摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
中英文缩写对照表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-25页 |
1.1 狂犬病病毒概述 | 第12-15页 |
1.1.1 狂犬病的感染途径及过程 | 第12-13页 |
1.1.2 狂犬病病毒的结构 | 第13-14页 |
1.1.3 狂犬病病毒的复制和转录 | 第14-15页 |
1.2 狂犬病病毒M基因的作用 | 第15-18页 |
1.2.1 M蛋白与病毒出芽 | 第15-17页 |
1.2.2 M蛋白与致病性的关系 | 第17-18页 |
1.3 狂犬病病毒与干扰素的研究 | 第18-20页 |
1.4 狂犬病病毒与细胞因子 | 第20-21页 |
1.5 狂犬病病毒与反向遗传研究技术的关系 | 第21-23页 |
1.5.1 反向遗传学技术在狂犬病病毒研究中的发展 | 第21-22页 |
1.5.2 反向遗传学技术在狂犬病病毒研究中的应用 | 第22-23页 |
1.6 开展本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-32页 |
2.1 材料 | 第25-28页 |
2.1.1 细胞、病毒和质粒 | 第25页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第25页 |
2.1.3 主要实验试剂 | 第25-26页 |
2.1.4 抗体和ELISA试剂盒 | 第26页 |
2.1.5 引物的设计合成 | 第26-28页 |
2.2 方法 | 第28-32页 |
2.2.1 构建狂犬病突变病毒感染性cDNA克隆 | 第28-29页 |
2.2.2 拯救狂犬病重组突变病毒 | 第29-30页 |
2.2.3 IFA试验初步鉴定拯救的突变病毒 | 第30页 |
2.2.4 重组突变病毒M基因的序列检测 | 第30页 |
2.2.5 制备种毒并测定毒价 | 第30页 |
2.2.6 测定病毒的多步生长曲线 | 第30-31页 |
2.2.7 蛋白免疫印迹实验(Western Blot) | 第31页 |
2.2.8 实时荧光定量PCR (qPCR)试验 | 第31页 |
2.2.9 ELISA检测TNF-α、IL- 1β、IFN-γ、IL-6和IL-12水平 | 第31-32页 |
第三章 实验结果 | 第32-57页 |
3.1 狂犬病病毒M蛋白与转录相关的功能位点鉴定 | 第32-40页 |
3.1.1 构建突变病毒感染性cDNA克隆 | 第32-34页 |
3.1.2 拯救重组突变病毒 | 第34页 |
3.1.3 重组病毒M基因突变位点的鉴定 | 第34-35页 |
3.1.4 突变病毒的多步生长曲线 | 第35-36页 |
3.1.5 突变病毒蛋白的水平变化 | 第36-37页 |
3.1.6 vRNA水平和N、M基因的转录水平 | 第37-40页 |
3.2 狂犬病病毒M蛋白潜在磷酸化位点的鉴定 | 第40-48页 |
3.2.1 构建突变病毒感染性cDNA克隆 | 第40-42页 |
3.2.2 拯救重组突变病毒 | 第42页 |
3.2.3 重组病毒M基因突变位点的鉴定 | 第42-43页 |
3.2.4 突变病毒的多步生长曲线 | 第43-44页 |
3.2.5 突变病毒的M蛋白水平变化 | 第44-45页 |
3.2.6 vRNA水平和N和M基因的转录水平 | 第45-48页 |
3.3 狂犬病病毒M蛋白功能位点与免疫通路关联性的初步探索 | 第48-57页 |
3.3.1 狂犬病病毒感染BSR/T7-9细胞与RIG-I信号通路的关系 | 第48-51页 |
3.3.2 BSR/T7-9细胞感染狂犬病病毒后TNF-α、IL-1β的产生情况 | 第51-53页 |
3.3.3 BSR/T7-9细胞感染狂犬病病毒后IFN-γ、IL-6和IL-12的产生情况 | 第53-57页 |
第四章 讨论 | 第57-63页 |
4.1 狂犬病病毒M蛋白与转录相关的功能位点鉴定 | 第57-59页 |
4.2 狂犬病病毒M蛋白潜在磷酸化位点的鉴定 | 第59-60页 |
4.3 狂犬病病毒M蛋白功能位点与免疫通路关联性的初步探索 | 第60-63页 |
第五章 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-73页 |
致谢 | 第73页 |