| 摘要 | 第8-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 第一章 绪论 | 第17-45页 |
| 1.1 烟草基因组 | 第17-19页 |
| 1.1.1 烟属起源与分子系统进化 | 第17页 |
| 1.1.2 烟草基因组研究进展 | 第17-19页 |
| 1.2 突变体库构建及其在功能基因组中的应用 | 第19-24页 |
| 1.2.1 植物突变体在功能能基因组研究中的应用 | 第19-20页 |
| 1.2.2 植物突变体库构建 | 第20-24页 |
| 1.3 插入位点侧翼序列的获取 | 第24-33页 |
| 1.3.1 质粒拯救 | 第25-26页 |
| 1.3.2 反向PCR | 第26-28页 |
| 1.3.3 TAIL-PCR | 第28-30页 |
| 1.3.4 FPNI-PCR | 第30-32页 |
| 1.3.5 单引物PCR | 第32-33页 |
| 1.4 烟碱的合成代谢与调控 | 第33-39页 |
| 1.4.1 烟碱合成代谢的分子机制 | 第33-34页 |
| 1.4.2 烟碱的转运 | 第34-35页 |
| 1.4.3 烟碱与植物碳氮代谢 | 第35-36页 |
| 1.4.4 烟碱与植物光合作用 | 第36页 |
| 1.4.5 烟碱与植物激素 | 第36-39页 |
| 1.5 植物抗病性调控 | 第39-41页 |
| 1.5.1 烟草白粉病介绍 | 第39页 |
| 1.5.2 抗病性与植物激素 | 第39-41页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第41-43页 |
| 1.6.1 烟碱和抗病突变体在烟草生产中的应用价值 | 第41页 |
| 1.6.2 烟碱和抗病突变体在烟草分子农业中的应用前景 | 第41-42页 |
| 1.6.3 烟碱和抗病突变体在基础研究中的应用 | 第42页 |
| 1.6.4 茉莉酸辅助筛选烟碱和抗病突变体的意义 | 第42-43页 |
| 1.7 研究方法与技术路线 | 第43-45页 |
| 1.7.1 研究方法 | 第43-44页 |
| 1.7.2 技术路线 | 第44-45页 |
| 第二章 基于茉莉酸敏感性筛选烟草烟碱激活标签突变体 | 第45-57页 |
| 2.1 引言 | 第45-46页 |
| 2.2 实验材料 | 第46页 |
| 2.3 实验试剂 | 第46页 |
| 2.4 实验方法 | 第46-48页 |
| 2.4.1 茉莉酸敏感性筛选 | 第46-47页 |
| 2.4.2 烟碱突变体筛选 | 第47-48页 |
| 2.5 实验结果 | 第48-54页 |
| 2.5.1 基于JA敏感性筛选T1代烟碱激活标签突变体 | 第48-51页 |
| 2.5.2 突变体验证 | 第51-54页 |
| 2.6 讨论 | 第54-56页 |
| 2.6.1 JA敏感性辅助筛选烟碱突变体是一种高通量筛选突变体的新方法 | 第54-55页 |
| 2.6.2 JA突变体烟碱含量与茉莉酸敏感性相关 | 第55-56页 |
| 2.7 本章小结 | 第56-57页 |
| 第三章 突变体生理特性分析 | 第57-87页 |
| 3.1 引言 | 第57-58页 |
| 3.2 实验材料 | 第58页 |
| 3.3 实验方法 | 第58-59页 |
| 3.3.1 材料准备 | 第58页 |
| 3.3.2 碳氮代谢酶活性测定 | 第58页 |
| 3.3.3 总氮及可溶性糖含量测定 | 第58页 |
| 3.3.4 激素含量测定 | 第58-59页 |
| 3.3.5 叶绿素含量测定 | 第59页 |
| 3.3.6 光合指标测定 | 第59页 |
| 3.4 实验结果 | 第59-81页 |
| 3.4.1 烟碱突变体生理特性分析 | 第59-70页 |
| 3.4.2 特殊烟碱突变体生理特性分析 | 第70-81页 |
| 3.5 讨论 | 第81-85页 |
| 3.5.1 突变体碳氮代谢指标评价 | 第81-82页 |
| 3.5.2 突变体内源激素水平评价 | 第82-84页 |
| 3.5.3 突变体光合特性评价 | 第84-85页 |
| 3.6 本章小结 | 第85-87页 |
| 第四章 突变体分子特性分析 | 第87-99页 |
| 4.0 引言 | 第87-88页 |
| 4.1 实验材料 | 第88页 |
| 4.2 实验试剂 | 第88页 |
