摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 引言 | 第12-23页 |
1.1 文献综述 | 第12页 |
1.1.1 斑节对虾简介 | 第12页 |
1.2 斑节对虾病害防治与免疫的研究现状 | 第12-16页 |
1.2.1 斑节对虾的病害防治 | 第12-13页 |
1.2.2 斑节对虾的先天免疫 | 第13-15页 |
1.2.3 抗菌肽研究现状 | 第15-16页 |
1.3 JNK信号通路及部分基因研究现状 | 第16-21页 |
1.3.1 JNK信号通路 | 第16-17页 |
1.3.2 C-JUN基因简介 | 第17-18页 |
1.3.3 ATF-2 基因简介 | 第18-19页 |
1.3.4 JNK、C-JUN、ATF-2 基因之间的关系 | 第19-21页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第21页 |
1.5 技术路线 | 第21-23页 |
第二章 JNK信号通路部分成员克隆表达及生物信息学分析 | 第23-51页 |
2.1 实验材料 | 第23-27页 |
2.1.1 实验动物 | 第23页 |
2.1.2 实验仪器 | 第23-24页 |
2.1.3 实验试剂与配制 | 第24-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-37页 |
2.2.1 实验用品预处理 | 第27-28页 |
2.2.2 总RNA提取和CDNA的合成 | 第28-29页 |
2.2.3 PMJNK、PMC-JUN、PMATF-2 基因CDNA全长的克隆 | 第29-37页 |
2.2.4 PMJNK、PMC-JUN、PMATF-2 三个基因的序列分析,多重比对分析和进化分析 | 第37页 |
2.3 实验结果 | 第37-49页 |
2.3.1 斑节对虾PMJNK基因序列信息分析 | 第37-41页 |
2.3.2 斑节对虾PMC-JUN基因序列信息分析 | 第41-45页 |
2.3.3 斑节对虾PMATF-2 基因序列信息分析 | 第45-49页 |
2.4 讨论 | 第49-51页 |
第三章 JNK信号通路部分成员表达特征及模式分析 | 第51-56页 |
3.1 实验材料 | 第51页 |
3.1.1 实验动物 | 第51页 |
3.1.2 实验仪器 | 第51页 |
3.1.3 实验试剂与配制 | 第51页 |
3.2 实验方法 | 第51-53页 |
3.2.1 实验用品预处理 | 第51页 |
3.2.2 总RNA提取和CDNA的合成 | 第51-53页 |
3.3 实验结果 | 第53-54页 |
3.3.1 PMJNK的组织的表达分析 | 第53页 |
3.3.2 PMC-JUN的组织的表达分析 | 第53页 |
3.3.3 PMATF-2 的组织的表达分析 | 第53-54页 |
3.4 讨论 | 第54-56页 |
第四章 靶向JNK信号通路部分成员基因沉默后转录水平上的关联分析 | 第56-66页 |
4.1 实验材料 | 第56页 |
4.1.1 实验动物 | 第56页 |
4.1.2 实验仪器 | 第56页 |
4.1.3 实验试剂与配制 | 第56页 |
4.2 实验方法 | 第56-60页 |
4.2.1 PMJNK基因双链RNA干扰实验 | 第56-59页 |
4.2.2 PM C-JUN基因双链RNA干扰实验 | 第59页 |
4.2.3 PM ATF-2 基因双链RNA干扰实验 | 第59-60页 |
4.2.4 实验用品预处理 | 第60页 |
4.2.5 斑节对虾RNA提取和CDNA的合成 | 第60页 |
4.3 实验结果 | 第60-63页 |
4.3.1 PMJNK基因沉默及相关基因表达分析和原位杂交 | 第60-61页 |
4.3.2 PMC-JUN基因沉默及相关基因表达分析和原位杂交 | 第61-62页 |
4.3.3 PMATF-2 基因沉默及相关基因表达分析和原位杂交 | 第62-63页 |
4.4 讨论 | 第63-66页 |
第五章 细菌侵染后JNK信号通路部分成员的表达差异分析 | 第66-81页 |
5.1 实验材料 | 第66-67页 |
5.1.1 实验动物 | 第66页 |
5.1.2 实验仪器 | 第66页 |
5.1.3 实验试剂与配制 | 第66-67页 |
5.2 实验方法 | 第67-69页 |
5.2.1 实验用品预处理 | 第67-68页 |
5.2.2 总RNA提取和CDNA的合成 | 第68页 |
5.2.3 JNK原位杂交试验 | 第68-69页 |
5.2.4 C-JUN原位杂交试验 | 第69页 |
5.2.5 ATF-2 原位杂交试验 | 第69页 |
5.3 实验结果 | 第69-78页 |
5.3.1 细菌刺激后PMJNK应激表达分析及原位杂交 | 第69-72页 |
5.3.2 细菌刺激后PMC-JUN应激表达分析及原位杂交 | 第72-74页 |
5.3.3 细菌刺激后PMATF-2 应激表达分析及原位杂交 | 第74-76页 |
5.3.4 细菌刺激后抗菌肽表达分析 | 第76-78页 |
5.4 讨论 | 第78-81页 |
第六章 细菌刺激下沉默目的基因后的功能分析 | 第81-95页 |
6.1 实验材料 | 第81页 |
6.1.1 实验动物 | 第81页 |
6.1.2 实验仪器 | 第81页 |
6.1.3 实验试剂与配制 | 第81页 |
6.2 实验方法 | 第81-82页 |
6.2.1 实验用品预处理 | 第81-82页 |
6.2.2 总RNA提取和CDNA的合成 | 第82页 |
6.2.3 原位杂交 | 第82页 |
6.3 实验结果 | 第82-93页 |
6.3.1 细菌刺激下PMJNK基因沉默及相关基因表达分析和原位杂交 | 第82-85页 |
6.3.2 细菌刺激下PMC-JUN基因沉默及相关基因表达分析和原位杂交 | 第85-88页 |
6.3.3 细菌刺激下PMATF-2 基因沉默及相关基因表达分析和原位杂交 | 第88-91页 |
6.3.4 细菌刺激后抗菌肽表达分析 | 第91-93页 |
6.4 讨论 | 第93-95页 |
总结 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-112页 |
附录 | 第112-113页 |
致谢 | 第113页 |