| 上海海洋大学 徐洁 硕士学位论文答辩委员会成员名单 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-17页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-27页 |
| ·短蛸(Octopus ocellatus)的简介 | 第19页 |
| ·无脊椎动物的先天性免疫 | 第19-22页 |
| ·先天性免疫概述 | 第19-20页 |
| ·无脊椎动物先天性免疫应答过程 | 第20-22页 |
| ·过氧化物还原酶概述 | 第22-23页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制剂概述 | 第23-25页 |
| ·丝氨酸蛋白酶 | 第23-24页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制剂 | 第24-25页 |
| ·本研究的主要目的及意义 | 第25-27页 |
| 第二章 短蛸过氧化物还原酶(OoPrx-4)基因的克隆及其表达分析 | 第27-42页 |
| ·实验材料 | 第27-31页 |
| ·实验动物及菌株 | 第27页 |
| ·建立短蛸 cDNA 文库 | 第27页 |
| ·实验主要试剂及载体 | 第27-28页 |
| ·实验主要溶液及培养基 | 第28-30页 |
| ·实验所用主要引物 | 第30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-35页 |
| ·OoPrx-4 cDNA 全长的克隆 | 第31-32页 |
| ·OoPrx-4 的序列分析 | 第32-33页 |
| ·RNA 的提取和 cDNA 的合成 | 第33-34页 |
| ·RNA 的提取 | 第33页 |
| ·cDNA 的获得 | 第33-34页 |
| ·短蛸不同组织 OoPrx-4 基因 mRNA 的表达分析 | 第34-35页 |
| ·短蛸受鳗弧菌刺激后不同时间点 OoPrx-4 基因 mRNA 的表达分析 | 第35页 |
| ·实验结果 | 第35-40页 |
| ·OoPrx-4 全长 cDNA 的特征 | 第35-36页 |
| ·OoPrx-4 基因的同源性分析 | 第36-37页 |
| ·OoPrx-4 基因的系统进化分析 | 第37-39页 |
| ·OoPrx-4 的 mRNA 在短蛸不同组织中的表达规律 | 第39-40页 |
| ·OoPrx-4 在短蛸受到鳗弧菌刺激后的表达规律 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 短蛸丝氨酸蛋白酶抑制剂(OoSerpin)基因的克隆及功能分析 | 第42-67页 |
| ·实验材料 | 第42-48页 |
| ·实验动物及菌株 | 第42页 |
| ·实验主要试剂及载体 | 第42-44页 |
| ·实验主要溶液及培养基 | 第44-46页 |
| ·实验所用主要引物 | 第46-47页 |
| ·主要仪器设备 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-54页 |
| ·OoSerpin cDNA 全长的克隆 | 第48页 |
| ·OoSerpin 序列和特征分析 | 第48页 |
| ·RNA 的提取和 cDNA 的合成 | 第48页 |
| ·短蛸不同组织 OoSerpin 基因 mRNA 的表达分析 | 第48-49页 |
| ·短蛸受病原菌刺激后不同时间点 OoPrx-4 基因 mRNA 的表达分析 | 第49页 |
| ·OoSerpin 蛋白的原核重组表达与纯化 | 第49-53页 |
| ·构建原核表达载体 | 第49-51页 |
| ·重组蛋白的表达与检测 | 第51-52页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第52页 |
| ·重组蛋白的复性与浓度测定 | 第52-53页 |
| ·蛋白酶活性抑制实验 | 第53-54页 |
| ·细菌生长抑制实验 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-64页 |
| ·OoSerpin 全长 cDNA 的特征 | 第54-56页 |
| ·OoSerpin 基因的同源性分析 | 第56页 |
| ·OoSerpin 基因的发育分析 | 第56-60页 |
| ·OoSerpin 的 mRNA 在短蛸不同组织中的表达规律 | 第60-61页 |
| ·OoSerpin 的 mRNA 在短蛸受到细菌刺激后不同时间点的表达规律 | 第61-62页 |
| ·OoSerpin 蛋白的原核重组表达与纯化 | 第62页 |
| ·rOoSerpin 对蛋白酶活性的抑制作用 | 第62-63页 |
| ·rOoSerpin 对大肠杆菌生长的抑制作用 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-67页 |
| 全文总结 | 第67-70页 |
| 1.短蛸 OoPrx-4 和 OoSerpin 基因的 cDNA 克隆和特征分析 | 第67页 |
| 2.短蛸 OoPrx-4 和 OoSerpin 基因的组织表达和实时表达分析 | 第67-68页 |
| 3. 短蛸 OoSerpin 基因重组蛋白的抑制活性 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 已完成文章 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |