摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-10页 |
文献综述 | 第16-30页 |
第一章 容受性子宫内膜研究进展 | 第16-30页 |
1.1 引言 | 第16-17页 |
1.2 子宫内膜结构及发育 | 第17-18页 |
1.3 参与调节子宫内膜的激素 | 第18-21页 |
1.3.1 雌激素对子宫内膜的调节 | 第19页 |
1.3.2 孕酮对子宫内膜的调节 | 第19-20页 |
1.3.3 干扰素 τ 对子宫内膜的调节 | 第20-21页 |
1.4 子宫内膜容受性的形态学标志—胞饮突 | 第21-22页 |
1.4.1 胞饮突的结构与功能 | 第21-22页 |
1.4.2 胞饮突的研究进展 | 第22页 |
1.4.3 影响胞饮突的因素 | 第22页 |
1.5 子宫内膜容受性的标志基因 | 第22-24页 |
1.5.1 白血病抑制因子 | 第22-23页 |
1.5.2 整合素 | 第23页 |
1.5.3 血管内皮生长因子 | 第23-24页 |
1.5.4 同源盒结构基因 | 第24页 |
1.6 miRNA调控子宫内膜的研究进展 | 第24-25页 |
1.6.1 miRNA调控动物的生理过程 | 第24-25页 |
1.6.2 miRNA调控子宫内膜的研究进展 | 第25页 |
1.7 lncRNA研究进展 | 第25-28页 |
1.7.1 lncRNA的分类 | 第25-26页 |
1.7.2 lncRNA生物学功能 | 第26-28页 |
1.7.3 lncRNA在家畜领域的相关研究 | 第28页 |
1.8 本研究的主要内容及目的与意义 | 第28页 |
1.9 研究思路和技术路线 | 第28-30页 |
1.9.1 研究思路 | 第28-29页 |
1.9.2 技术路线 | 第29-30页 |
试验研究 | 第30-108页 |
第二章 配种后第5和 15 天子宫内膜状态的研究 | 第30-44页 |
2.1 引言 | 第30页 |
2.2 材料与方法 | 第30-33页 |
2.2.1 试验仪器 | 第30页 |
2.2.2 材料试剂 | 第30-31页 |
2.2.3 试验动物 | 第31页 |
2.2.4 血清中雌激素(E2)和孕酮(P4)含量的检测 | 第31页 |
2.2.5 扫描电镜 | 第31页 |
2.2.6 RT-qPCR检测mRNA的表达量 | 第31-32页 |
2.2.7 切片制备与苏木精-伊红染色 | 第32页 |
2.2.8 免疫组织化学法 | 第32-33页 |
2.2.9 统计学分析 | 第33页 |
2.3 结果 | 第33-42页 |
2.3.1 子宫内膜结构 | 第33-34页 |
2.3.2 血清中E2和P4水平 | 第34-35页 |
2.3.3 奶山羊子宫内膜中ER和PR的表达量 | 第35-37页 |
2.3.4 奶山羊子宫内膜细胞的增殖和凋亡 | 第37-38页 |
2.3.5 奶山羊子宫内膜中IGF1R和GHR的表达量 | 第38-39页 |
2.3.6 奶山羊子宫内膜中容受性标志基因的表达量 | 第39-42页 |
2.4 讨论 | 第42-43页 |
2.5 小结 | 第43-44页 |
第三章 奶山羊容受期子宫内膜组织中miRNA的表达分析 | 第44-60页 |
3.1 引言 | 第44-45页 |
3.2 材料与方法 | 第45页 |
3.2.1 试验仪器 | 第45页 |
3.2.2 材料试剂 | 第45页 |
3.2.3 试验动物 | 第45页 |
3.2.4 miRNA测序流程 | 第45页 |
3.3 结果 | 第45-57页 |
3.3.1 测序数据概述 | 第45-47页 |
3.3.2 已知miRNA的鉴定 | 第47-48页 |
3.3.3 鉴定潜在的新型miRNA | 第48-50页 |
3.3.4 miRNA在容受期和容受前期子宫内膜中的差异表达 | 第50-55页 |
3.3.5 差异表达的miRNA的靶基因预测 | 第55页 |
3.3.6 GO富集和KEGG途径分析 | 第55-56页 |
3.3.7 茎环RT-qPCR法验证miRNA的表达 | 第56-57页 |
3.4 讨论 | 第57-59页 |
3.5 小结 | 第59-60页 |
第四章 miR-26a通过PTEN-PI3K/AKT信号通路调控奶山羊子宫内膜细胞 | 第60-79页 |
4.1 引言 | 第60-61页 |
4.2 材料与方法 | 第61-65页 |
4.2.1 试验仪器 | 第61页 |
4.2.2 材料试剂 | 第61页 |
4.2.3 试验动物 | 第61页 |
4.2.4 细胞培养与鉴定 | 第61-62页 |
