| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第一部分 文献综述与研究背景 | 第12-26页 |
| ·前言 | 第12-13页 |
| ·微囊藻毒素的产生 | 第13-14页 |
| ·环境因子 | 第13页 |
| ·遗传差异 | 第13-14页 |
| ·微囊藻毒素的种类 | 第14-15页 |
| ·肝毒素(Hapatotoxins) | 第14-15页 |
| ·细胞毒素 | 第15页 |
| ·神经毒素 | 第15页 |
| ·微囊藻毒素的结构 | 第15-16页 |
| ·微囊藻毒素对生物体的影响 | 第16-17页 |
| ·微囊藻毒素的检测方法 | 第17-22页 |
| ·生物学方法 | 第17-18页 |
| ·生化免疫技术法 | 第18-20页 |
| ·化学仪器分析法 | 第20-22页 |
| ·微囊藻产毒基因的检测方法 | 第22-25页 |
| ·MCs产毒基因结构 | 第22-23页 |
| ·多聚酶链式反应检测法 | 第23-24页 |
| ·实时定量PCR检测法 | 第24-25页 |
| ·研究目的与意义 | 第25-26页 |
| 第二部分 实验部分 | 第26-65页 |
| 1 材料和仪器 | 第26-30页 |
| ·实验菌株及标准品 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要工具酶及试剂盒 | 第26页 |
| ·主要溶液及培养基的配制 | 第26-29页 |
| ·仪器设备 | 第29-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-41页 |
| ·藻株的培养及镜检计数 | 第30页 |
| ·藻株藻细胞的收集 | 第30页 |
| ·未知水样的预处理 | 第30页 |
| ·全细胞PCR | 第30-32页 |
| ·PCR引物的设计与合成 | 第30-31页 |
| ·PCR扩增反应 | 第31-32页 |
| ·全细胞PCR检测方法的灵敏度 | 第32页 |
| ·水库水样全细胞PCR检测 | 第32页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第32-39页 |
| ·重组质粒的构建 | 第32-36页 |
| ·阳性菌落的PCR鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的抽提及双酶切 | 第37-38页 |
| ·标准品的制备 | 第38页 |
| ·SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR条件的建立 | 第38-39页 |
| ·已知藻株及水库水样产毒基因的检测 | 第39页 |
| ·高效液相色谱法HPLC | 第39-41页 |
| ·藻液的预处理 | 第39-40页 |
| ·上海淀山湖水库水样的预处理 | 第40页 |
| ·C_(18)固相萃取小柱的预活化 | 第40页 |
| ·微囊藻毒素的富集和洗脱 | 第40页 |
| ·定容 | 第40页 |
| ·毒素分析 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-63页 |
| ·藻株的培养及镜检 | 第41页 |
| ·全细胞PCR扩增结果与分析 | 第41-44页 |
| ·PCR扩增结果 | 第42页 |
| ·检测灵敏度 | 第42-44页 |
| ·实时荧光定量PCR结果与分析 | 第44-58页 |
| ·标准重组质粒构建结果 | 第44-50页 |
| ·实时荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第50-57页 |
| ·已知藻株的实时荧光定量PCR检测结果 | 第57-58页 |
| ·HPLC实验结果与分析 | 第58-60页 |
| ·标准曲线的建立 | 第59-60页 |
| ·已知藻株的HPLC检测结果 | 第60页 |
| ·水库水样的检测结果 | 第60-63页 |
| ·水库水样的全细胞PCR检测 | 第60-61页 |
| ·水库水样的荧光定量PCR检测 | 第61-62页 |
| ·水库水样的HPLC检测结果 | 第62-63页 |
| 4 总结与展望 | 第63-65页 |
| ·结论 | 第63-64页 |
| ·展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读学位期间发表的论文情况及专利申请 | 第72页 |