| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 萜类化合物的概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 萜类化合物的定义 | 第12页 |
| 1.1.2 萜类化合物的分类 | 第12-13页 |
| 1.1.3 萜类化合物的重要性 | 第13-14页 |
| 1.2 萜类化合物的生物合成途径 | 第14-18页 |
| 1.2.1 甲羟戊酸(MVA)途径 | 第15-16页 |
| 1.2.2 2-甲基-D-赤藻糖醇-4磷酸(MEP)途径 | 第16-18页 |
| 1.3 MEP途径作为一个潜在的靶标 | 第18-19页 |
| 1.4 MEP途径中的限速酶DXS | 第19-20页 |
| 1.5 DXS的反应机理 | 第20-21页 |
| 1.6 定点突变技术 | 第21页 |
| 1.7 本课题的研究意义 | 第21-23页 |
| 第二章 EcDXS的诱导表达、纯化及活性检测 | 第23-35页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第23-26页 |
| 2.1.1 菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 主要溶液配方 | 第23-25页 |
| 2.1.4 所需仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 E. coli DXS工程菌株的活化与验证 | 第26页 |
| 2.2.2 E. coli DXS工程菌株的诱导表达 | 第26-27页 |
| 2.2.3 EcDXS的亲和层析纯化 | 第27页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE检测 | 第27-28页 |
| 2.2.5 Bradford法检测蛋白浓度 | 第28-29页 |
| 2.2.6 活性测定 | 第29-31页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第31-34页 |
| 2.3.1 测序结果 | 第31页 |
| 2.3.2 SDS-PAGE检测结果与讨论 | 第31-32页 |
| 2.3.3 EcDXS浓度测定结果 | 第32-33页 |
| 2.3.4 酶活性测定结果与讨论 | 第33-34页 |
| 2.4 本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 突变基因的制备,突变体的表达纯化及活性检测 | 第35-46页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第35页 |
| 3.1.1 菌株 | 第35页 |
| 3.1.2 所需试剂 | 第35页 |
| 3.1.3 主要溶液配方 | 第35页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-40页 |
| 3.2.1 突变基因的制备 | 第35-39页 |
| 3.2.2 感受态细胞的制备 | 第39页 |
| 3.2.3 热击转化 | 第39-40页 |
| 3.2.4 测序验证 | 第40页 |
| 3.2.5 突变菌株的诱导表达 | 第40页 |
| 3.2.6 突变体酶的亲和层析纯化 | 第40页 |
| 3.2.7 SDS-PAGE分析 | 第40页 |
| 3.2.8 Bradford法检测蛋白浓度 | 第40页 |
| 3.2.9 突变蛋白的活性测定 | 第40页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第40-45页 |
| 3.3.1 凝胶电泳验证结果 | 第40-41页 |
| 3.3.2 热击转化结果 | 第41-42页 |
| 3.3.3 测序结果 | 第42页 |
| 3.3.4 SDS-PAGE检测结果 | 第42-43页 |
| 3.3.5 突变体蛋白浓度测定结果 | 第43-44页 |
| 3.3.6 突变型DXS活性测定结果 | 第44-45页 |
| 3.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 第四章 DXS稳态动力学参数的测定 | 第46-56页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第46页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第46页 |
| 4.1.2 主要试剂配方 | 第46页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-49页 |
| 4.2.1 米氏方程式的推导 | 第46-47页 |
| 4.2.2 动力学参数 | 第47-48页 |
| 4.2.3 酶联紫外法测定动力学参数 | 第48-49页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第49-54页 |
| 4.3.1 实验结果 | 第49-51页 |
| 4.3.2 讨论 | 第51-54页 |
| 4.4 本章小结 | 第54-56页 |
| 第五章 亚硝基苯替代D-GAP为受体底物时野生型与突变型DXS酶活性 | 第56-60页 |
| 5.1 材料与仪器 | 第56页 |
| 5.1.1 所需试剂 | 第56页 |
| 5.1.2 试剂配方 | 第56页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第56页 |
| 5.2 实验方法 | 第56-58页 |
| 5.3 实验结果与讨论 | 第58-59页 |
| 5.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 全文总结 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附录 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
