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短蛸Prx-4基因与Serpin基因的表达和功能研究

上海海洋大学 徐洁 硕士学位论文答辩委员会成员名单第1-4页
摘要第4-8页
ABSTRACT第8-17页
引言第17-19页
第一章 文献综述第19-27页
   ·短蛸(Octopus ocellatus)的简介第19页
   ·无脊椎动物的先天性免疫第19-22页
     ·先天性免疫概述第19-20页
     ·无脊椎动物先天性免疫应答过程第20-22页
   ·过氧化物还原酶概述第22-23页
   ·丝氨酸蛋白酶抑制剂概述第23-25页
     ·丝氨酸蛋白酶第23-24页
     ·丝氨酸蛋白酶抑制剂第24-25页
   ·本研究的主要目的及意义第25-27页
第二章 短蛸过氧化物还原酶(OoPrx-4)基因的克隆及其表达分析第27-42页
   ·实验材料第27-31页
     ·实验动物及菌株第27页
     ·建立短蛸 cDNA 文库第27页
     ·实验主要试剂及载体第27-28页
     ·实验主要溶液及培养基第28-30页
     ·实验所用主要引物第30页
     ·主要仪器设备第30-31页
   ·实验方法第31-35页
     ·OoPrx-4 cDNA 全长的克隆第31-32页
     ·OoPrx-4 的序列分析第32-33页
     ·RNA 的提取和 cDNA 的合成第33-34页
       ·RNA 的提取第33页
       ·cDNA 的获得第33-34页
     ·短蛸不同组织 OoPrx-4 基因 mRNA 的表达分析第34-35页
     ·短蛸受鳗弧菌刺激后不同时间点 OoPrx-4 基因 mRNA 的表达分析第35页
   ·实验结果第35-40页
     ·OoPrx-4 全长 cDNA 的特征第35-36页
     ·OoPrx-4 基因的同源性分析第36-37页
     ·OoPrx-4 基因的系统进化分析第37-39页
     ·OoPrx-4 的 mRNA 在短蛸不同组织中的表达规律第39-40页
     ·OoPrx-4 在短蛸受到鳗弧菌刺激后的表达规律第40页
   ·讨论第40-42页
第三章 短蛸丝氨酸蛋白酶抑制剂(OoSerpin)基因的克隆及功能分析第42-67页
   ·实验材料第42-48页
     ·实验动物及菌株第42页
     ·实验主要试剂及载体第42-44页
     ·实验主要溶液及培养基第44-46页
     ·实验所用主要引物第46-47页
     ·主要仪器设备第47-48页
   ·实验方法第48-54页
     ·OoSerpin cDNA 全长的克隆第48页
     ·OoSerpin 序列和特征分析第48页
     ·RNA 的提取和 cDNA 的合成第48页
     ·短蛸不同组织 OoSerpin 基因 mRNA 的表达分析第48-49页
     ·短蛸受病原菌刺激后不同时间点 OoPrx-4 基因 mRNA 的表达分析第49页
     ·OoSerpin 蛋白的原核重组表达与纯化第49-53页
       ·构建原核表达载体第49-51页
       ·重组蛋白的表达与检测第51-52页
       ·重组蛋白的纯化第52页
       ·重组蛋白的复性与浓度测定第52-53页
     ·蛋白酶活性抑制实验第53-54页
     ·细菌生长抑制实验第54页
   ·结果第54-64页
     ·OoSerpin 全长 cDNA 的特征第54-56页
     ·OoSerpin 基因的同源性分析第56页
     ·OoSerpin 基因的发育分析第56-60页
     ·OoSerpin 的 mRNA 在短蛸不同组织中的表达规律第60-61页
     ·OoSerpin 的 mRNA 在短蛸受到细菌刺激后不同时间点的表达规律第61-62页
     ·OoSerpin 蛋白的原核重组表达与纯化第62页
     ·rOoSerpin 对蛋白酶活性的抑制作用第62-63页
     ·rOoSerpin 对大肠杆菌生长的抑制作用第63-64页
   ·讨论第64-67页
全文总结第67-70页
 1.短蛸 OoPrx-4 和 OoSerpin 基因的 cDNA 克隆和特征分析第67页
 2.短蛸 OoPrx-4 和 OoSerpin 基因的组织表达和实时表达分析第67-68页
 3. 短蛸 OoSerpin 基因重组蛋白的抑制活性第68-70页
参考文献第70-79页
已完成文章第79-81页
致谢第81页

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