| 目录 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 引言 | 第12-16页 |
| 第一部分 PTX-NPs 和 PTX 对肿瘤细胞增殖的影响 | 第16-27页 |
| 1 仪器、试剂及材料 | 第16-19页 |
| ·肿瘤细胞与药物 | 第16页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第16-17页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第17页 |
| ·主要液体配制 | 第17-19页 |
| ·双蒸水 | 第17页 |
| ·磷酸盐缓冲液（PBS，主要用于实验室细胞的洗涤） | 第17-18页 |
| ·RPMI-1640 培养液（ Thermo 公司） | 第18页 |
| ·DMEM 培养液 | 第18页 |
| ·冻存液 | 第18页 |
| ·MTT 溶液的配制 | 第18页 |
| ·胎牛血清的灭活 | 第18页 |
| ·药物母液配制 | 第18-19页 |
| 2 实验方法 | 第19-21页 |
| ·细胞培养 | 第19-20页 |
| ·细胞复苏 | 第19页 |
| ·细胞传代 | 第19页 |
| ·细胞冻存 | 第19-20页 |
| ·MTT 比色法检测 PTX-NPs 和 PTX 对肿瘤细胞的生长抑制作用 | 第20-21页 |
| ·接种细胞 | 第20页 |
| ·细胞加药 | 第20页 |
| ·染色 | 第20-21页 |
| ·比色及计算 | 第21页 |
| 3 结果 | 第21-24页 |
| 4 讨论 | 第24-27页 |
| 第二部分 PTX-NPs 和 PTX 对胃癌细胞 SGC-7901 细胞周期的影响 | 第27-36页 |
| 1 仪器、试剂及耗材 | 第27-29页 |
| ·肿瘤细胞及药物 | 第27页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第27-28页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第28页 |
| ·PI 染液的配制 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-30页 |
| ·细胞种板 | 第29页 |
| ·细胞加药 | 第29页 |
| ·细胞收集 | 第29页 |
| ·细胞固定 | 第29-30页 |
| ·PI 染色及流式细胞仪检测 | 第30页 |
| ·数据统计 | 第30页 |
| 3 结果 | 第30-34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 第三部分 免疫荧光实验检测胃癌细胞 SGC-7901 phospho-ATM 焦点和 rH2AX 焦点的形成 | 第36-43页 |
| 1 仪器、试剂及耗材 | 第36-37页 |
| ·肿瘤细胞及药物 | 第36页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第36-37页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第37页 |
| 2 实验方法 | 第37-39页 |
| ·盖玻片的处理 | 第37页 |
| ·细胞爬片 | 第37-38页 |
| ·细胞加药 | 第38页 |
| ·细胞固定 | 第38页 |
| ·细胞通透处理 | 第38页 |
| ·封闭 | 第38页 |
| ·抗体孵育 | 第38-39页 |
| ·DAPI 染色 | 第39页 |
| ·拍照计数 | 第39页 |
| 3 结果 | 第39-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 第四部分 PTX-NPs 和 PTX 对细胞周期相关蛋白表达的影响 | 第43-59页 |
| 1 仪器、试剂及材料 | 第43-47页 |
| ·肿瘤细胞与药物 | 第43页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第43-44页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第44-45页 |
| ·主要试剂配制 | 第45-47页 |
| ·Bradford 试剂 | 第45页 |
| ·10%SDS | 第45页 |
| ·30%丙烯酰胺 | 第45-46页 |
| ·1.5mol/LTris（pH8.8）（100ml） | 第46页 |
| ·1mol/LTris（pH6.8）（100ml） | 第46页 |
| ·10％ 过硫酸铵 | 第46页 |
| ·SDS-PAGE10%分离胶 | 第46页 |
| ·SDS-PAGE5%浓缩胶 | 第46-47页 |
| ·10×TBST（pH7.6） | 第47页 |
| ·10×电泳缓冲液（pH8.3） | 第47页 |
| ·10×转膜液 | 第47页 |
| 2 实验方法 | 第47-51页 |
| ·细胞种板 | 第47-48页 |
| ·细胞加药 | 第48页 |
| ·提取细胞总蛋白 | 第48页 |
| ·标准蛋白曲线的绘制 | 第48-49页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第49页 |
| ·western blotting | 第49-51页 |
| ·制胶 | 第49页 |
| ·上样 | 第49页 |
| ·电泳 | 第49-50页 |
| ·转膜 | 第50页 |
| ·封闭 | 第50页 |
| ·抗体孵育 | 第50页 |
| ·化学发光 | 第50-51页 |
| ·曝光 | 第51页 |
| ·显影、定影 | 第51页 |
| ·凝胶图像分析 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-57页 |
| ·PTX 与 PTX-NPs 引起 DNA 损伤磷酸化激活 ATM 激酶并增加 rH2AX 的表达，且 PTX-NPs 引起表达量的变化更明显 | 第51页 |
| ·PTX 与 PTX-NPs 能增加 p-Cdc25C 和 p-cdc2 的表达，且 PTX-NPs 引起表达量的变化更明显；CyclinB1 表达变化不明显 | 第51-52页 |
| ·PTX 与 PTX-NPs 增加 Chk2 的磷酸化，但对 Chk2 表达量的变化影响不明显 | 第52页 |
| ·PTX 与 PTX-NPs 上调 p-53 的磷酸化 | 第52-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 主要中英文缩写对照词表 | 第67-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
