英文缩略词 | 第4-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
前言 | 第16-32页 |
1. 核受体简介 | 第16-17页 |
2. 视黄醇X受体 | 第17-23页 |
2.1 RXRα的基因型功能 | 第19-21页 |
2.2 RXRα非基因型功能 | 第21-23页 |
3. TNFα/TNF-R1信号转导通路 | 第23-29页 |
3.1 TNFα与TNFR1复合体 | 第24-25页 |
3.2 TNFα激活Caspase介导的凋亡通路 | 第25-26页 |
3.3 TNFα与NFκB信号通路 | 第26-27页 |
3.4 TNFα激活JNK | 第27-29页 |
4. 硝基苯乙烯类化合物与核受体 | 第29-30页 |
5. 本研究的目的及科学意义 | 第30-32页 |
材料和方法 | 第32-53页 |
1. 实验材料 | 第32-39页 |
1.1 主要实验仪器 | 第32-33页 |
1.2 主要实验试剂 | 第33页 |
1.3 引物 | 第33-34页 |
1.4 细胞株、菌株及质粒 | 第34页 |
1.5 主要溶液 | 第34-39页 |
2. 实验方法 | 第39-53页 |
2.1 His-RXRα/LBD蛋白制备 | 第40-41页 |
2.2 配体受体竞争结合实验 | 第41页 |
2.3 细胞的培养和冻存 | 第41-42页 |
2.4 载体的构建 | 第42-44页 |
2.5 细胞转染试验 | 第44-46页 |
2.6 蛋白提取与Western Blot | 第46-47页 |
2.7 免疫共沉淀实验 | 第47页 |
2.8 免疫荧光染色 | 第47-49页 |
2.9 报告基因检测 | 第49页 |
2.10 克隆形成实验 | 第49-50页 |
2.11 稳定表达tRXRα、全长RXRα的细胞系的建立 | 第50页 |
2.12 裸鼠移植瘤模型 | 第50-51页 |
2.13 等温量热滴定法(ITG)测定蛋白质与Z-10和Z-12的结合 | 第51页 |
2.14 统计学分析 | 第51-53页 |
结果 | 第53-80页 |
1. tRXRα参与NFκB信号通路的调节 | 第53-59页 |
1.1 tRXRα参与TNFα激活NFκB信号通路 | 第53-55页 |
1.2 tRXRα与TRAF2相互作用 | 第55-59页 |
2. Z-10、Z-12是RXRα的特异性配体 | 第59-66页 |
2.1 Z-0选择性激活RXRα的转录活性 | 第59-60页 |
2.2 Z-10和Z-12是优化的Z-0衍生物 | 第60-62页 |
2.3 Z-10和Z-12可以直接与RXRα结合 | 第62-64页 |
2.4 硝基是Z化合物结合并激活RXRα转录活性所必需的 | 第64-66页 |
3. Z-10,Z-12通过RXRα抑制TNFα激活的NFκB活性 | 第66-70页 |
3.1 Z-10,Z-12抑制TNFα激活的NFκB活性 | 第66-69页 |
3.2 Z-10,Z-12抑制TNFα诱导的NFκB激活是RXRα依赖性的 | 第69-70页 |
4. Z-10,Z-12与TNFα协同诱导细胞凋亡 | 第70-80页 |
4.1 Z-10,Z-12激活RXRα依赖的外源性凋亡途径 | 第70-75页 |
4.2 Z-10/TNFα抑制MCF-7细胞的克隆形成 | 第75-78页 |
4.3 Z-12/TNFα抑制裸鼠移植瘤的生长 | 第78-80页 |
讨论 | 第80-86页 |
1、RXRα的限制性切割 | 第80-81页 |
2、tRXRα与NFκB信号通路的相互作用 | 第81-82页 |
3、Z化合物作为独特的RXRa配体以一种特殊的方式与RXRα结合并有效调控tRXRα/NFκB信号通路3、Z化合物作为独特的RXRa配体W—种特殊的方式与RXRa结合并有效调控tRXRa/NFKB信号通路 | 第82-83页 |
4、靶向tRXRα/NFκB的抗肿瘤药物研究 | 第83-84页 |
5、Z-12联合TNFα抑制裸鼠移植瘤的生长 | 第84-86页 |
结论 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-101页 |
博士研究生期间主要科研成果 | 第101-102页 |
致谢 | 第102页 |