摘要 | 第3-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
中英文缩写词表 | 第14-16页 |
引言 | 第16-25页 |
第一部分:同型半胱氨酸诱导Carom抑制内皮细胞的迁移 | 第25-62页 |
材料与方法 | 第25-41页 |
1.1 实验材料 | 第25-28页 |
1.1.1 实验研究对象 | 第25页 |
1.1.2 实验试剂 | 第25-27页 |
1.1.3 主要仪器 | 第27-28页 |
1.2 实验方法 | 第28-40页 |
1.2.1 器材的准备 | 第28页 |
1.2.2 小鼠基因型检测 | 第28-29页 |
1.2.3 内皮细胞的培养 | 第29页 |
1.2.4 血浆和内皮细胞Hcy,SAM,SAH水平的检测 | 第29-30页 |
1.2.5 小鼠肺组织内皮细胞的分离 | 第30-31页 |
1.2.6 RT-PCR检测相关mRNA表达水平 | 第31-34页 |
1.2.7 流式细胞仪(FACS)检测CBS KO小鼠Carom, CD31,CD45的表达 | 第34-35页 |
1.2.8 Western blot检测Carom ,SP1,EGFR,H3蛋白表达水平 | 第35-38页 |
1.2.9 细胞划痕实验 | 第38页 |
1.2.10 自配试剂 | 第38-40页 |
1.3 统计学处理 | 第40-41页 |
结果 | 第41-52页 |
2.1 同型半胱氨酸诱导内皮细胞Carom mRNA和蛋白的表达 | 第41-42页 |
2.2 Carom蛋白在高同型半胱氨酸(Tg-hCBS Cbs-/-)小鼠内皮细胞中的表达增加 | 第42-43页 |
2.3 同型半胱氨酸诱导内皮细胞甲基化水平降低,在转录水平调节内皮细胞Carom的表达 | 第43-44页 |
2.4 Carom microarray筛选 | 第44-46页 |
2.5 同型半胱氨酸与Carom对内皮细胞CXCL10表达的变化 | 第46-48页 |
2.6 Carom可通过CXCL10介导同型半胱氨酸引起的内皮细胞迁移功能受损 | 第48-50页 |
2.7 Carom调节CXCL10表达的增加可能与细胞核内Carom表达相关 | 第50-52页 |
讨论 | 第52-62页 |
3.1 高同型半胱氨酸引起内皮细胞功能受损 | 第52-54页 |
3.2 F-BAR蛋白的重要性 | 第54-55页 |
3.3 HHcy可诱导F-BAR蛋白Carom的表达增加及其机制 | 第55-57页 |
3.4 Carom下游的目的基因CXCLl0的表达及功能 | 第57-59页 |
3.5 Carom对CXCLl0 m RNA的表达的调节机制 | 第59-62页 |
第二部分:Carom介导同型半胱氨酸对内皮细胞血管再生抑制 | 第62-89页 |
材料和方法 | 第62-76页 |
1.1 实验材料 | 第62-64页 |
1.1.1 研究对象 | 第62页 |
1.1.2 实验试剂 | 第62-63页 |
1.1.3 主要仪器 | 第63-64页 |
1.2 实验方法 | 第64-75页 |
1.2.1 器材的准备 | 第64页 |
1.2.2 内皮细胞的培养 | 第64-65页 |
1.2.3 内皮细胞血管再生实验和细胞增殖实验 | 第65-66页 |
1.2.4 流式细胞仪(FACS)检测内皮细胞VEGFR2的表达 | 第66-67页 |
1.2.5 内皮细胞膜的生物素标记及细胞内吞实验 | 第67-68页 |
1.2.6 Western blot检测Carom ,VEGFR2蛋白表达水平 | 第68-71页 |
1.2.7 免疫共沉淀联合质谱筛选 | 第71-73页 |
1.2.8 自配试剂 | 第73-75页 |
1.3 统计学处理 | 第75-76页 |
结果 | 第76-82页 |
2.1 Carom可能介导同型半胱氨酸对内皮细胞血管再生的抑制 | 第76-78页 |
2.2 Carom对内皮细胞VEGFR2的影响 | 第78-79页 |
2.3 Hcy可增加Carom的细胞内吞 | 第79-80页 |
2.4 免疫共沉淀联合质谱分析Carom结合蛋白 | 第80-82页 |
讨论 | 第82-89页 |
3.1 Carom对内皮细胞血管再生的抑制及其机制 | 第82-84页 |
3.2 免疫共沉淀联合质谱分析Carom相互作用蛋白 | 第84-86页 |
3.3 内皮祖细胞的重要性及未来的研究方向 | 第86-89页 |
结论 | 第89-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-102页 |
攻读博士学位期间的研究成果 | 第102-103页 |
综述 | 第103-108页 |
参考文献 | 第106-108页 |