致谢 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-23页 |
1.1 C_3和C_4光合途径的研究现状 | 第10-13页 |
1.1.1 C_3和C_4光合途径的比较 | 第10-11页 |
1.1.2 利用C_4途径改善C_3植物光合特性的研究进展 | 第11-12页 |
1.1.3 利用C_4途径改善C_3植物光合特性存在的问题 | 第12-13页 |
1.2 干旱胁迫对植物生理特性影响的研究进展 | 第13-16页 |
1.2.1 干旱胁迫对植物光合作用的影响 | 第13-14页 |
1.2.2 干旱胁迫对作物生长形态的影响 | 第14页 |
1.2.3 干旱胁迫对渗透调节系统的影响 | 第14-15页 |
1.2.4 干旱胁迫对抗氧化系统的影响 | 第15页 |
1.2.5 干旱胁迫对膜系统的影响 | 第15-16页 |
1.3 C_4途径关键酶功能的研究进展 | 第16-18页 |
1.3.1 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)功能的研究 | 第16-17页 |
1.3.2 丙酮酸磷酸二激酶(PPDK)功能的研究 | 第17页 |
1.3.3 依赖于NADP的苹果酸酶(NADP-ME)功能的研究 | 第17-18页 |
1.4 转C_4途径关键酶基因植株的光合特性及其对干旱胁迫响应的研究进展 | 第18-20页 |
1.4.1 转C_4途径关键酶基因植株光合特性的表现 | 第18-20页 |
1.4.2 转C_4途径关键酶基因植株对干旱胁迫响应的研究 | 第20页 |
1.5 农杆菌介导的植株基因转化研究进展 | 第20-21页 |
1.5.1 农杆菌介导的原理及影响转化的因素 | 第20-21页 |
1.5.2 农杆菌介导转化方法的优缺点 | 第21页 |
1.6 研究的目的意义 | 第21页 |
1.7 技术路线 | 第21-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-34页 |
2.1 转ME、PKM基因拟南芥材料的创制 | 第23-27页 |
2.1.1 转ME、PKM基因拟南芥材料的转化 | 第23-24页 |
2.1.1.1 农杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
2.1.1.2 重组质粒的农杆菌冻融转化 | 第23页 |
2.1.1.3 PCR验证及菌种保存 | 第23页 |
2.1.1.4 转ME、PKM基因拟南芥株系的转化 | 第23-24页 |
2.1.2 转ME、PKM基因拟南芥材料的分子验证 | 第24-27页 |
2.1.2.1 转ME、PKM基因拟南芥株系的PCR检测 | 第24-25页 |
2.1.2.2 转ME、PKM基因拟南芥植株的Western blot | 第25-27页 |
2.2 转基因拟南芥株系研究的实验方法 | 第27-34页 |
2.2.1 实验材料的种植方法及干旱胁迫处理方法 | 第27页 |
2.2.2 5种基因型转基因材料的PCR验证 | 第27-28页 |
2.2.3 转基因拟南芥株系基因表达量分析 | 第28-30页 |
2.2.3.1 转基因拟南芥植株总RNA提取 | 第28-29页 |
2.2.3.2 反转录 | 第29页 |
2.2.3.3 PCR引物设计 | 第29-30页 |
2.2.3.4 荧光定量PCR | 第30页 |
2.2.4 转基因拟南芥植株的光合酶活性的测定 | 第30-32页 |
2.2.4.1 酶液提取与定量 | 第30-31页 |
2.2.4.2 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)活性测定 | 第31页 |
2.2.4.3 丙酮酸激酶(PPDK)活性测定 | 第31-32页 |
2.2.4.4 苹果酸酶(NADP-ME)活性测定 | 第32页 |
2.2.5 转基因拟南芥株系光合速率的测定 | 第32页 |
2.2.6 转基因拟南芥株系SOD、POD、CAT等保护酶活性测定 | 第32-34页 |
2.2.6.1 酶液提取 | 第32页 |
2.2.6.2 过氧化氢酶(CAT)活性测定 | 第32页 |
2.2.6.3 过氧化物酶(POD)活性测定 | 第32-33页 |
2.2.6.4 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第33-34页 |
第三章 结果与分析 | 第34-52页 |
3.1 转ME、PPDK基因拟南芥纯合株系的创制 | 第34-36页 |
3.1.1 重组质粒的农杆菌转化鉴定 | 第34页 |
3.1.2 转基因拟南芥植株的PPT初筛 | 第34-35页 |
3.1.3 转ME、PKM基因拟南芥株系的PCR检测结果 | 第35页 |
3.1.4 转ME、PKM基因拟南芥株系的WESTERN BLOT分析 | 第35-36页 |
3.2 5种基因型转基因拟南芥材料的PCR验证 | 第36-37页 |
3.3 转基因拟南芥株系基因表达量的变化 | 第37-38页 |
3.4 转基因拟南芥株系光合酶活性的变化 | 第38-43页 |
3.4.1 转基因拟南芥株系PEPC酶活性的变化 | 第38-39页 |
3.4.2 转基因拟南芥株系NADP-ME酶活性的变化 | 第39-41页 |
3.4.3 转基因拟南芥株系PPDK酶活性的变化 | 第41-43页 |
3.5 转基因拟南芥株系的光合速率的变化 | 第43-45页 |
3.6 转基因拟南芥株系水分利用效率的变化 | 第45-46页 |
3.7 转基因拟南芥株系保护酶活性的变化 | 第46-52页 |
3.7.1 转基因拟南芥株系CAT酶活性的变化 | 第46-48页 |
3.7.2 转基因拟南芥株系POD酶活性的变化 | 第48-50页 |
3.7.3 转基因拟南芥株系SOD酶活性的变化 | 第50-52页 |
第四章 讨论 | 第52-55页 |
4.1 干旱胁迫条件下,转入C_4途径关键酶基因对拟南芥光合速率的影响 | 第52-54页 |
4.2 干旱胁迫条件下,转入C_4途径关键酶基因对拟南芥保护酶活性的影响 | 第54-55页 |
第五章 结论和研究的创新点以及下一步的工作设想 | 第55-57页 |
5.1 结论和研究的创新点 | 第55页 |
5.1.1 本研究的结论 | 第55页 |
5.1.2 本研究的创新点 | 第55页 |
5.2 下一步的工作设想 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-69页 |
ABSTRACT | 第69-71页 |