| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一篇 可变剪切因子hnRNP-L的结构及与RNA结合特性的研究 | 第12-76页 |
| 第1章 综述 | 第12-30页 |
| ·前体mRNA的剪切 | 第12-13页 |
| ·可变剪切概述 | 第13-27页 |
| ·可变剪切的方式 | 第14-15页 |
| ·可变剪切的调控 | 第15-23页 |
| ·可变剪切的作用 | 第23-24页 |
| ·可变剪切因子hnRNPs | 第24-27页 |
| ·HnRNP L蛋白研究现状 | 第27-30页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第30-36页 |
| ·质粒构建,蛋白表达和纯化 | 第30-31页 |
| ·基因克隆和质粒构建 | 第30-31页 |
| ·感受态细胞制备 | 第31页 |
| ·质粒转化 | 第31页 |
| ·质粒鉴定 | 第31页 |
| ·突变体的构建 | 第31页 |
| ·HnRNP-L各部分蛋白的表达和纯化 | 第31-32页 |
| ·蛋白的表达 | 第31-32页 |
| ·蛋白的纯化 | 第32页 |
| ·HnRNP L RRM1和RRM34的晶体生长和衍射数据收集 | 第32-33页 |
| ·模型构建和结构修正 | 第33-34页 |
| ·凝胶迁移阻滞实验(EMSA) | 第34页 |
| ·表面等离子共振实验(SPR) | 第34页 |
| ·稳态FRET实验 | 第34-35页 |
| ·等温滴定微量热实验(ITC) | 第35页 |
| ·Cross-link实验 | 第35页 |
| ·动态光散射实验(DLS) | 第35-36页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第36-64页 |
| ·HnRNP L各部分结合RNA的能力 | 第36-37页 |
| ·HnRNP L RRM1和hnRNP L RRM34的结构解析 | 第37-41页 |
| ·HnRNP L RRM1的结构 | 第41-42页 |
| ·HnRNP L RRMN1的RNA结合面 | 第42-45页 |
| ·HnRNP L RRM34的结构 | 第45-47页 |
| ·HnRNP L RRM34和PTB RRM34的结构比较 | 第47-49页 |
| ·HnRNP L RRM34的RNA结合面 | 第49-53页 |
| ·HnRNP L RRM34诱导RNA成环 | 第53-60页 |
| ·讨论 | 第60-64页 |
| 本篇小结 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 第二篇 组蛋白伴侣SSRP1的结构与功能研究 | 第76-122页 |
| 第1章 转录延伸因子及组蛋白伴侣FACT复合物的研究进展 | 第76-90页 |
| ·转录延伸因子概述 | 第76-78页 |
| ·ATP依赖的染色质重塑子 | 第76-77页 |
| ·组蛋白伴侣 | 第77-78页 |
| ·组蛋白共价修饰 | 第78页 |
| ·组蛋白伴侣FACT的研究进展 | 第78-90页 |
| ·FACT复合物的功能 | 第78-81页 |
| ·FACT复合物的招募方式 | 第81-83页 |
| ·FACT复合物的作用模型 | 第83-85页 |
| ·FACT复合物的组成和结构 | 第85-90页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第90-94页 |
| ·基因的克隆、质粒构建和蛋白表达 | 第90页 |
| ·SSRP1蛋白的纯化 | 第90-91页 |
| ·SSRP1-M蛋白的晶体生长和衍射数据收集 | 第91页 |
| ·模型构建和结构修正 | 第91-92页 |
| ·凝胶迁移阻滞实验(EMSA) | 第92页 |
| ·荧光偏振实验(FPA) | 第92页 |
| ·圆二色谱(CD)实验 | 第92-93页 |
| ·SSRP1蛋白与组蛋白的结合实验 | 第93-94页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第94-114页 |
| ·SSRP1蛋白的表达、纯化与晶体生长 | 第94-95页 |
| ·SSRP1-M蛋白的结构解析 | 第95-98页 |
| ·SSRP1-M蛋白的整体结构 | 第98-102页 |
| ·SSRP1-M蛋白与Pob3-M和Rtt106-M的结构比较 | 第102-103页 |
| ·SSRP1-M与DNA的相互作用 | 第103-107页 |
| ·SSRP1-M对于SSRP1-C的DNA结合性质的影响 | 第107-109页 |
| ·SSRP1-M与组蛋白的结合实验 | 第109-111页 |
| ·讨论 | 第111-112页 |
| ·展望 | 第112-114页 |
| 本篇小结 | 第114-116页 |
| 参考文献 | 第116-122页 |
| 致谢 | 第122-124页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第124页 |
