏死症的临床症状及其流行病学研究 | 第12-14页 |
| 1.2.1 鲫造血器官坏死症的临床症状 | 第12-13页 |
| 1.2.2 鲫造血器官坏死症的流行病学研究 | 第13-14页 |
| 1.2.2.1 流行区域 | 第13页 |
| 1.2.2.2 宿主范围 | 第13页 |
| 1.2.2.3 传播方式 | 第13-14页 |
| 1.2.2.4 流行季节 | 第14页 |
| 1.3 鲤疱疹病毒II型的理化和生物学特性 | 第14页 |
| 1.4 鲤疱疹病毒II型的诊断技术 | 第14-17页 |
| 1.4.1 电镜诊断技术 | 第15页 |
| 1.4.2 细胞培养分离法 | 第15-16页 |
| 1.4.3 分子生物学诊断技术 | 第16-17页 |
| 1.5 鲫造血器官坏死症的防治措施 | 第17-18页 |
| 1.5.1 药物防治 | 第17页 |
| 1.5.2 免疫预防 | 第17页 |
| 1.5.3 生态防控 | 第17-18页 |
| 2 微载体培养技术研究进展 | 第18-20页 |
| 2.1 微载体培养的发明与发展 | 第18页 |
| 2.2 微载体的分类与特点 | 第18-20页 |
| 2.3 微载体培养的问题与展望 | 第20页 |
| 3 渔用疫苗的研究 | 第20-24页 |
| 3.1 渔用疫苗的发展 | 第20-21页 |
| 3.2 疫苗的分类 | 第21页 |
| 3.3 疫苗的免疫途径 | 第21-24页 |
| 3.3.1 注射免疫 | 第21-23页 |
| 3.3.2 浸泡免疫 | 第23页 |
| 3.3.3 口服免疫 | 第23-24页 |
| 4 本论文研究的目的及意义 | 第24-25页 |
| 第二章 鲫脑组织细胞与鲤疱疹病毒II型微载体规模化培养工艺研究 | 第25-39页 |
| 1 材料与方法 | 第25-29页 |
| 1.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 1.1.1 细胞与病毒 | 第25页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第25-26页 |
| 1.1.3 实验仪器与设备 | 第26页 |
| 1.2 试验方法 | 第26-29页 |
| 1.2.1 种子细胞与病毒培养 | 第26-27页 |
| 1.2.2 Cephodex微载体预处理 | 第27页 |
| 1.2.3 微载体培养GiCB细胞 | 第27页 |
| 1.2.4 最适间歇搅拌条件的确定 | 第27-28页 |
| 1.2.5 血清浓度对CIK细胞贴壁的影响 | 第28页 |
| 1.2.6 最适微载体用量的确定 | 第28页 |
| 1.2.7 最适细胞接种浓度的确定 | 第28页 |
| 1.2.8 最适搅拌速度的确定 | 第28页 |
| 1.2.9 细胞形态观察与计数 | 第28-29页 |
| 1.2.10 病毒感染及电镜观察 | 第29页 |
| 1.2.11 病毒增殖曲线的测定 | 第29页 |
| 1.2.12 实验数据的统计与分析 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-37页 |
| 2.1 GiCB细胞静置培养的形态及病变效应 | 第29-30页 |
| 2.2 最适间歇搅拌条件的确定 | 第30页 |
| 2.3 血清的浓度对GiCB细胞贴壁的影响 | 第30-32页 |
| 2.4 微载体浓度对细胞生长的影响 | 第32页 |
| 2.5 接种密度对GiCB细胞生长的影响 | 第32-33页 |
| 2.6 搅拌速度对GiCB细胞生长的影响 | 第33-34页 |
| 2.7 GiCB细胞在Cephodex微载体上的形态观察 | 第34页 |
| 2.8 病毒感染与电镜观察 | 第34-35页 |
| 2.9 病毒滴度测定结果 | 第35-36页 |
| 2.10 病毒增殖曲线测定 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 CYHV-2 微载体细胞培养灭活疫苗浸泡免疫异育银鲫效果研究 | 第39-54页 |
| 1 材料与方法 | 第39-46页 |
| 1.1 实验材料 | 第39-41页 |
| 1.1.1 试验鱼及饲养条件 | 第39页 |
| 1.1.2 病毒及细胞系 | 第39页 |
| 1.1.3 实验试剂 | 第39-40页 |
| 1.1.4 实验仪器与设备 | 第40-41页 |
| 1.1.5 引物设计 | 第41页 |
| 1.2 实验方法 | 第41-45页 |
| 1.2.1 微载体细胞培养灭活疫苗的制备 | 第41-42页 |
| 1.2.2 疫苗的无菌检验与安全性检测 | 第42页 |
| 1.2.3 浸泡免疫 | 第42-43页 |
| 1.2.4 Real-time PCR检测免疫相关基因表达量 | 第43-45页 |
| 1.2.5 攻毒感染实验 | 第45页 |
| 1.2.5.1 免疫4周后攻毒感染实验 | 第45页 |
| 1.2.5.2 免疫8周后攻毒感染实验 | 第45页 |
| 1.2.6 实验鱼体病毒检测 | 第45页 |
| 1.2.7 实验鱼体病毒载量测定 | 第45页 |
| 1.3 实验数据的统计与分析 | 第45-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-52页 |
| 2.1 疫苗的无菌检验与安全性检验 | 第46-47页 |
| 2.2 C3、IL-11 和IgM基因的表达量变化 | 第47-49页 |
| 2.3 免疫保护效果 | 第49-50页 |
| 2.3.1 免疫4周后攻毒感染实验 | 第49页 |
| 2.3.2 免疫8周后攻毒感染实验 | 第49-50页 |
| 2.4 PCR病毒检测结果 | 第50-51页 |
| 2.5 免疫鱼病毒载量测定 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-65页 |
| 附录一 | 第65-66页 |
| 附录二 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 主要试剂配制 | 第68页 |
