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牡丹红斑病及牡丹黑斑病病原鉴定

符号说明第1-10页
中文摘要第10-12页
ABSTRACT第12-14页
1 前言第14-25页
   ·中国牡丹品种群分类及特点第14-16页
     ·中原牡丹品种群第15页
     ·西北牡丹品种群第15页
     ·江南牡丹品种群第15-16页
     ·西南牡丹品种群第16页
   ·牡丹红斑病第16-19页
     ·发生及危害第16页
     ·发病症状第16-17页
     ·病原菌第17页
     ·发病规律及病害循环第17-18页
     ·影响因素第18页
     ·防治措施第18-19页
       ·利用抗病品种第18页
       ·化学防治第18页
       ·栽培管理措施第18-19页
   ·牡丹黑斑病第19页
     ·病原菌及田间症状第19页
     ·发病规律第19页
     ·防治措施第19页
   ·植物病原菌的鉴定方法第19-25页
     ·传统形态学法第19-20页
     ·分子生物学方法第20-25页
       ·单位点变异分析第20-21页
         ·RFLP及相关技术第20-21页
         ·DEEG、TGGE和SSCP第21页
         ·EPIC(外元引发的内元穿越)第21页
       ·多位点变异分析第21-23页
         ·SRAP(相关序列扩增多态性)第21-22页
         ·RAPD及相关技术第22页
         ·DAF第22页
         ·AFLP第22-23页
         ·VNTR位点第23页
       ·ITS序列分析第23-25页
         ·基因转录间隔区(ITS)第23-24页
         ·在真菌分类鉴定中的应用第24页
         ·在真菌分子检测中的应用第24-25页
   ·本研究的目的意义第25页
2 材料与方法第25-35页
   ·牡丹红斑病病原菌形态鉴定第25-27页
     ·试验材料第25-26页
       ·病原标本第25-26页
       ·培养基第26页
       ·试验试剂第26页
       ·试验仪器第26页
     ·试验方法第26-27页
       ·田间发病调查第26页
       ·病原菌分离培养第26-27页
       ·病原菌形态鉴定第27页
         ·病原菌菌落生长速率测定第27页
         ·病原菌形态观察和分生孢子大小测定第27页
   ·牡丹红斑病病原菌分子鉴定第27-32页
     ·试验材料第27-29页
       ·供试菌株第27-28页
       ·试验试剂第28页
       ·试验仪器第28-29页
     ·试验方法第29-32页
       ·DNA提取第29页
       ·DNA质量检测第29-30页
       ·rDNA-ITS区序列分析第30-32页
         ·供试菌株选择第30页
         ·供试菌株rDNA-ITS区特异性PCR扩增第30-31页
         ·特异性扩增片段回收第31页
         ·ITS区序列测定第31页
         ·序列分析与进化树构建第31-32页
   ·牡丹红斑病病原菌致病性鉴定第32-33页
     ·试验材料第32页
       ·供试菌株第32页
       ·供试寄主第32页
       ·试验试剂第32页
       ·试验仪器第32页
     ·试验方法第32-33页
       ·牡致病性鉴定第32-33页
         ·接种体准备第32页
         ·接种方法第32-33页
   ·牡丹黑斑病病原鉴定第33-35页
     ·试验材料第33-34页
       ·病样采集第33页
       ·实验试剂第33页
       ·实验仪器第33-34页
     ·实验方法第34页
       ·病原菌分离纯化第34页
       ·病原菌形态学鉴定第34页
     ·分子生物学鉴定第34-35页
       ·样品总DNA提取及PCR扩增第34-35页
       ·PCR产物回收与测序第35页
       ·序列分析第35页
       ·致病性鉴定第35页
3 结果与分析第35-61页
   ·牡丹红斑病病原菌形态鉴定第35-47页
     ·田间发病率第35-45页
     ·病原菌菌落生长速率第45-46页
     ·病原菌形态特征和分生孢子大小第46-47页
   ·牡丹红斑病病原菌分子鉴定第47-53页
     ·基因组DNA提取第47页
     ·供试菌株 16s rDNA-ITS区序列分析第47-53页
       ·菌株 16s rDNA-ITS区基因的特异性扩增结果第47-50页
       ·扩增片段序列分析与系统进化树构建第50-53页
   ·牡丹红斑病病原菌致病性鉴定第53-56页
     ·致病性鉴定第53-56页
       ·菌丝块针刺接种第53页
       ·菌丝块无伤口接种第53-56页
   ·牡丹黑斑病病原鉴定第56-61页
     ·疑似病株样本形态学观察第56-57页
     ·牡丹黑斑病病株分子生物学检测第57-61页
       ·病原菌分离物序列扩增第57-58页
       ·序列分析第58-61页
     ·病原菌致病性第61页
4.讨论第61-64页
   ·牡丹红斑病病原菌形态鉴定与前人结论相一致第61-62页
   ·分子鉴定分析更加明确了牡丹枝孢霉的亲缘关系第62页
   ·伤.促进牡丹枝孢霉的侵入和扩展第62-63页
   ·目前牡丹红斑病研究存在的问题第63页
   ·明确鉴定牡丹黑斑病病原第63-64页
5.结论第64-67页
   ·形态鉴定牡丹红斑病病原菌为牡丹枝孢霉第64-65页
     ·田间条件下不同牡丹发病情况不同第64-65页
   ·分子鉴定牡丹红斑病病原菌为牡丹枝孢霉第65页
     ·16s rDNA-ITS区序列分析鉴定病原菌第65页
     ·系统发育树的构建确定病原菌亲缘关系第65页
   ·致病性鉴定牡丹红斑病的病原菌致病性第65-66页
   ·牡丹黑斑病病原为ALTRENATA.ALTERNATA第66-67页
创新点第67-68页
参考文献第68-73页
附录第73-74页
致谢第74-75页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第75页

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