| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-6页 |
| 缩略语表 | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-20页 |
| 1 支原体与滑液支原体 | 第9-12页 |
| ·支原体 | 第9页 |
| ·滑液支原体 | 第9-12页 |
| 2 烯醇化酶概述 | 第12-20页 |
| ·糖酵解及烯醇化酶 | 第12-14页 |
| ·烯醇化酶的分类及分布 | 第14-15页 |
| ·烯醇化酶的结构 | 第15页 |
| ·烯醇化酶的功能 | 第15-18页 |
| ·滑液支原体烯醇化酶 | 第18-20页 |
| 第二章 滑液支原体烯醇化酶基因的克隆、表达、蛋白纯化及多抗的制备 | 第20-29页 |
| 1 材料 | 第20-25页 |
| ·菌种、载体、抗体及及动物 | 第20页 |
| ·仪器 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20-22页 |
| ·enolase 基因组的提取 | 第22页 |
| ·enolase 基因的克隆和重组载体的构建 | 第22-24页 |
| ·enolase 基因的原核表达和蛋白纯化 | 第24页 |
| ·鼠抗 His-Eno 多抗的制备及其免疫原性分析 | 第24-25页 |
| 2 结果 | 第25-27页 |
| ·enolase 基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·His-Eno 表达及蛋白的纯化 | 第26页 |
| ·抗原和抗体滴度的确定 | 第26-27页 |
| ·His-Eno 多抗的鉴定 | 第27页 |
| 3 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 滑液支原体烯醇化酶活性测定 | 第29-35页 |
| 1 材料和方法 | 第29-31页 |
| ·仪器 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-31页 |
| 2 结果 | 第31-33页 |
| ·His-Eno 的比活力测定 | 第31-32页 |
| ·最适 pH 和最适温度的测定 | 第32页 |
| ·不同金属离子对 His-Eno 活性的影响 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-35页 |
| 第四章 滑液支原体烯醇化酶亚细胞定位及其生物学功能的研究 | 第35-45页 |
| 1 材料与方法 | 第36-40页 |
| ·菌种、抗原、抗体及细胞株 | 第36页 |
| ·仪器 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36-37页 |
| ·滑液支原体膜蛋白的提取 | 第37页 |
| ·膜蛋白的 western blotting | 第37-38页 |
| ·免疫胶体金电镜对 Enolase 的定位研究 | 第38页 |
| ·MS WUV 1853 的粘附 DF1 细胞的间接免疫荧光 | 第38-39页 |
| ·His-Eno 与 ChPlg 和 HuFln 结合实验 | 第39页 |
| ·His-Eno 抗血清的体外杀菌实验 | 第39-40页 |
| ·粘附及其粘附抑制实验 | 第40页 |
| 2 结果 | 第40-43页 |
| ·免疫印迹法分析 Enolase 的分布 | 第40-41页 |
| ·免疫胶体金电镜对 Enolase 的定位 | 第41页 |
| ·His-Eno 与鸡的血纤溶酶原(ChPlg)和人的纤连蛋白(HuFln)的结合活性 | 第41-42页 |
| ·MS 粘附 DF1 细胞的 IFA | 第42页 |
| ·His-Eno 多抗血清的体外杀菌实验 | 第42-43页 |
| ·His-Eno 抗血清的粘附抑制实验 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52-53页 |
| 导师简介 | 第53-54页 |