4.2.5 RT-qPCR检测mRNA的表达量 | 第62页 |
4.2.6 细胞增殖周期凋亡检测 | 第62-63页 |
4.2.7 扫描电镜 | 第63-64页 |
4.2.8 载体构建及双荧光素酶试验 | 第64页 |
4.2.9 蛋白提取和Western blot分析 | 第64页 |
4.2.10 免疫组化和原位杂交 | 第64-65页 |
4.2.11 统计学分析 | 第65页 |
4.3 结果 | 第65-77页 |
4.3.1 子宫内膜细胞的培养与鉴定 | 第65-66页 |
4.3.2 雌激素和孕酮对子宫内膜细胞中miR-26a的调控 | 第66-67页 |
4.3.3 PTEN基因在奶山羊配种后D5和D15子宫内膜中的差异表达 | 第67-68页 |
4.3.4 miR-26a通过 3′ UTR直接调控PTEN基因 | 第68-69页 |
4.3.5 miR-26a下调EEC和ESC中PTEN的表达量 | 第69-70页 |
4.3.6 miR-26a体外促进EEC的增殖 | 第70-72页 |
4.3.7 miR-26a体外诱导ESC的凋亡 | 第72-74页 |
4.3.8 miR-26a对EEC和ESC的调控 | 第74-76页 |
4.3.9 miR-26a调控EEC和ESC中容受性标志基因的表达 | 第76-77页 |
4.4 讨论 | 第77-78页 |
4.5 小结 | 第78-79页 |
第五章 容受期奶山羊子宫内膜组织中mRNA的表达研究 | 第79-90页 |
5.1 引言 | 第79页 |
5.2 材料与方法 | 第79-80页 |
5.2.1 试验仪器 | 第79页 |
5.2.2 材料试剂 | 第79页 |
5.2.3 试验动物 | 第79页 |
5.2.4 转录组测序流程 | 第79-80页 |
5.2.5 数据分析流程 | 第80页 |
5.2.6 统计学分析 | 第80页 |
5.3 结果 | 第80-87页 |
5.3.1 转录组测序数据概述 | 第80-82页 |
5.3.2 子宫内膜容受前期和容受期差异表达的mRNA | 第82-84页 |
5.3.3 差异mRNA的GO和KEGG分析 | 第84-86页 |
5.3.4 RT-qPCR检测差异mRNA的表达量 | 第86-87页 |
5.4 讨论 | 第87-89页 |
5.5 小结 | 第89-90页 |
第六章 lncRNA882对TAB3和LIF基因表达的调控 | 第90-108页 |
6.1 引言 | 第90页 |
6.2 材料与方法 | 第90-95页 |
6.2.1 试验仪器 | 第90页 |
6.2.2 材料试剂 | 第90-91页 |
6.2.3 试验动物 | 第91页 |
6.2.4 测序流程 | 第91页 |
6.2.5 数据分析流程 | 第91页 |
6.2.6 cDNA末端快速扩增 (Rapid ampLIFication of cDNA ends, RACE) | 第91-92页 |
6.2.7 子宫内膜上皮细胞培养 | 第92页 |
6.2.8 载体构建 | 第92页 |
6.2.9 细胞周期凋亡检测 | 第92页 |
6.2.10 RT-qPCR | 第92-94页 |
6.2.11 蛋白提取和Western blot分析 | 第94-95页 |
6.2.12 酶联免疫吸附测定(ELISA) | 第95页 |
6.2.12 统计学分析 | 第95页 |
6.3 结果 | 第95-105页 |
6.3.1 奶山羊子宫内膜组织中lncRNA的鉴定 | 第95-96页 |
6.3.2 奶山羊子宫内膜组织中lncRNA和mRNA特征分析 | 第96-97页 |
6.3.3 奶山羊子宫内膜容受前期和容受期差异表达的lncRNA | 第97页 |
6.3.4 lncRNA的顺式调控靶基因 | 第97-98页 |
6.3.5 调控差异表达lncRNA的miRNA预测 | 第98-100页 |
6.3.6 lncRNA882的序列特征 | 第100页 |
6.3.7 E2和P4对奶山羊子宫内膜上皮细胞中lncRNA882表达量的影响 | 第100-102页 |
6.3.8 lncRNA882抑制EEC的凋亡 | 第102-104页 |
6.3.9 lncRNA882是miR-15b的一个靶基因 | 第104-105页 |
6.4 讨论 | 第105-107页 |
6.5 小结 | 第107-108页 |
研究结论 | 第108-109页 |
创新点 | 第109-110页 |
进一步研究的问题 | 第110-111页 |
参考文献 | 第111-128页 |
附录 | 第128-143页 |
缩略词 | 第143-145页 |
致谢 | 第145-146页 |
作者简介 | 第146页 |