| 4.3 实验方法 | 第88-91页 |
| 4.3.1 突变体基因表达分析样品制备 | 第88页 |
| 4.3.2 Southern杂交分析 | 第88-90页 |
| 4.3.3 荧光定量PCR | 第90-91页 |
| 4.4 实验结果 | 第91-95页 |
| 4.4.1 突变体的T-DNA插入鉴定 | 第91页 |
| 4.4.2 突变体的NtMYC2基因的表达 | 第91-92页 |
| 4.4.3 突变体烟碱相关基因表达 | 第92-95页 |
| 4.5 讨论 | 第95-97页 |
| 4.6 本章小结 | 第97-99页 |
| 第五章 突变体侧翼序列获得及候选基因分析 | 第99-115页 |
| 5.1 引言 | 第99页 |
| 5.2 实验材料 | 第99-100页 |
| 5.3 实验方法 | 第100-106页 |
| 5.3.1 突变体侧翼序列获得 | 第100-104页 |
| 5.3.2 突变体侧翼序列比对 | 第104-105页 |
| 5.3.3 突变体候选基因分析 | 第105-106页 |
| 5.4 实验结果 | 第106-111页 |
| 5.4.1 侧翼序列扩增方法优化 | 第106页 |
| 5.4.2 侧翼序列扩增方法比较 | 第106-108页 |
| 5.4.3 突变体插入位点附近基因筛选 | 第108-109页 |
| 5.4.4 突变体插入位点附近基因表达分析 | 第109-111页 |
| 5.4.5 候选基因茉莉酸应答分析 | 第111页 |
| 5.5 讨论 | 第111-113页 |
| 5.5.1 突变体侧翼序列分析 | 第111-112页 |
| 5.5.2 突变体候选基因筛选 | 第112-113页 |
| 5.6 本章小结 | 第113-115页 |
| 第六章 特殊烟碱突变体nit17的候选基因验证 | 第115-135页 |
| 6.1 引言 | 第115-117页 |
| 6.2 实验材料 | 第117页 |
| 6.3 实验方法 | 第117-122页 |
| 6.3.1 突变体nit17共分离鉴定 | 第117-118页 |
| 6.3.2 NtPDR30基因克隆 | 第118页 |
| 6.3.3 过表达载体构建 | 第118页 |
| 6.3.4 农杆菌转化 | 第118-119页 |
| 6.3.5 叶盘法转化烟草 | 第119页 |
| 6.3.6 烟碱含量测定 | 第119页 |
| 6.3.7 抗病表型分析 | 第119-121页 |
| 6.3.8 基因表达分析 | 第121-122页 |
| 6.4 实验结果 | 第122-129页 |
| 6.4.1 突变体“nit17”共分离鉴定 | 第122-123页 |
| 6.4.2 过表达植株抗病性分析 | 第123-124页 |
| 6.4.3 NtPDR30的亚细胞定位 | 第124-125页 |
| 6.4.4 NtPDR30的同源性分析及蛋白结构域预测 | 第125-126页 |
| 6.4.5 NtPDR30基因受植物激素诱导的表达模式分析 | 第126-128页 |
| 6.4.6 NtPDR30的烟碱转运功能分析 | 第128-129页 |
| 6.5 讨论 | 第129-132页 |
| 6.5.1 NtPDR30基因参与烟草抗病防御 | 第129-130页 |
| 6.5.2 NtPDR30基因受JA诱导表达 | 第130-131页 |
| 6.5.3 NtPDR30基因可能抑制烟碱转运 | 第131页 |
| 6.5.4 茉莉素调控的烟碱代谢和病害抗性之间存在紧密关联 | 第131-132页 |
| 6.6 本章小结 | 第132-135页 |
| 第七章 主要结论及研究展望 | 第135-139页 |
| 7.1 主要结论 | 第135-136页 |
| 7.1.1 茉莉酸辅助筛选烟草激活标签突变体库 | 第135页 |
| 7.1.2 突变体生理特性分析 | 第135页 |
| 7.1.3 突变体分子特性分析 | 第135-136页 |
| 7.1.4 突变体侧翼序列获得及候选基因分析 | 第136页 |
| 7.1.5 特殊烟碱突变体nit17候选基因鉴定 | 第136页 |
| 7.2 创新点和意义 | 第136-137页 |
| 7.3 不足与展望 | 第137-139页 |
| 参考文献 | 第139-161页 |
| 致谢 | 第161-163页 |
| 在学期间的科研成果 | 第163页 |
