| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-22页 |
| 1 贝类冷应激研究进展 | 第13-15页 |
| ·冷应激概述 | 第13页 |
| ·冷应激对贝类机体的影响 | 第13-15页 |
| ·冷应激对贝类神经内分泌调节的影响 | 第13-14页 |
| ·冷应激对贝类免疫机能的影响 | 第14页 |
| ·冷应激对贝类氧化应激的影响 | 第14-15页 |
| 2 伴侣素CCT研究进展 | 第15-21页 |
| ·伴侣素 | 第15-16页 |
| ·CCT的结构 | 第16-17页 |
| ·CCT亚基结构 | 第16页 |
| ·CCT环内亚基的排列 | 第16-17页 |
| ·CCT基因的转录调控 | 第17-18页 |
| ·CCT的生物学功能 | 第18-20页 |
| ·分子伴侣 | 第18-19页 |
| ·协同免疫 | 第19页 |
| ·细胞凋亡 | 第19页 |
| ·细胞周期调控 | 第19-20页 |
| ·CCT在耐寒方面的研究进展 | 第20-21页 |
| 3 本研究的目的及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 大珠母贝CCT亚基基因cDNA克隆及生物信息学分析 | 第22-56页 |
| 第一节 大珠母贝CCT-α基因cDNA克隆及生物信息学分析 | 第22-39页 |
| 1 材料与方法 | 第22-32页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第22-23页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第23页 |
| ·溶液的配制 | 第23-24页 |
| ·培养基的配制 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-32页 |
| ·总RNA提取 | 第24-25页 |
| ·cDNA模板制备 | 第25页 |
| ·引物设计与合成 | 第25-26页 |
| ·CCT-α中间片段PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR产物的分离、回收及纯化 | 第27页 |
| ·回收产物与克隆载体连接 | 第27页 |
| ·重组质粒的转化 | 第27页 |
| ·重组质粒的筛选及测序 | 第27-28页 |
| ·CCT-α 3’末端序列克隆 | 第28-29页 |
| ·CCT-α 5’末端序列克隆 | 第29-31页 |
| ·cDNA序列生物信息学分析 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-37页 |
| ·大珠母贝CCT-α基因cDNA全长的克隆 | 第32-33页 |
| ·大珠母贝CCT-α基因cDNA序列分析 | 第33-35页 |
| ·大珠母贝CCT-α蛋白质理化性质 | 第33-34页 |
| ·大珠母贝CCT-α蛋白质结构预测 | 第34-35页 |
| ·大珠母贝CCT-α同源性分析 | 第35-36页 |
| ·大珠母贝CCT-α进化分析 | 第36-37页 |
| 3.讨论 | 第37-39页 |
| 第二节 大珠母贝CCT-β基因cDNA克隆及生物信息学分析 | 第39-49页 |
| 1 材料与方法 | 第39-41页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·总RNA提取 | 第39页 |
| ·c DNA 模板制备 | 第39页 |
| ·引物设计与合成 | 第39-40页 |
| ·CCT-β中间片段PCR扩增 | 第40页 |
| ·CCT-β 3’末端序列克隆 | 第40页 |
| ·CCT-β 5’末端序列克隆 | 第40-41页 |
| ·cDNA序列生物信息学分析 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-47页 |
| ·大珠母贝CCT-β基因cDNA全长的克隆 | 第41页 |
| ·大珠母贝CCT-β基因cDNA序列分析 | 第41-45页 |
| ·大珠母贝CCT-β蛋白质理化性质 | 第41-45页 |
| ·大珠母贝CCT-β蛋白质结构预测 | 第45页 |
| ·大珠母贝CCT-β同源性分析 | 第45-46页 |
| ·大珠母贝CCT-β进化分析 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 第三节 大珠母贝CCT-η基因cDNA克隆及生物信息学分析 | 第49-56页 |
| 1 材料与方法 | 第49-51页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·总RNA提取 | 第49页 |
| ·cDNA模板制备 | 第49页 |
| ·引物设计与合成 | 第49-50页 |
| ·CCT-η中间片段PCR扩增 | 第50页 |
| ·CCT-η 3’末端序列克隆 | 第50页 |
| ·CCT-η 5’末端序列克隆 | 第50-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-55页 |
| ·大珠母贝CCT-η基因cDNA全长的克隆 | 第51页 |
| ·大珠母贝CCT-η基因cDNA序列分析 | 第51-53页 |
| ·大珠母贝CCT-η蛋白质理化性质 | 第51-53页 |
| ·大珠母贝CCT-η蛋白质二级结构预测 | 第53页 |
| ·大珠母贝CCT-η基因同源性分析 | 第53-54页 |
| ·大珠母贝CCT-η基因的进化树分析 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-56页 |
| 第三章 大珠母贝CCT亚基基因mRNA组织表达谱分析 | 第56-63页 |
| 1 材料与方法 | 第56-58页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·实验动物 | 第56页 |
| ·实验试剂 | 第56页 |
| ·实验仪器 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-58页 |
| ·总RNA提取 | 第56-57页 |
| ·cDNA合成 | 第57页 |
| ·荧光定量引物合成 | 第57-58页 |
| ·荧光定量PCR | 第58页 |
| ·数据处理 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-61页 |
| ·总RNA质量的检测 | 第58-59页 |
| ·引物特异性检测 | 第59页 |
| ·大珠母贝CCT-α基因的组织差异性表达 | 第59页 |
| ·大珠母贝CCT-β基因的组织差异性表达 | 第59-60页 |
| ·大珠母贝CCT-η基因的组织差异性表达 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 冷应激对大珠母贝CCT亚基基因mRNA表达的影响 | 第63-69页 |
| 1 材料与方法 | 第63-64页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·实验动物 | 第63页 |
| ·实验试剂 | 第63页 |
| ·实验仪器 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63-64页 |
| ·大珠母贝冷应激处理 | 第63-64页 |
| ·总RNA提取 | 第64页 |
| ·cDNA合成 | 第64页 |
| ·荧光定量引物合成 | 第64页 |
| ·荧光定量PCR | 第64页 |
| ·数据处理 | 第64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-67页 |
| ·冷应激条件下CCT-α基因的表达 | 第64-65页 |
| ·冷应激条件下CCT-β基因的表达 | 第65-66页 |
| ·冷应激条件下CCT-η基因的表达 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简介 | 第82-83页 |
| 导师简介 | 第83页 |
