| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第10-26页 |
| 1.1 嗜水气单胞菌的毒力研究进展 | 第10-18页 |
| 1.1.1 嗜水气单胞菌流行病学 | 第10-15页 |
| 1.1.2 毒力因子 | 第15-18页 |
| 1.2 胞内存活的研究现状及分析 | 第18-26页 |
| 1.2.1 胞内存活模型的建立 | 第18-19页 |
| 1.2.2 细菌胞内存活机制 | 第19-20页 |
| 1.2.3 药物对细菌胞内存活的影响 | 第20页 |
| 1.2.4 胞内存活相关基因研究 | 第20-21页 |
| 1.2.5 胞内存活计数方法 | 第21-22页 |
| 1.2.6 侧翼序列克隆方法 | 第22-25页 |
| 1.2.7 转座子和转座子标签技术 | 第25-26页 |
| 第2章 嗜水气单胞菌胞内存活突变库的构建、筛选和鉴定 | 第26-41页 |
| 2.1 材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 试验用菌和鱼 | 第26页 |
| 2.1.2 试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.3 器材 | 第27页 |
| 2.2 试验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 突变库的构建 | 第27-29页 |
| 2.2.2 A.hydrophila胞内存活缺陷株的筛选 | 第29-30页 |
| 2.2.3 PCR鉴定突变株 | 第30-31页 |
| 2.2.4 Southern鉴定突变株为单位点插入突变 | 第31-34页 |
| 2.3 结果与分析 | 第34-40页 |
| 2.3.1 PLOF/Km质粒的提取及其转化E.coli Sm10 | 第34页 |
| 2.3.2 头肾巨噬细胞分离 | 第34-35页 |
| 2.3.3 胞内存活突变株的初筛结果 | 第35-37页 |
| 2.3.4 胞内存活突变株的复筛结果 | 第37页 |
| 2.3.5 突变株的鉴定 | 第37-40页 |
| 2.4 讨论 | 第40-41页 |
| 第3章 嗜水气单胞菌在巨噬细胞内存活相关基因的鉴定 | 第41-53页 |
| 3.1 材料 | 第41-42页 |
| 3.1.1 试验用菌和载体 | 第41页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 3.1.3 主要实验仪器 | 第41-42页 |
| 3.2 试验方法 | 第42-44页 |
| 3.2.1 基因组DNA的提取 | 第42页 |
| 3.2.2 TAIL-PCR克隆侧翼序列 | 第42-44页 |
| 3.2.3 PCR产物连接、转化和测序 | 第44页 |
| 3.2.4 序列分析 | 第44页 |
| 3.3 结果 | 第44-51页 |
| 3.3.1 TAIL-PCR结果 | 第44-45页 |
| 3.3.2 基因序列结果 | 第45-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-53页 |
| 第4章 胞内存活相关基因flgE功能研究 | 第53-63页 |
| 4.1 材料 | 第53-54页 |
| 4.1.1 试验用菌和鱼 | 第53页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第53-54页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第54页 |
| 4.2 实验方法 | 第54-56页 |
| 4.2.1 胞内存活实验 | 第54页 |
| 4.2.2 内化实验 | 第54页 |
| 4.2.3 运动性实验 | 第54-55页 |
| 4.2.4 透射电子显微镜 | 第55页 |
| 4.2.5 细菌对粘液的粘附实验 | 第55页 |
| 4.2.6 趋化性实验 | 第55页 |
| 4.2.7 生物膜实验 | 第55-56页 |
| 4.2.8 细胞毒性实验 | 第56页 |
| 4.2.9 半数致死量（LD_(50)）测定 | 第56页 |
| 4.3 结果 | 第56-61页 |
| 4.3.1 胞内存活能力 | 第56-57页 |
| 4.3.2 细菌内化 | 第57页 |
| 4.3.3 细菌运动性 | 第57-58页 |
| 4.3.4 透射电子显微镜 | 第58页 |
| 4.3.5 细菌对粘液的粘附 | 第58-59页 |
| 4.3.6 趋化实验 | 第59页 |
| 4.3.7 生物膜 | 第59-60页 |
| 4.3.8 细胞毒性实验 | 第60页 |
| 4.3.9 半致死量（LD_(50)） | 第60-61页 |
| 4.4 讨论 | 第61-63页 |
| 第5章 小结与展望 | 第63-65页 |
| 5.1 小结 | 第63-64页 |
| 5.2 展望 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-78页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第78页 |
