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高同型半胱氨酸诱导新蛋白Carom的表达在内皮细胞的作用

摘要第3-7页
Abstract第7-9页
中英文缩写词表第14-16页
引言第16-25页
第一部分:同型半胱氨酸诱导Carom抑制内皮细胞的迁移第25-62页
    材料与方法第25-41页
        1.1 实验材料第25-28页
            1.1.1 实验研究对象第25页
            1.1.2 实验试剂第25-27页
            1.1.3 主要仪器第27-28页
        1.2 实验方法第28-40页
            1.2.1 器材的准备第28页
            1.2.2 小鼠基因型检测第28-29页
            1.2.3 内皮细胞的培养第29页
            1.2.4 血浆和内皮细胞Hcy,SAM,SAH水平的检测第29-30页
            1.2.5 小鼠肺组织内皮细胞的分离第30-31页
            1.2.6 RT-PCR检测相关mRNA表达水平第31-34页
            1.2.7 流式细胞仪(FACS)检测CBS KO小鼠Carom, CD31,CD45的表达第34-35页
            1.2.8 Western blot检测Carom ,SP1,EGFR,H3蛋白表达水平第35-38页
            1.2.9 细胞划痕实验第38页
            1.2.10 自配试剂第38-40页
        1.3 统计学处理第40-41页
    结果第41-52页
        2.1 同型半胱氨酸诱导内皮细胞Carom mRNA和蛋白的表达第41-42页
        2.2 Carom蛋白在高同型半胱氨酸(Tg-hCBS Cbs-/-)小鼠内皮细胞中的表达增加第42-43页
        2.3 同型半胱氨酸诱导内皮细胞甲基化水平降低,在转录水平调节内皮细胞Carom的表达第43-44页
        2.4 Carom microarray筛选第44-46页
        2.5 同型半胱氨酸与Carom对内皮细胞CXCL10表达的变化第46-48页
        2.6 Carom可通过CXCL10介导同型半胱氨酸引起的内皮细胞迁移功能受损第48-50页
        2.7 Carom调节CXCL10表达的增加可能与细胞核内Carom表达相关第50-52页
    讨论第52-62页
        3.1 高同型半胱氨酸引起内皮细胞功能受损第52-54页
        3.2 F-BAR蛋白的重要性第54-55页
        3.3 HHcy可诱导F-BAR蛋白Carom的表达增加及其机制第55-57页
        3.4 Carom下游的目的基因CXCLl0的表达及功能第57-59页
        3.5 Carom对CXCLl0 m RNA的表达的调节机制第59-62页
第二部分:Carom介导同型半胱氨酸对内皮细胞血管再生抑制第62-89页
    材料和方法第62-76页
        1.1 实验材料第62-64页
            1.1.1 研究对象第62页
            1.1.2 实验试剂第62-63页
            1.1.3 主要仪器第63-64页
        1.2 实验方法第64-75页
            1.2.1 器材的准备第64页
            1.2.2 内皮细胞的培养第64-65页
            1.2.3 内皮细胞血管再生实验和细胞增殖实验第65-66页
            1.2.4 流式细胞仪(FACS)检测内皮细胞VEGFR2的表达第66-67页
            1.2.5 内皮细胞膜的生物素标记及细胞内吞实验第67-68页
            1.2.6 Western blot检测Carom ,VEGFR2蛋白表达水平第68-71页
            1.2.7 免疫共沉淀联合质谱筛选第71-73页
            1.2.8 自配试剂第73-75页
        1.3 统计学处理第75-76页
    结果第76-82页
        2.1 Carom可能介导同型半胱氨酸对内皮细胞血管再生的抑制第76-78页
        2.2 Carom对内皮细胞VEGFR2的影响第78-79页
        2.3 Hcy可增加Carom的细胞内吞第79-80页
        2.4 免疫共沉淀联合质谱分析Carom结合蛋白第80-82页
    讨论第82-89页
        3.1 Carom对内皮细胞血管再生的抑制及其机制第82-84页
        3.2 免疫共沉淀联合质谱分析Carom相互作用蛋白第84-86页
        3.3 内皮祖细胞的重要性及未来的研究方向第86-89页
结论第89-90页
致谢第90-91页
参考文献第91-102页
攻读博士学位期间的研究成果第102-103页
综述第103-108页
    参考文献第106-108页

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