产脂肪酶微生物的筛选及其在多糖水解中的应用
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-25页 |
| ·脂肪酶简介 | 第12-15页 |
| ·脂肪酶的研究历史 | 第12-13页 |
| ·脂肪酶的来源 | 第13页 |
| ·脂肪酶的催化特性 | 第13-14页 |
| ·脂肪酶的结构特征 | 第14-15页 |
| ·脂肪酶的纯化 | 第15-17页 |
| ·脂肪酶的应用 | 第17-19页 |
| ·在油脂加工中的应用 | 第18页 |
| ·在乳品工业中的应用 | 第18页 |
| ·在生物柴油合成中的应用 | 第18页 |
| ·在手性化合物合成中的应用 | 第18-19页 |
| ·几丁质/壳聚糖的简介及降解 | 第19-22页 |
| ·几丁质/壳聚糖的简介 | 第19-20页 |
| ·几丁质/聚糖的降解 | 第20-22页 |
| ·论文研究背景、意义及方法 | 第22-25页 |
| ·论文研究背景及意义 | 第22-24页 |
| ·研究内容及技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 产脂肪酶微生物的筛选及菌种鉴定 | 第25-33页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·土样采集 | 第25页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-29页 |
| ·富集培养 | 第27页 |
| ·初筛培养 | 第27页 |
| ·复筛培养 | 第27页 |
| ·菌种鉴定 | 第27-28页 |
| ·脂肪酶活性测定 | 第28-29页 |
| ·结果与讨论 | 第29-31页 |
| ·筛选结果 | 第29-30页 |
| ·菌种鉴定 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-33页 |
| 第三章 产脂肪酶微生物的发酵优化 | 第33-42页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-35页 |
| ·菌种活化和种子培养 | 第34页 |
| ·响应面优化 | 第34-35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-41页 |
| ·最适碳源的筛选 | 第35页 |
| ·最适氮源的筛选 | 第35-36页 |
| ·Plackeet-Burman实验 | 第36-37页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第37-38页 |
| ·响应面分析试验设计 | 第38-40页 |
| ·验证试验 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第四章 脂肪酶的纯化及酶学特性研究 | 第42-51页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-47页 |
| ·发酵液离心 | 第43页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第43页 |
| ·透析 | 第43页 |
| ·浓缩粗酶液 | 第43-44页 |
| ·正己烷萃取 | 第44页 |
| ·DEAE-Sepharose阴离子交换层析 | 第44-45页 |
| ·透析 | 第45页 |
| ·冷冻干燥 | 第45页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第45-46页 |
| ·米氏常数的测定 | 第46页 |
| ·酶活测定 | 第46-47页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第47页 |
| ·对硝基苯酚标准曲线 | 第47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-50页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第47-48页 |
| ·DEAE-Sepharose阴离子交换层析 | 第48页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第48-49页 |
| ·纯化结果分析 | 第49-50页 |
| ·米氏常数的测定 | 第50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第五章 脂肪酶对几丁质的水解研究 | 第51-59页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·脂肪酶 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·方法 | 第52-54页 |
| ·不同脂肪酶对酶促反应的影响 | 第52页 |
| ·酶加量对酶促反应的影响 | 第52页 |
| ·底物浓度对酶促反应的影响 | 第52页 |
| ·反应温度对酶促反应的影响 | 第52页 |
| ·pH对酶促反应的影响 | 第52-53页 |
| ·反应时间对转化率的影响 | 第53页 |
| ·反应体系 | 第53页 |
| ·胶体几丁质制备 | 第53页 |
| ·DNS配制 | 第53页 |
| ·脂肪酶水解几丁质酶活测定 | 第53-54页 |
| ·乙酰氨基葡萄糖标准曲线 | 第54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-58页 |
| ·不同脂肪酶对酶促反应的影响 | 第55页 |
| ·酶加量对酶促反应的影响 | 第55页 |
| ·底物浓度对酶促反应的影响 | 第55-56页 |
| ·温度对酶促反应的影响 | 第56页 |
| ·pH对酶促反应的影响 | 第56-57页 |
| ·反应时间对转化率的影响 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第六章 结论与展望 | 第59-61页 |
| ·主要结论 | 第59页 |
| ·展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第68页 |
