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狂犬病病毒M蛋白与转录相关的功能性位点鉴定

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
中英文缩写对照表第11-12页
第一章 文献综述第12-25页
    1.1 狂犬病病毒概述第12-15页
        1.1.1 狂犬病的感染途径及过程第12-13页
        1.1.2 狂犬病病毒的结构第13-14页
        1.1.3 狂犬病病毒的复制和转录第14-15页
    1.2 狂犬病病毒M基因的作用第15-18页
        1.2.1 M蛋白与病毒出芽第15-17页
        1.2.2 M蛋白与致病性的关系第17-18页
    1.3 狂犬病病毒与干扰素的研究第18-20页
    1.4 狂犬病病毒与细胞因子第20-21页
    1.5 狂犬病病毒与反向遗传研究技术的关系第21-23页
        1.5.1 反向遗传学技术在狂犬病病毒研究中的发展第21-22页
        1.5.2 反向遗传学技术在狂犬病病毒研究中的应用第22-23页
    1.6 开展本研究的目的和意义第23-25页
第二章 材料与方法第25-32页
    2.1 材料第25-28页
        2.1.1 细胞、病毒和质粒第25页
        2.1.2 主要实验仪器第25页
        2.1.3 主要实验试剂第25-26页
        2.1.4 抗体和ELISA试剂盒第26页
        2.1.5 引物的设计合成第26-28页
    2.2 方法第28-32页
        2.2.1 构建狂犬病突变病毒感染性cDNA克隆第28-29页
        2.2.2 拯救狂犬病重组突变病毒第29-30页
        2.2.3 IFA试验初步鉴定拯救的突变病毒第30页
        2.2.4 重组突变病毒M基因的序列检测第30页
        2.2.5 制备种毒并测定毒价第30页
        2.2.6 测定病毒的多步生长曲线第30-31页
        2.2.7 蛋白免疫印迹实验(Western Blot)第31页
        2.2.8 实时荧光定量PCR (qPCR)试验第31页
        2.2.9 ELISA检测TNF-α、IL- 1β、IFN-γ、IL-6和IL-12水平第31-32页
第三章 实验结果第32-57页
    3.1 狂犬病病毒M蛋白与转录相关的功能位点鉴定第32-40页
        3.1.1 构建突变病毒感染性cDNA克隆第32-34页
        3.1.2 拯救重组突变病毒第34页
        3.1.3 重组病毒M基因突变位点的鉴定第34-35页
        3.1.4 突变病毒的多步生长曲线第35-36页
        3.1.5 突变病毒蛋白的水平变化第36-37页
        3.1.6 vRNA水平和N、M基因的转录水平第37-40页
    3.2 狂犬病病毒M蛋白潜在磷酸化位点的鉴定第40-48页
        3.2.1 构建突变病毒感染性cDNA克隆第40-42页
        3.2.2 拯救重组突变病毒第42页
        3.2.3 重组病毒M基因突变位点的鉴定第42-43页
        3.2.4 突变病毒的多步生长曲线第43-44页
        3.2.5 突变病毒的M蛋白水平变化第44-45页
        3.2.6 vRNA水平和N和M基因的转录水平第45-48页
    3.3 狂犬病病毒M蛋白功能位点与免疫通路关联性的初步探索第48-57页
        3.3.1 狂犬病病毒感染BSR/T7-9细胞与RIG-I信号通路的关系第48-51页
        3.3.2 BSR/T7-9细胞感染狂犬病病毒后TNF-α、IL-1β的产生情况第51-53页
        3.3.3 BSR/T7-9细胞感染狂犬病病毒后IFN-γ、IL-6和IL-12的产生情况第53-57页
第四章 讨论第57-63页
    4.1 狂犬病病毒M蛋白与转录相关的功能位点鉴定第57-59页
    4.2 狂犬病病毒M蛋白潜在磷酸化位点的鉴定第59-60页
    4.3 狂犬病病毒M蛋白功能位点与免疫通路关联性的初步探索第60-63页
第五章 结论第63-64页
参考文献第64-73页
致谢第73页

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