中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-22页 |
·家蚕浓核病毒中国株 | 第10-12页 |
·昆虫对病毒的免疫 | 第12-17页 |
·酵母双杂交系统 | 第17-22页 |
第二章 研究内容和方法 | 第22-38页 |
·技术路线 | 第22-23页 |
·实验材料 | 第23-27页 |
·菌种 | 第23页 |
·工具酶及试剂盒 | 第23页 |
·其它材料 | 第23-27页 |
·实验方法 | 第27-38页 |
·氯化钙制备新鲜的感受态细胞 | 第27页 |
·质粒DNA转化 | 第27-28页 |
·质粒DNA的小量制备 | 第28页 |
·连接反应 | 第28页 |
·胶回收DNA片段 | 第28-29页 |
·酵母菌感受态制备(LiAc法) | 第29页 |
·酵母菌的保存和复苏 | 第29页 |
·构建家蚕浓核病毒中国株基因组所含的七个编码框的诱饵表达载体并转化酵母Y187 | 第29-35页 |
·引物设计及PCR反应 | 第29-30页 |
·BmDNV-Z诱饵载体的构建 | 第30-31页 |
·重组诱饵载体转化酵母菌 | 第31-35页 |
·验证AH109和Y187酵母菌营养表型 | 第31页 |
·诱饵载体自激活检测 | 第31页 |
·诱饵载体毒性的检测 | 第31-33页 |
·诱饵载体转化酵母菌 | 第33-34页 |
·检测转化效率 | 第34-35页 |
·将转化有诱饵质粒的酵母Y187菌株与家蚕中肠cDNA文库进行杂交 | 第35-36页 |
·两种酵母菌株杂交 | 第35页 |
·涂布平板并计算杂交效率 | 第35-36页 |
·筛选杂合体并进行测序 | 第36-38页 |
·表现型的重复检测 | 第36页 |
·菌落PCR验证 | 第36-37页 |
·筛到的基因连接T载体 | 第37-38页 |
第三章 实验结果 | 第38-47页 |
·构建家蚕浓核病毒中国株基因组所含的七个编码框的诱饵表达载体并转化酵母Y187的实验结果 | 第38-41页 |
·PCR扩增结果 | 第38页 |
·诱饵载体构建 | 第38-40页 |
·BmDNV-Z诱饵表达载体转化酵母菌 | 第40-41页 |
·AH109和Y187酵母菌营养表型的验证 | 第41页 |
·诱饵载体自激活检测 | 第41页 |
·诱饵载体毒性的检测 | 第41页 |
·转化效率的计算 | 第41页 |
·将转化有诱饵质粒的酵母Y187菌株与家蚕中肠cDNA文库进行杂交的结果 | 第41-43页 |
·筛选杂合体并进行测序的实验结果 | 第43-47页 |
·表现型的重复检测 | 第43页 |
·菌落PCR结果 | 第43-46页 |
·测序结果 | 第46-47页 |
第四章 讨论 | 第47-49页 |
本研究的创新点 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56页 |