摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 文献综述 | 第10-19页 |
1.1 金银花研究概况 | 第10页 |
1.2 过氧化物酶在酶促褐变中的作用 | 第10-11页 |
1.3 过氧化物酶研究概况 | 第11-16页 |
1.3.1 过氧化物酶的结构及分类 | 第11-12页 |
1.3.2 过氧化物酶分离纯化研究 | 第12-14页 |
1.3.3 过氧化物酶酶学性质研究 | 第14-15页 |
1.3.4 过氧化物酶抑制效应研究 | 第15-16页 |
1.3.5 过氧化物酶抑制动力学研究 | 第16页 |
1.4 论文研究的背景及内容 | 第16-19页 |
第2章 金银花过氧化物酶的提取 | 第19-25页 |
2.1 实验材料 | 第19页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第19页 |
2.1.2 仪器与设备 | 第19页 |
2.2 试验方法 | 第19-21页 |
2.2.1 酶活力测定 | 第19-20页 |
2.2.2 蛋白质含量的测定 | 第20页 |
2.2.3 比活力的计算 | 第20页 |
2.2.4 金银花过氧化物酶提取方法 | 第20页 |
2.2.5 金银花过氧化物酶提取单因素实验 | 第20-21页 |
2.2.6 金银花过氧化物酶提取正交优化 | 第21页 |
2.3 结果与分析 | 第21-24页 |
2.3.1 浸提时间对金银花过氧化物酶比活力的影响 | 第21-22页 |
2.3.2 料液比对金银花过氧化物酶比活力的影响 | 第22页 |
2.3.3 缓冲液pH对金银花过氧化物酶比活力的影响 | 第22-23页 |
2.3.4 正交实验结果 | 第23-24页 |
2.4 本章小结 | 第24-25页 |
第3章 金银花过氧化物酶的纯化 | 第25-38页 |
3.1 实验材料 | 第25-26页 |
3.1.1 材料与试剂 | 第25页 |
3.1.2 仪器与设备 | 第25-26页 |
3.2 金银花过氧化物酶的三相分离纯化 | 第26-27页 |
3.2.1 金银花过氧化物酶提取单因素实验 | 第26页 |
3.2.2 金银花过氧化物酶三相分离纯化的响应面优化 | 第26-27页 |
3.2.3 三相分离法脱色效果测定 | 第27页 |
3.3 DEAE-纤维素离子交换柱层析 | 第27-28页 |
3.4 PAGE电泳对纯化效果的测定 | 第28-29页 |
3.5 结果与分析 | 第29-36页 |
3.5.1 pH值对金银花过氧化物酶回收率和纯化倍数的影响 | 第29-30页 |
3.5.2 硫酸铵质量分数对金银花过氧化物酶回收率和纯化倍数的影响 | 第30页 |
3.5.3 提取液与叔丁醇体积比对金银花过氧化物酶回收率和纯化倍数的影响 | 第30-31页 |
3.5.4 金银花过氧化物酶三相分离纯化的响应面优化回归模型的建立 | 第31-34页 |
3.5.5 三相分离法脱色效果 | 第34-35页 |
3.5.6 DEAE-纤维素离子交换层析纯化 | 第35-36页 |
3.6 本章小结 | 第36-38页 |
第4章 金银花过氧化物酶的酶学性质及抑制动力学研究 | 第38-54页 |
4.1 实验材料 | 第39页 |
4.1.1 材料与试剂 | 第39页 |
4.1.2 仪器与设备 | 第39页 |
4.2 金银花过氧化物酶酶学性质研究 | 第39-40页 |
4.2.1 底物浓度对金银花过氧化物酶酶促反应速率的影响 | 第39页 |
4.2.2 金银花过氧化物酶米氏常数测定 | 第39-40页 |
4.2.3 金银花过氧化物酶的双底物反应机制 | 第40页 |
4.2.4 金银花过氧化物酶最适温度及热稳定性 | 第40页 |
4.2.5 金银花过氧化物酶最适pH及pH稳定性 | 第40页 |
4.2.6 金属离子及抑制剂对金银花过氧化物酶活性的影响 | 第40页 |
4.3 不同抑制剂的抑制效应 | 第40-41页 |
4.4 不同抑制剂的抑制作用类型 | 第41页 |
4.5 不同抑制剂的可逆抑制动力学 | 第41页 |
4.6 结果与分析 | 第41-52页 |
4.6.1 底物浓度对金银花过氧化物酶酶促反应速率的影响 | 第41-42页 |
4.6.2 金银花过氧化物酶米氏常数 | 第42-43页 |
4.6.3 金银花过氧化物酶的双底物反应机制 | 第43-44页 |
4.6.4 金银花过氧化物酶最适温度及热稳定性 | 第44页 |
4.6.5 金银花过氧化物酶最适pH及pH稳定性 | 第44-45页 |
4.6.6 金属离子及抑制剂对金银花过氧化物酶活性的影响 | 第45-46页 |
4.6.7 L-半胱氨酸对金银花过氧化物酶的抑制效应 | 第46页 |
4.6.8 柠檬酸对金银花过氧化物酶的抑制效应 | 第46-47页 |
4.6.9 焦亚硫酸钠对金银花过氧化物酶的抑制效应 | 第47页 |
4.6.10 SDS对金银花过氧化物酶的抑制效应 | 第47-48页 |
4.6.11 不同抑制剂的抑制作用类型 | 第48-49页 |
4.6.12 L-半胱氨酸对金银花过氧化物酶的可逆抑制动力学 | 第49-50页 |
4.6.13 SDS对金银花过氧化物酶的可逆抑制动力学 | 第50-52页 |
4.7 本章小结 | 第52-54页 |
第5章 结论与展望 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第64页 |