| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1 玉米遗传转化的研究意义 | 第10页 |
| 2 玉米遗传转化研究概况 | 第10-15页 |
| ·遗传转化方法 | 第11-14页 |
| ·农杆菌介导法 | 第11-12页 |
| ·基因枪法 | 第12-13页 |
| ·花粉管通道法 | 第13页 |
| ·其他转化方法 | 第13-14页 |
| ·玉米遗传转化的受体 | 第14页 |
| ·玉米遗传转化的载体 | 第14-15页 |
| 3 玉米细胞质雄性不育及其假说 | 第15-16页 |
| ·玉米细胞质雄性不育的分类及特点 | 第15页 |
| ·关于胞质雄性不育形成的假说 | 第15-16页 |
| ·亲缘假说 | 第15-16页 |
| ·能量供求假说 | 第16页 |
| ·质核控制假说互补 | 第16页 |
| ·细胞程序性死亡（PCD）假说 | 第16页 |
| 4 细胞质雄性不育的研究意义 | 第16-17页 |
| 5 展望 | 第17页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 胚性愈伤组织再生体系的建立 | 第19-28页 |
| 1 材料和方法 | 第19-22页 |
| ·试验材料 | 第19页 |
| ·玉米材料 | 第19页 |
| ·试验药品 | 第19页 |
| ·培养基的配制 | 第19页 |
| ·激素的配制 | 第19页 |
| ·试验方法 | 第19-22页 |
| ·幼胚处理方法 | 第19-20页 |
| ·愈伤诱导过程 | 第20页 |
| ·不同基因型对幼胚愈伤诱导率的影响 | 第20页 |
| ·胚龄及幼胚大小对不同基因型幼胚愈伤组织诱导率的影响 | 第20-21页 |
| ·不同浓度的 2,4-D 浓度对胚型愈伤诱导率的影响 | 第21页 |
| ·试验材料 | 第21页 |
| ·试验方法 | 第21页 |
| ·不同浓度的 6-BA 处理愈伤组织对植株再生的影响 | 第21页 |
| ·试验材料 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·处理方法 | 第21页 |
| ·不同浓度的 NAA 处理对再生植株生长壮苗的影响 | 第21-22页 |
| ·试验材料 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·处理方法 | 第21-22页 |
| ·统计方法 | 第22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-25页 |
| ·基因型对幼胚愈伤组织诱导的影响 | 第22-23页 |
| ·胚龄和幼胚大小对不同基因型幼胚愈伤组织诱导率的影响 | 第23-24页 |
| ·不同浓度 2,4-D 对胚型愈伤诱导率的影响 | 第24页 |
| ·不同浓度 6-BA 处理对愈伤组织再生植株的影响 | 第24-25页 |
| ·不同浓度的 NAA 处理对再生植株生根壮苗的影响 | 第25页 |
| 3 结论和讨论 | 第25-28页 |
| ·基因型、胚龄及幼胚大小对胚性愈伤诱导率的影响 | 第26页 |
| ·不同植物激素对愈伤组织诱导、分化及再生体系的影响 | 第26-28页 |
| 第三章 农杆菌侵染胚性愈伤试验 | 第28-41页 |
| 1 材料 | 第28-29页 |
| ·玉米材料 | 第28页 |
| ·菌株及载体 | 第28页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·试剂配制 | 第29页 |
| 2 试验方法 | 第29-33页 |
| ·表达载体导入农杆菌 | 第29-31页 |
| ·植物表达载体高纯质粒的提取 | 第29页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第29-30页 |
| ·质粒表达载体 DNA 导入农杆菌感受细胞 | 第30页 |
| ·菌落 PCR 检测体系和程序 | 第30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第30-31页 |
| ·农杆菌的保存 | 第31页 |
| ·农杆菌侵染过程 | 第31-32页 |
| ·愈伤组织的准备 | 第31页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第31页 |
| ·农杆菌转化胚性愈伤组织过程 | 第31页 |
| ·转化过程中的参数调节 | 第31-32页 |
| ·转基因植株的检测 | 第32-33页 |
| ·PCR 分子检测 | 第32-33页 |
| ·转化苗基因组DNA的提取与纯化 | 第32页 |
| ·PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第33页 |
| ·PPT 涂抹法检测 | 第33页 |
| ·T1、T2 代转基因植株的检测和育性调查 | 第33页 |
| 3 结果和分析 | 第33-37页 |
| ·高纯度质粒提取质量及阳性单克隆检测结果 | 第33-34页 |
| ·农杆菌转化玉米愈伤的因素 | 第34-36页 |
| ·农杆菌感染浓度和感染时间的影响 | 第34-35页 |
| ·共培养时间的长短的影响 | 第35页 |
| ·共培养不同温度的影响 | 第35页 |
| ·PPT 筛选临界浓度的确定 | 第35-36页 |
| ·转基因植株的获得 | 第36-37页 |
| 4 Rf4 候选基因转基因植株的鉴定 | 第37-39页 |
| ·T0 转基因苗的检测及育性调查 | 第37页 |
| ·T1、T2 代转基因苗的检测及育性调查结果 | 第37-39页 |
| ·T1 代检测及育性调查结果 | 第37-38页 |
| ·T2 代检测及育性调查结果 | 第38-39页 |
| ·标记基因分子 PCR 检测和涂抹 PPT 鉴定的比较结果 | 第38页 |
| ·T2 代育性调查结果 | 第38-39页 |
| 5 结论与讨论 | 第39-41页 |
| ·菌液浓度和侵染时间对转化效率的影响 | 第39页 |
| ·共培养时间和温度对转化效率的影响 | 第39-40页 |
| ·筛选剂对转化率的影响 | 第40-41页 |
| 第四章 全文小结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| ABSTRACT | 第48-49页 |
