| 摘要 | 第1-8页 |
| 1 前言 | 第8-16页 |
| ·鸡肠道营养吸收的结构 | 第8页 |
| ·鸡小肠糖类营养转运蛋白 | 第8-10页 |
| ·鸡小肠内糖类营养转运蛋白顺式作用元件概述 | 第10-11页 |
| ·GATA3基因概述 | 第11-12页 |
| ·GATA3转录调控蛋白家族 | 第11页 |
| ·GATA3基因的研究 | 第11-12页 |
| ·USF-1基因的概述 | 第12页 |
| ·USF-1转录调控蛋白家族 | 第12页 |
| ·USF-1基因的研究 | 第12页 |
| ·真核表达系统的构建 | 第12-15页 |
| ·真核表达系统的概述 | 第12-13页 |
| ·转染细胞的方法 | 第13-15页 |
| ·本研究的目的、意义和主要内容 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-35页 |
| ·试验材料 | 第16-19页 |
| ·试验动物 | 第16页 |
| ·试验仪器设备 | 第16-17页 |
| ·主要药品和试剂 | 第17页 |
| ·常用试剂的配置 | 第17-18页 |
| ·引物设计 | 第18-19页 |
| ·细胞系及质粒载体 | 第19页 |
| ·293T细胞培养试剂 | 第19页 |
| ·试验方法 | 第19-35页 |
| ·转录因子GATA3和USF-1的生物信息学分析 | 第19-20页 |
| ·引物的设计 | 第20页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第20-25页 |
| ·质粒的提取 | 第25-27页 |
| ·293T细胞的培养 | 第27-28页 |
| ·真核表达载体转染293T细胞 | 第28-29页 |
| ·检测293T细胞中目的基因mRNA和GLUT2mRNA的表达 | 第29-35页 |
| 3 试验结果 | 第35-52页 |
| ·转录因子GATA3和USF-1的生物信息学分析 | 第35-41页 |
| ·理化性质分析 | 第35页 |
| ·疏水性分析 | 第35-36页 |
| ·信号肽预测 | 第36-37页 |
| ·跨膜区结构预测 | 第37页 |
| ·磷酸化位点预测 | 第37-38页 |
| ·二级结构预测 | 第38-41页 |
| ·亚细胞定位 | 第41页 |
| ·重组真核表达载体的鉴定 | 第41-44页 |
| ·GATA3和USF-1基因的扩增 | 第41-42页 |
| ·真核表达载体的酶切鉴定 | 第42-44页 |
| ·真核表达载体在293T细胞中的表达 | 第44-49页 |
| ·细胞转染形态学观察 | 第44-45页 |
| ·细胞RNA提取结果 | 第45-46页 |
| ·细胞cDNA扩增基因结果 | 第46-47页 |
| ·目的基因绝对定量标准曲线和溶解曲线 | 第47-48页 |
| ·不同转染组细胞中目的基因mRNA表达量 | 第48-49页 |
| ·GLUT2在不同转染组中的表达量 | 第49-52页 |
| ·GLUT2基因绝对定量标准曲线和溶解曲线 | 第49-50页 |
| ·不同转染组细胞中GLUT2基因mRNA表达量 | 第50-52页 |
| 4 分析与讨论 | 第52-58页 |
| ·转录因子GATA3和USF-1生物信息学分析 | 第52-53页 |
| ·在293T细胞中研究GLUT2表达调控机制分析 | 第53页 |
| ·真核表达载体构建的影响因素 | 第53-55页 |
| ·影响真核表达载体表达的因素 | 第55-56页 |
| ·293T细胞培养的相关因素 | 第55页 |
| ·转染试剂对293T细胞的影响 | 第55-56页 |
| ·影响真核表达载体表达效率的因素 | 第56页 |
| ·全文结果讨论 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| Abstract | 第63-65页 |
| 附录 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73页 |