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向日葵枯萎病菌的分离鉴定、致病力分化以及侵染过程的研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
缩略语表第13-14页
1 引言第14-32页
    1.1 镰刀菌第14-15页
        1.1.1 镰刀菌侵染引起的危害第14页
        1.1.2 有益镰刀菌的应用第14-15页
    1.2 镰刀菌引起的向日葵枯萎病研究进展第15-16页
    1.3 镰刀菌的多样性第16-18页
    1.4 镰刀菌的分类第18-20页
    1.5 镰刀菌的鉴定第20-23页
        1.5.1 形态学鉴定第20-21页
        1.5.2 镰刀菌的分子鉴定第21-23页
    1.6 镰刀菌的生物学特性第23-25页
        1.6.1 镰刀菌的生长特性第23-24页
        1.6.2 镰刀菌的毒素第24-25页
    1.7 镰刀菌的侵染循环及其与植物的互作第25-27页
        1.7.1 镰刀菌的侵染循环第25-26页
        1.7.2 镰刀菌与植物的互作第26-27页
    1.8 根癌农杆菌介导的真菌遗传转化第27-30页
        1.8.1 根癌农杆菌介导真菌遗传转化原理第27-28页
        1.8.2 根癌农杆菌介导真菌遗传转化的优点第28-30页
        1.8.3 根癌农杆菌能够转化的真菌种类第30页
    1.9 绿色荧光蛋白GFP在植物病害研究中的应用第30-32页
        1.9.1 绿色荧光蛋白(GFP)及其特点第30-31页
        1.9.2 绿色荧光蛋白(GFP)在植物病原真菌研究的应用状况第31-32页
    1.10 研究的目的及意义第32页
2 向日葵枯萎病菌的分离与鉴定第32-56页
    2.1 材料第32-35页
        2.1.1 试验材料第32-34页
        2.1.2 供试培养基及试剂第34-35页
    2.2 方法第35-37页
        2.2.1 病原菌的分离第35页
        2.2.2 病原菌的形态鉴定第35页
        2.2.3 病原菌的分子鉴定第35-37页
        2.2.4 病原菌的回接鉴定和再分离第37页
    2.3 结果与分析第37-52页
        2.3.1 向日葵枯萎病的发病情况及病原菌的分离第37-38页
        2.3.2 向日葵枯萎病菌的鉴定第38-39页
        2.3.3 向日葵枯萎病菌的形态学观察第39-46页
        2.3.4 向日葵枯萎病菌的分子鉴定第46-48页
        2.3.5 马铃薯枯萎病菌的鉴定第48-50页
        2.3.6 基于ITS序列的向日葵镰刀菌的系统发育树的构建第50-51页
        2.3.7 基于EF-1α基因的向日葵镰刀菌的系统发育树的构建第51-52页
    2.4 讨论第52-56页
3 向日葵枯萎病菌的生物学特性第56-64页
    3.1 材料第56页
        3.1.1 供试材料第56页
        3.1.2 培养基第56页
    3.2 方法第56-58页
        3.2.1 向日葵枯萎病菌生长速度的测定第56页
        3.2.2 向日葵枯萎病菌产孢量的测定第56-57页
        3.2.3 不同温度对向日葵枯萎病菌生长的影响第57页
        3.2.4 不同pH值对向日葵枯萎病菌生长的影响第57页
        3.2.5 向日葵枯萎病菌分泌粗毒素量的测定第57页
        3.2.6 向日葵枯萎病菌致病力的测定第57-58页
        3.2.7 数据统计与分析第58页
    3.3 结果与分析第58-63页
        3.3.1 不同种的向日葵枯萎病菌代表菌株生长速度的比较第58-59页
        3.3.2 不同种的向日葵枯萎病菌产孢量的比较第59-60页
        3.3.3 不同培养温度对不同种的向日葵枯萎病菌生长的影响第60页
        3.3.4 不同的pH值对不同种的向日葵枯萎病菌生长的影响第60-61页
        3.3.5 不同种的向日葵枯萎病菌粗毒素分泌量的比较第61-62页
        3.3.6 不同种的向日葵枯萎病菌致病力的比较第62-63页
    3.4 讨论第63-64页
4 向日葵枯萎病菌的致病力分化的研究第64-74页
    4.1 材料第64-66页
        4.1.1 供试菌株第64-65页
        4.1.2 供试寄主材料第65-66页
        4.1.3 供试培养基第66页
    4.2 方法第66页
        4.2.1 不同寄主的枯萎菌致病力的测定第66页
        4.2.2 数据统计与分析第66页
    4.3 结果与分析第66-73页
        4.3.1 向日葵尖孢镰刀菌致病力分化的研究第66-68页
        4.3.2 向日葵尖孢镰刀菌的寄主专化型研究第68-69页
        4.3.3 不同寄主来源的尖孢镰刀菌的交互侵染研究第69-70页
        4.3.4 向日葵层出镰刀菌致病力的分化研究第70-72页
        4.3.5 不同的向日葵品种对层出镰刀菌的抗性鉴定第72-73页
    4.4 结论第73-74页
5 向日葵层出镰刀菌的遗传转化第74-85页
    5.1 材料第74-75页
        5.1.1 供试菌株及质粒第74页
        5.1.2 试剂和抗生素第74页
        5.1.3 仪器和设备第74页
        5.1.4 培养基第74-75页
    5.2 方法第75-80页
        5.2.1 大肠杆菌的转化第75页
        5.2.2 阳性克隆菌液PCR检测第75-76页
        5.2.3 质粒的扩增和提取第76-77页
        5.2.4 农杆菌感受态细胞的制备第77页
        5.2.5 农杆菌的遗传转化第77页
        5.2.6 转化子的菌液PCR第77页
        5.2.7 层出镰刀菌的遗传转化第77-78页
        5.2.8 转化子单菌落的获得第78页
        5.2.9 阳性转化子的鉴定第78-79页
        5.2.10 层出镰刀菌阳性转化子的生物学特性第79-80页
    5.3 结果与分析第80-84页
        5.3.1 层出镰刀菌突变体的鉴定第80页
        5.3.2 阳性转化子潮霉素抗性的稳定性筛选及菌落形态第80-82页
        5.3.3 层出镰刀菌阳性转化子生长速度的比较第82页
        5.3.4 层出镰刀菌阳性转化子产孢量的测定第82-83页
        5.3.5 层出镰刀菌阳性转化子孢子萌发率的比较第83页
        5.3.6 层出镰刀菌阳性转化子粗毒素含量的测定第83-84页
        5.3.7 层出镰刀菌阳性转化子致病力的比较第84页
    5.4 讨论第84-85页
6 利用GFP标记的层出镰刀菌研究向日葵枯萎病的侵染过程第85-97页
    6.1 材料第85-86页
        6.1.1 供试材料第85页
        6.1.2 仪器与设备第85-86页
        6.1.3 试剂第86页
    6.2 方法第86-88页
        6.2.1 供试材料准备和接种方法第86-87页
        6.2.2 向日葵不同部位的组织中菌量的定量测定第87-88页
    6.3 结果与分析第88-96页
        6.3.1 层出镰刀菌对向日葵根部的初期侵染第88-90页
        6.3.2 层出镰刀菌对向日葵的系统侵染第90-92页
        6.3.3 层出镰刀菌在向日葵开花后各组织中的定殖第92-93页
        6.3.4 qPCR检测向日葵抗感品种中层出镰刀菌的定殖第93-96页
    6.4 讨论第96-97页
7 全文结论第97-99页
致谢第99-100页
参考文献第100-115页
附录第115-120页
作者简介第120页

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