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庆大霉素生物合成中关键酶性质与调节的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
第一章 绪论第10-23页
   ·研究背景第10页
   ·小单孢菌产庆大霉素的研究与现状第10-15页
     ·小单孢菌简介第10-11页
     ·庆大霉素简介第11-13页
     ·庆大霉素的研究现状第13页
     ·庆大霉素的生物合成途径第13-14页
     ·庆大霉素的产生与代谢调节的关系第14-15页
   ·糖酵解途径中关键酶的研究与现状第15-19页
     ·己糖激酶(HK)研究与现状第15-17页
       ·己糖激酶(HK)的研究进展第15-16页
       ·HK 的催化过程第16页
       ·HK 活性的测定方法第16-17页
     ·磷酸果糖激酶(PFK)的研究与现状第17-19页
       ·磷酸果糖激酶(PFK)的研究进展第17-18页
       ·PFK 的催化过程第18页
       ·PFK 活性的测定方法第18-19页
   ·小单孢菌细胞膜的研究与现状第19-21页
     ·细胞膜的结构第19-20页
     ·细胞膜的作用第20页
     ·细胞膜对庆大霉素分泌的影响第20-21页
   ·本课题的研究意义和研究内容第21-23页
     ·研究意义第21-22页
     ·研究内容第22-23页
第二章 RP-HPLC 检测己糖激酶活性新方法的创立第23-34页
   ·引言第23页
   ·材料第23-24页
     ·主要仪器设备第23-24页
     ·试剂和药品第24页
     ·流动相的配制第24页
   ·实验方法第24-26页
     ·色谱条件第24-25页
     ·标样的测定第25页
       ·ATP 和 ADP 的反向高效液相色谱分析第25页
       ·ADP 标准曲线的测定第25页
       ·精密度实验第25页
     ·HK 活性的测定第25-26页
     ·酶促反应中理化条件的确定第26页
     ·酶促反应动力学方程第26页
     ·RP-HPLC 法与酶偶联法的比较第26页
   ·结果与讨论第26-33页
     ·标样的测定第26-28页
       ·ATP、ADP 色谱图第26-27页
       ·ADP 标准曲线第27-28页
       ·检测方法的精密度第28页
     ·理化条件对酶促反应的影响第28-30页
       ·温度对酶促反应的影响第28-29页
       ·pH 对酶促反应的影响第29页
       ·反应时间对酶促反应的影响第29-30页
       ·HK 酶量与酶活的关系第30页
     ·HK 酶促反应动力学方程第30-31页
     ·RP-HPLC 法与酶偶联法的比较第31-33页
   ·小结第33-34页
第三章 绛红色小单孢菌中己糖激酶活性的研究第34-48页
   ·引言第34页
   ·材料第34-36页
     ·菌种第34页
     ·仪器设备第34-35页
     ·试剂与药品第35页
     ·常用溶液与缓冲液第35页
     ·培养基第35-36页
   ·实验方法第36-38页
     ·绛红色小单孢菌的培养第36页
     ·绛红色小单孢菌菌悬液的制备第36页
     ·绛红色小单孢菌中 HK 粗酶液的制备第36页
     ·蛋白质含量的测定第36-37页
       ·Folin-酚法测定蛋白含量的原理第36页
       ·Folin-酚法测定蛋白含量的步骤第36-37页
     ·绛红色小单孢菌中 HK 活性的测定第37-38页
       ·HK 活性测定原理第37页
       ·色谱条件第37页
       ·HK 活性的测定步骤第37-38页
       ·绛红色小单孢菌中 HK 酶活力单位的定义第38页
   ·结果与讨论第38-46页
     ·蛋白质标准曲线的测定第38页
     ·菌体细胞破碎条件的确定第38-39页
     ·最适盐析条件的确定第39-40页
     ·HK 酶促反应最适温度的确定第40-41页
     ·HK 酶促反应最适 pH 的确定第41页
     ·HK 回收率的测定第41-42页
     ·添加氨基酸对绛红色小单孢菌细胞中 HK 活性的影响第42-46页
       ·单独添加 Lys 对 HK 酶活性的影响第42-43页
       ·单独添加 Arg 对 HK 酶活性的影响第43页
       ·单独添加 Met 对 HK 酶活性的影响第43-44页
       ·同时添加三种氨基酸对 HK 活性的影响第44-46页
   ·小结第46-48页
第四章 绛红色小单孢菌中磷酸果糖激酶活性的研究第48-59页
   ·引言第48页
   ·材料与方法第48-50页
     ·菌种第48页
     ·仪器设备第48页
     ·试剂与药品第48-49页
     ·常见溶液及缓冲液第49页
     ·培养基第49页
     ·绛红色小单孢菌的培养第49页
     ·绛红色小单孢菌菌悬液和粗酶液的制备第49页
     ·蛋白质含量的测定第49页
     ·绛红色小单孢菌中 PFK 活性的测定第49-50页
       ·色谱条件第49页
       ·PFK 活性的测定步骤第49-50页
       ·绛红色小单孢菌中 PFK 酶活力单位的定义第50页
   ·结果与讨论第50-57页
     ·菌体细胞破碎条件的确定第50页
     ·最适盐析条件的确定第50-51页
     ·PFK 酶促反应最适温度的确定第51-52页
     ·PFK 酶促反应最适 pH 的确定第52-53页
     ·PFK 回收率实验第53页
     ·添加氨基酸对绛红色小单孢菌中 PFK 酶活性的影响第53-57页
       ·单独添加 Lys 对 PFK 酶活性的影响第53-54页
       ·单独添加 Arg 对 PFK 酶活性的影响第54-55页
       ·单独添加 Met 对 PFK 酶活性的影响第55页
       ·同时添加三种氨基酸对 PFK 酶活性的影响第55-57页
   ·小结第57-59页
第五章 氨基酸对绛红色小单孢菌细胞膜的影响第59-65页
   ·引言第59页
   ·材料与方法第59-60页
     ·菌种第59页
     ·主要仪器设备第59-60页
     ·主要试剂与药品第60页
     ·常用溶液与缓冲液第60页
     ·培养基第60页
   ·实验方法第60-61页
     ·绛红色小单孢菌斜面培养第60页
     ·绛红色小单孢菌种子培养第60页
     ·绛红色小单孢菌发酵培养第60-61页
     ·收获第61页
     ·庆大霉素效价的测定第61页
   ·结果与讨论第61-64页
     ·庆大霉素标准曲线的制定第61-62页
     ·氨基酸对庆大霉素分泌的影响第62-64页
       ·氨基酸对庆大霉素分泌的影响第62-63页
       ·部分去除细胞壁后氨基酸对庆大霉素分泌的影响第63-64页
   ·小结第64-65页
结论与展望第65-67页
 结论第65-66页
 展望第66-67页
参考文献第67-74页
致谢第74-75页
个人简历第75页

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