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绵羊Rad51基因的克隆与真核表达

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
英文缩写对照第11-12页
前言第12-13页
第1章 文献综述第13-22页
 1 Rad51基因及其同系物第13-14页
   ·重组蛋白A、Rad51第13页
   ·Rad51结构及其同系物第13页
   ·Rad51基因的研究现状第13-14页
 2 DNA双链断裂修复方式第14-19页
   ·非同源重组(NHEJ)第15-16页
   ·同源重组(HR)第16-19页
 3 Rad51及其同系物与DNA同源重组修复的联系第19-20页
 4 DNA重组技术第20-21页
   ·传统的克隆法第20-21页
   ·同源重组克隆法第21页
 5 本课题研究的目的和意义第21-22页
第2章 试验研究第22-54页
 试验1 萨福克绵羊耳缘成纤维细胞体外培养第22-27页
  1 材料和方法第23-24页
   ·试验材料第23页
   ·试验方法第23-24页
  2 试验结果与分析第24-25页
   ·萨福克绵羊成纤维细胞体外培养生物学特性第24-25页
  3 讨论第25-26页
  4 小结第26-27页
 试验2 绵羊Rad51真核表达载体的构建第27-35页
  1 材料和方法第27-32页
   ·试验材料第27-28页
   ·试验方法第28-32页
  2 试验结果与分析第32-33页
   ·绵羊成纤维细胞CRISPR/Cas9、TALENs Surveyor检测第32-33页
   ·pcDNA3.1-Rad51 cDNA测序结果分析第33页
  3 讨论第33-34页
  4 小结第34-35页
 试验3 Rad51基因在萨福克绵羊成纤维细胞中的表达第35-41页
  1 材料和方法第36-38页
   ·试验材料第36页
   ·试验方法第36-38页
  2 试验结果与结论第38-39页
   ·电转后细胞贴壁情况第38-39页
   ·消化后细胞状态第39页
  3 讨论第39-40页
  4 结论第40-41页
 试验4 Rad51基因表达情况检测第41-54页
  1 材料和方法第41-46页
   ·试验材料第41-42页
   ·方法第42-46页
  2 试验结果第46-52页
   ·成纤维细胞总RNA完整性的检测第46-47页
   ·cDNA PCR鉴定第47-48页
   ·标准曲线第48-49页
   ·Real-time PCR检测结果第49-51页
   ·同一样品不同存储温度对蛋白样品的影响第51页
   ·Western Blot检测结果第51-52页
  3 讨论第52-53页
  4 小结第53-54页
总结第54页
创新点第54-55页
参考文献第55-61页
附件第61-63页
致谢第63-64页
作者简介第64-65页
附件第65页

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