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奶山羊子宫内膜容受期差异表达miRNA和lncRNA调控作用的研究

摘要第6-8页
abstract第8-10页
文献综述第16-30页
    第一章 容受性子宫内膜研究进展第16-30页
        1.1 引言第16-17页
        1.2 子宫内膜结构及发育第17-18页
        1.3 参与调节子宫内膜的激素第18-21页
            1.3.1 雌激素对子宫内膜的调节第19页
            1.3.2 孕酮对子宫内膜的调节第19-20页
            1.3.3 干扰素 τ 对子宫内膜的调节第20-21页
        1.4 子宫内膜容受性的形态学标志—胞饮突第21-22页
            1.4.1 胞饮突的结构与功能第21-22页
            1.4.2 胞饮突的研究进展第22页
            1.4.3 影响胞饮突的因素第22页
        1.5 子宫内膜容受性的标志基因第22-24页
            1.5.1 白血病抑制因子第22-23页
            1.5.2 整合素第23页
            1.5.3 血管内皮生长因子第23-24页
            1.5.4 同源盒结构基因第24页
        1.6 miRNA调控子宫内膜的研究进展第24-25页
            1.6.1 miRNA调控动物的生理过程第24-25页
            1.6.2 miRNA调控子宫内膜的研究进展第25页
        1.7 lncRNA研究进展第25-28页
            1.7.1 lncRNA的分类第25-26页
            1.7.2 lncRNA生物学功能第26-28页
            1.7.3 lncRNA在家畜领域的相关研究第28页
        1.8 本研究的主要内容及目的与意义第28页
        1.9 研究思路和技术路线第28-30页
            1.9.1 研究思路第28-29页
            1.9.2 技术路线第29-30页
试验研究第30-108页
    第二章 配种后第5和 15 天子宫内膜状态的研究第30-44页
        2.1 引言第30页
        2.2 材料与方法第30-33页
            2.2.1 试验仪器第30页
            2.2.2 材料试剂第30-31页
            2.2.3 试验动物第31页
            2.2.4 血清中雌激素(E2)和孕酮(P4)含量的检测第31页
            2.2.5 扫描电镜第31页
            2.2.6 RT-qPCR检测mRNA的表达量第31-32页
            2.2.7 切片制备与苏木精-伊红染色第32页
            2.2.8 免疫组织化学法第32-33页
            2.2.9 统计学分析第33页
        2.3 结果第33-42页
            2.3.1 子宫内膜结构第33-34页
            2.3.2 血清中E2和P4水平第34-35页
            2.3.3 奶山羊子宫内膜中ER和PR的表达量第35-37页
            2.3.4 奶山羊子宫内膜细胞的增殖和凋亡第37-38页
            2.3.5 奶山羊子宫内膜中IGF1R和GHR的表达量第38-39页
            2.3.6 奶山羊子宫内膜中容受性标志基因的表达量第39-42页
        2.4 讨论第42-43页
        2.5 小结第43-44页
    第三章 奶山羊容受期子宫内膜组织中miRNA的表达分析第44-60页
        3.1 引言第44-45页
        3.2 材料与方法第45页
            3.2.1 试验仪器第45页
            3.2.2 材料试剂第45页
            3.2.3 试验动物第45页
            3.2.4 miRNA测序流程第45页
        3.3 结果第45-57页
            3.3.1 测序数据概述第45-47页
            3.3.2 已知miRNA的鉴定第47-48页
            3.3.3 鉴定潜在的新型miRNA第48-50页
            3.3.4 miRNA在容受期和容受前期子宫内膜中的差异表达第50-55页
            3.3.5 差异表达的miRNA的靶基因预测第55页
            3.3.6 GO富集和KEGG途径分析第55-56页
            3.3.7 茎环RT-qPCR法验证miRNA的表达第56-57页
        3.4 讨论第57-59页
        3.5 小结第59-60页
    第四章 miR-26a通过PTEN-PI3K/AKT信号通路调控奶山羊子宫内膜细胞第60-79页
        4.1 引言第60-61页
        4.2 材料与方法第61-65页
            4.2.1 试验仪器第61页
            4.2.2 材料试剂第61页
            4.2.3 试验动物第61页
            4.2.4 细胞培养与鉴定第61-62页
