| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| ·Hsp的研究概况 | 第8-10页 |
| ·Hsp的发现 | 第8-9页 |
| ·Hsp的分类 | 第9页 |
| ·Hsp应用研究的意义 | 第9-10页 |
| ·Hsp70的研究概况 | 第10-14页 |
| ·Hsp70的分类 | 第10页 |
| ·Hsp70的结构特征 | 第10-11页 |
| ·Hsp70的生物学功能 | 第11-13页 |
| ·Hsp70在食品科学领域中的应用 | 第13-14页 |
| ·DnaK的研究现状 | 第14-15页 |
| ·DnaK水解ATP反应 | 第14-15页 |
| ·蛋白质诱导纯化技术 | 第15-17页 |
| ·异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达蛋白原理 | 第15-16页 |
| ·蛋白质表达纯化方法 | 第16-17页 |
| ·本课题研究的目的、意义及主要内容 | 第17-20页 |
| ·研究目的及意义 | 第17-18页 |
| ·本课题研究内容及技术路线 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-34页 |
| ·实验材料 | 第20-23页 |
| ·实验试剂 | 第20-22页 |
| ·实验器材 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-34页 |
| ·DnaK定点突变DNA的制备 | 第23-26页 |
| ·蛋白质的诱导表达 | 第26-28页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第28-31页 |
| ·蛋白质交联实验 | 第31页 |
| ·体内生长测试 | 第31-32页 |
| ·蛋白质与多肽结合实验 | 第32页 |
| ·色氨酸荧光分析 | 第32-34页 |
| 3 结果与讨论 | 第34-49页 |
| ·定点突变质粒的构建 | 第34-36页 |
| ·蛋白质高效表达及纯化结果 | 第36-42页 |
| ·DnaK-WT蛋白质的高效表达 | 第36-37页 |
| ·Ni亲和层析柱纯化DnaK-WT | 第37-40页 |
| ·阴离子交换柱纯化DnaK-WT | 第40-41页 |
| ·DnaK突变体的纯化 | 第41-42页 |
| ·DnaK在ATP存在的情况下能够形成特殊的二聚体 | 第42-44页 |
| ·DnaK二聚体对机体正常生长具有重要作用 | 第44-45页 |
| ·DnaK二聚体突变体对多肽的结合无明显影响 | 第45-47页 |
| ·突变体对ATP导致的变构耦合无影响 | 第47-49页 |
| 4 结论 | 第49-50页 |
| 5 展望 | 第50-51页 |
| 6 参考文献 | 第51-58页 |
| 7 硕士期间发表论文情况 | 第58-59页 |
| 8 致谢 | 第59-60页 |
| 9 附录 | 第60页 |