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利用酵母双杂交技术筛选与BmDNV-Z病毒蛋白互作的家蚕中肠细胞蛋白

中文摘要第1-9页
Abstract第9-10页
第一章 文献综述第10-22页
   ·家蚕浓核病毒中国株第10-12页
   ·昆虫对病毒的免疫第12-17页
   ·酵母双杂交系统第17-22页
第二章 研究内容和方法第22-38页
   ·技术路线第22-23页
   ·实验材料第23-27页
     ·菌种第23页
     ·工具酶及试剂盒第23页
     ·其它材料第23-27页
   ·实验方法第27-38页
     ·氯化钙制备新鲜的感受态细胞第27页
     ·质粒DNA转化第27-28页
     ·质粒DNA的小量制备第28页
     ·连接反应第28页
     ·胶回收DNA片段第28-29页
     ·酵母菌感受态制备(LiAc法)第29页
     ·酵母菌的保存和复苏第29页
     ·构建家蚕浓核病毒中国株基因组所含的七个编码框的诱饵表达载体并转化酵母Y187第29-35页
       ·引物设计及PCR反应第29-30页
       ·BmDNV-Z诱饵载体的构建第30-31页
       ·重组诱饵载体转化酵母菌第31-35页
         ·验证AH109和Y187酵母菌营养表型第31页
         ·诱饵载体自激活检测第31页
         ·诱饵载体毒性的检测第31-33页
         ·诱饵载体转化酵母菌第33-34页
         ·检测转化效率第34-35页
     ·将转化有诱饵质粒的酵母Y187菌株与家蚕中肠cDNA文库进行杂交第35-36页
       ·两种酵母菌株杂交第35页
       ·涂布平板并计算杂交效率第35-36页
     ·筛选杂合体并进行测序第36-38页
       ·表现型的重复检测第36页
       ·菌落PCR验证第36-37页
       ·筛到的基因连接T载体第37-38页
第三章 实验结果第38-47页
   ·构建家蚕浓核病毒中国株基因组所含的七个编码框的诱饵表达载体并转化酵母Y187的实验结果第38-41页
     ·PCR扩增结果第38页
     ·诱饵载体构建第38-40页
     ·BmDNV-Z诱饵表达载体转化酵母菌第40-41页
       ·AH109和Y187酵母菌营养表型的验证第41页
       ·诱饵载体自激活检测第41页
       ·诱饵载体毒性的检测第41页
       ·转化效率的计算第41页
   ·将转化有诱饵质粒的酵母Y187菌株与家蚕中肠cDNA文库进行杂交的结果第41-43页
   ·筛选杂合体并进行测序的实验结果第43-47页
     ·表现型的重复检测第43页
     ·菌落PCR结果第43-46页
     ·测序结果第46-47页
第四章 讨论第47-49页
本研究的创新点第49-50页
参考文献第50-56页
致谢第56页

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