            4.2.5 RT-qPCR检测mRNA的表达量第62页
            4.2.6 细胞增殖周期凋亡检测第62-63页
            4.2.7 扫描电镜第63-64页
            4.2.8 载体构建及双荧光素酶试验第64页
            4.2.9 蛋白提取和Western blot分析第64页
            4.2.10 免疫组化和原位杂交第64-65页
            4.2.11 统计学分析第65页
        4.3 结果第65-77页
            4.3.1 子宫内膜细胞的培养与鉴定第65-66页
            4.3.2 雌激素和孕酮对子宫内膜细胞中miR-26a的调控第66-67页
            4.3.3 PTEN基因在奶山羊配种后D5和D15子宫内膜中的差异表达第67-68页
            4.3.4 miR-26a通过 3′ UTR直接调控PTEN基因第68-69页
            4.3.5 miR-26a下调EEC和ESC中PTEN的表达量第69-70页
            4.3.6 miR-26a体外促进EEC的增殖第70-72页
            4.3.7 miR-26a体外诱导ESC的凋亡第72-74页
            4.3.8 miR-26a对EEC和ESC的调控第74-76页
            4.3.9 miR-26a调控EEC和ESC中容受性标志基因的表达第76-77页
        4.4 讨论第77-78页
        4.5 小结第78-79页
    第五章 容受期奶山羊子宫内膜组织中mRNA的表达研究第79-90页
        5.1 引言第79页
        5.2 材料与方法第79-80页
            5.2.1 试验仪器第79页
            5.2.2 材料试剂第79页
            5.2.3 试验动物第79页
            5.2.4 转录组测序流程第79-80页
            5.2.5 数据分析流程第80页
            5.2.6 统计学分析第80页
        5.3 结果第80-87页
            5.3.1 转录组测序数据概述第80-82页
            5.3.2 子宫内膜容受前期和容受期差异表达的mRNA第82-84页
            5.3.3 差异mRNA的GO和KEGG分析第84-86页
            5.3.4 RT-qPCR检测差异mRNA的表达量第86-87页
        5.4 讨论第87-89页
        5.5 小结第89-90页
    第六章 lncRNA882对TAB3和LIF基因表达的调控第90-108页
        6.1 引言第90页
        6.2 材料与方法第90-95页
            6.2.1 试验仪器第90页
            6.2.2 材料试剂第90-91页
            6.2.3 试验动物第91页
            6.2.4 测序流程第91页
            6.2.5 数据分析流程第91页
            6.2.6 cDNA末端快速扩增 (Rapid ampLIFication of cDNA ends, RACE)第91-92页
            6.2.7 子宫内膜上皮细胞培养第92页
            6.2.8 载体构建第92页
            6.2.9 细胞周期凋亡检测第92页
            6.2.10 RT-qPCR第92-94页
            6.2.11 蛋白提取和Western blot分析第94-95页
            6.2.12 酶联免疫吸附测定(ELISA)第95页
            6.2.12 统计学分析第95页
        6.3 结果第95-105页
            6.3.1 奶山羊子宫内膜组织中lncRNA的鉴定第95-96页
            6.3.2 奶山羊子宫内膜组织中lncRNA和mRNA特征分析第96-97页
            6.3.3 奶山羊子宫内膜容受前期和容受期差异表达的lncRNA第97页
            6.3.4 lncRNA的顺式调控靶基因第97-98页
            6.3.5 调控差异表达lncRNA的miRNA预测第98-100页
            6.3.6 lncRNA882的序列特征第100页
            6.3.7 E2和P4对奶山羊子宫内膜上皮细胞中lncRNA882表达量的影响第100-102页
            6.3.8 lncRNA882抑制EEC的凋亡第102-104页
            6.3.9 lncRNA882是miR-15b的一个靶基因第104-105页
        6.4 讨论第105-107页
        6.5 小结第107-108页
研究结论第108-109页
创新点第109-110页
进一步研究的问题第110-111页
参考文献第111-128页
附录第128-143页
缩略词第143-145页
致谢第145-146页
作者简介第146页

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