摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
英文缩写对照 | 第11-12页 |
前言 | 第12-13页 |
第1章 文献综述 | 第13-22页 |
1 Rad51基因及其同系物 | 第13-14页 |
·重组蛋白A、Rad51 | 第13页 |
·Rad51结构及其同系物 | 第13页 |
·Rad51基因的研究现状 | 第13-14页 |
2 DNA双链断裂修复方式 | 第14-19页 |
·非同源重组(NHEJ) | 第15-16页 |
·同源重组(HR) | 第16-19页 |
3 Rad51及其同系物与DNA同源重组修复的联系 | 第19-20页 |
4 DNA重组技术 | 第20-21页 |
·传统的克隆法 | 第20-21页 |
·同源重组克隆法 | 第21页 |
5 本课题研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第2章 试验研究 | 第22-54页 |
试验1 萨福克绵羊耳缘成纤维细胞体外培养 | 第22-27页 |
1 材料和方法 | 第23-24页 |
·试验材料 | 第23页 |
·试验方法 | 第23-24页 |
2 试验结果与分析 | 第24-25页 |
·萨福克绵羊成纤维细胞体外培养生物学特性 | 第24-25页 |
3 讨论 | 第25-26页 |
4 小结 | 第26-27页 |
试验2 绵羊Rad51真核表达载体的构建 | 第27-35页 |
1 材料和方法 | 第27-32页 |
·试验材料 | 第27-28页 |
·试验方法 | 第28-32页 |
2 试验结果与分析 | 第32-33页 |
·绵羊成纤维细胞CRISPR/Cas9、TALENs Surveyor检测 | 第32-33页 |
·pcDNA3.1-Rad51 cDNA测序结果分析 | 第33页 |
3 讨论 | 第33-34页 |
4 小结 | 第34-35页 |
试验3 Rad51基因在萨福克绵羊成纤维细胞中的表达 | 第35-41页 |
1 材料和方法 | 第36-38页 |
·试验材料 | 第36页 |
·试验方法 | 第36-38页 |
2 试验结果与结论 | 第38-39页 |
·电转后细胞贴壁情况 | 第38-39页 |
·消化后细胞状态 | 第39页 |
3 讨论 | 第39-40页 |
4 结论 | 第40-41页 |
试验4 Rad51基因表达情况检测 | 第41-54页 |
1 材料和方法 | 第41-46页 |
·试验材料 | 第41-42页 |
·方法 | 第42-46页 |
2 试验结果 | 第46-52页 |
·成纤维细胞总RNA完整性的检测 | 第46-47页 |
·cDNA PCR鉴定 | 第47-48页 |
·标准曲线 | 第48-49页 |
·Real-time PCR检测结果 | 第49-51页 |
·同一样品不同存储温度对蛋白样品的影响 | 第51页 |
·Western Blot检测结果 | 第51-52页 |
3 讨论 | 第52-53页 |
4 小结 | 第53-54页 |
总结 | 第54页 |
创新点 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
附件 | 第61-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简介 | 第64-65页 |
附件 | 第65页 |