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大豆疫霉RxLR效应分子Avh262和Avh172的功能研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
引言第12-14页
上篇文献综述第14-70页
    第一章 植物病原菌效应分子研究进展第15-40页
        1 植物免疫系统第15-22页
            1.1 PAMP-triggered immunity第17-19页
            1.2 Effector-triggered immunity第19-22页
        2 病原菌效应分子的毒性机制研究进展第22-28页
            2.1 作用于植物的PTI信号途径第23-24页
            2.2 作用于抗病相关的激素信号途径第24-25页
            2.3 作用于植物的免疫分泌系统第25页
            2.4 调控植物细胞核中基因的表达第25-26页
            2.5 影响寄主细胞的结构和靶标蛋白定位第26页
            2.6 其他作用方式第26-28页
        参考文献第28-40页
    第二章 病原菌与植物内质网互作第40-70页
        1 植物的未折叠蛋白反应(UPR)第40-50页
            1.1 ER stress和UPR第40-41页
            1.2 UPR反应的机制第41-44页
            1.3 植物的UPR研究进展第44-50页
        2 内质网与植物免疫第50-53页
            2.1 内质网压力诱导的程序性细胞死亡(ER stress-induced PCD)第50-51页
            2.2 植物半胱天冬酶类似活性和内质网诱导的PCD第51-52页
            2.3 植物中内质网质量控制(ERQC)对植物免疫的影响第52-53页
        3 植物BiP第53-58页
            3.1 BiP概况第53页
            3.2 BiP在植物防御外界压力过程中的作用第53-58页
        参考文献第58-70页
下篇研究内容第70-178页
    第一章 大豆疫霉RxLR效应分子的亚细胞定位分析第72-94页
        1 材料与方法第74-79页
            1.1 供试植物和菌株第74页
            1.2 RxLR效应分子基因的克隆及植物表达载体的构建第74-77页
            1.3 大肠杆菌感受态细胞的制备第77-78页
            1.4 农杆菌感受态细胞的制备和转化方法第78页
            1.5 烟草中农杆菌介导的瞬时表达第78-79页
            1.6 辣椒疫霉侵染烟草第79页
        2 结果与分析第79-89页
            2.1 具有核定位信号的大豆疫霉RxLR效应分子的预测第79-80页
            2.2 具有NLS信号RxLR效应分子的亚细胞定位分析第80-82页
            2.3 大豆疫霉RxLR效应分子核定位信号与功能之间的关系初探第82-83页
            2.4 38个大豆疫霉RxLR效应分子亚细胞定位总结第83-85页
            2.5 效应分子在侵染过程中能够聚集到吸器周围第85-86页
            2.6 Avh262定位于微管第86-89页
        3 讨论第89-91页
        参考文献第91-94页
    第二章 RxLR效应分子Avh262毒性机制研究第94-136页
        1 材料与方法第96-103页
            1.1 供试植物、菌株和载体第96页
            1.2 Avh262和BiP的克隆及表达载体的构建第96-98页
            1.3 农杆菌感受态细胞的制备和转化方法第98页
            1.4 农杆菌介导的瞬时表达第98页
            1.5 植物蛋白提取第98-99页
            1.6 烟草或大豆发状根表达蛋白的Co-IP第99页
            1.7 GST Pull-down第99页
            1.8 Western Blot检测第99-100页
            1.9 大豆疫霉Avh262沉默转化子的筛选第100页
            1.10 大豆发状根转化和侵染接种实验第100页
            1.11 辣椒疫霉侵染烟草第100-101页
            1.12 烟草叶片离子渗漏测定第101页
            1.13 病毒介导的基因沉默第101页
            1.14 荧光定量PCR检测第101-103页
        2 结果与分析第103-126页
            2.1 Avh262是大豆疫霉毒性必需的效应分子第103-107页
            2.2 Avh262~(60-82)对效应分子的毒性是必需的第107-109页
            2.3 Avh262与植物BiP互作第109-117页
            2.4 Avh262能够稳定BiP第117-122页
            2.5 BiP是植物对疫霉菌抗性的负调控因子第122-126页
        3 讨论第126-130页
        参考文献第130-136页
    第三章 Avh172的功能分析和靶标筛选第136-154页
        1 材料与方法第138-140页
            1.1 供试植物、菌株和载体第138页
            1.2 Avh172的克隆及表达载体的构建第138-140页
            1.3 农杆菌感受态细胞的制备和转化方法第140页
            1.4 农杆菌介导的瞬时表达第140页
            1.5 大豆发状根转化第140页
            1.6 发状根表达蛋白的CO-IP第140页
            1.7 辣椒疫霉侵染烟草第140页
        2 结果与分析第140-151页
            2.1 Avh172在侵染阶段上调表达第140-141页
            2.2 Avh172能够抑制效应分子引起的细胞死亡第141页
            2.3 Avh172的亚细胞定位第141-142页
            2.4 侵染过程中Avh172在吸器周围聚集第142-146页
            2.5 Avh172的定位与功能之间的关系第146-148页
            2.6 利用大豆发状根转化技术进行Avh172的寄主靶标蛋白筛选第148-151页
        3 讨论第151-153页
        参考文献第153-154页
    第四章 大豆疫霉与大豆亲和互作及非亲和互作过程中大豆蛋白质组学分析第154-178页
        1 材料与方法第156-160页
            1.1 供试植物和菌株第156页
            1.2 蛋白提取第156页
            1.3 蛋白双向电泳第156-158页
            1.4 图像分析及差异点选取第158-159页
            1.5 蛋白胶内酶解及质谱鉴定第159页
            1.6 荧光定量PCR检测第159-160页
        2 结果与分析第160-172页
            2.1 双向电泳图谱分析第160-162页
            2.2 差异表达蛋白的鉴定第162-164页
            2.3 互作过程中氧迸发和氧化压力反应有关的蛋白第164-167页
            2.4 抗病信号途径中的蛋白第167-170页
            2.5 互作过程中异黄酮的诱导合成第170-171页
            2.6 蛋白-蛋白之间的互作第171-172页
        3 讨论第172-174页
        参考文献第174-178页
附录第178-188页
全文总结及创新点第188-190页
攻读博士学位期间发表的研究论文第190-192页
致谢第192页

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