| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-29页 |
| ·细胞自噬研究进展 | 第17-21页 |
| ·细胞自噬概述 | 第17页 |
| ·细胞自噬的分类 | 第17-18页 |
| ·细胞自噬发生的过程 | 第18-19页 |
| ·细胞自噬的信号转导调控 | 第19-21页 |
| ·细胞自噬与病毒感染研究进展 | 第21-28页 |
| ·病毒对自噬通路的调控 | 第21-23页 |
| ·自噬的抗病毒机制 | 第23-26页 |
| ·自噬促进病毒复制 | 第26-27页 |
| ·病毒与自噬研究展望 | 第27-28页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 第二章 新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞诱导自噬稳态的发生 | 第29-45页 |
| 摘要 | 第29-30页 |
| ·材料和方法 | 第30-34页 |
| ·病毒 | 第30页 |
| ·实验细胞 | 第30页 |
| ·抗体和质粒 | 第30-31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·主要缓冲液及试剂配制 | 第31-32页 |
| ·透射电镜观察自噬体 | 第32页 |
| ·GFP-LC3 转染细胞检测自噬体形成 | 第32-33页 |
| ·Western-blot 检测 LC3 的转化 | 第33页 |
| ·紫外灭活 NDV 诱导自噬变化情况 | 第33-34页 |
| ·NDV 感染诱导自噬通路确定 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-43页 |
| ·透射电镜观察自噬体 | 第34-36页 |
| ·GFP-LC3 转染细胞检测自噬体形成 | 第36-38页 |
| ·Western-blot 检测 LC3 的转化 | 第38-42页 |
| ·紫外灭活病毒后 Western-blot 检测 LC3 的转化 | 第42页 |
| ·NDV 感染诱导自噬通路确定 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞诱导自噬流的发生 | 第45-58页 |
| 摘要 | 第45-46页 |
| ·材料和方法 | 第46-49页 |
| ·病毒 | 第46页 |
| ·实验细胞 | 第46页 |
| ·抗体和质粒 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·主要缓冲液及试剂配制 | 第47页 |
| ·Western-blot 检测 p62 降解 | 第47-48页 |
| ·LC3-II turnover 实验 | 第48页 |
| ·间接免疫荧光观察 GFP-LC3 和 LAMP1 共定位 | 第48-49页 |
| ·ptf-LC3 转染细胞检测自噬流 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-56页 |
| ·Western-blot 检测 p62 降解 | 第49-52页 |
| ·LC3-II turnover 实验 | 第52-54页 |
| ·间接免疫荧光观察 GFP-LC3 和 LAMP1 共定位 | 第54-55页 |
| ·ptf-LC3 转染细胞检测自噬流 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 自噬阻断对新城疫病毒复制的影响 | 第58-71页 |
| 摘要 | 第58-59页 |
| ·材料和方法 | 第59-61页 |
| ·病毒 | 第59页 |
| ·实验细胞 | 第59页 |
| ·抗体和干扰 RNA | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59页 |
| ·主要仪器 | 第59-60页 |
| ·主要缓冲液及试剂配制 | 第60页 |
| ·WST-1 实验检测药物对细胞活性的影响 | 第60页 |
| ·药物处理实验 | 第60-61页 |
| ·Beclin 1 的干扰对 NDV 复制的影响 | 第61页 |
| ·Atg5 的敲除对 NDV 复制的影响 | 第61页 |
| ·结果 | 第61-69页 |
| ·WST-1 实验检测药物对细胞活性的影响 | 第61-62页 |
| ·渥曼青霉素处理对 NDV 复制的影响 | 第62-63页 |
| ·氯喹处理对 NDV 复制的影响 | 第63-64页 |
| ·雷帕霉素处理对 NDV 复制的影响 | 第64-65页 |
| ·Beclin 1 的干扰对 NDV 复制的影响 | 第65-66页 |
| ·Atg5 的敲除对 NDV 复制的影响 | 第66-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| 第五章 新城疫病毒结构蛋白与自噬相关蛋白互作 | 第71-84页 |
| 摘要 | 第71-72页 |
| ·材料和方法 | 第72-77页 |
| ·病毒 | 第72页 |
| ·实验细胞 | 第72页 |
| ·抗体和质粒 | 第72页 |
| ·主要试剂 | 第72-73页 |
| ·主要仪器 | 第73页 |
| ·主要缓冲液及试剂配制 | 第73页 |
| ·DsRed-NP, P, M 和 Flag-NP, P, M 重组质粒构建 | 第73-75页 |
| ·DsRed-NP, P, M 在细胞中的表达及亚细胞定位检测 | 第75页 |
| ·Flag14-NP, P, M 在细胞中的表达及 Western-blot 检测 | 第75页 |
| ·病毒蛋白与自噬相关蛋白免疫共沉淀 | 第75-76页 |
| ·病毒蛋白与自噬相关蛋白免疫亚细胞共定位检测 | 第76-77页 |
| ·结果 | 第77-82页 |
| ·DsRed-NP, P, M；Flag-NP, P, M 重组质粒构建 | 第77页 |
| ·DsRed-NP, P, M 在细胞中的表达及亚细胞定位检测 | 第77-79页 |
| ·Flag-NP, P, M 在细胞中的表达及 Western-blot 检测 | 第79页 |
| ·病毒蛋白与 Beclin 1 蛋白免疫共沉淀 | 第79-80页 |
| ·病毒蛋白与 Beclin 1 蛋白亚细胞共定位检测 | 第80页 |
| ·病毒蛋白与 LC3B 蛋白免疫共沉淀 | 第80-81页 |
| ·病毒蛋白与 LC3B 蛋白亚细胞共定位检测 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-84页 |
| 第六章 调控自噬影响新城疫病毒在 SPF 鸡体内的复制 | 第84-96页 |
| 摘要 | 第84页 |
| ·材料和方法 | 第84-87页 |
| ·病毒 | 第84-85页 |
| ·实验动物及鸡胚 | 第85页 |
| ·抗体 | 第85页 |
| ·主要试剂 | 第85页 |
| ·主要仪器 | 第85页 |
| ·主要缓冲液及试剂配制 | 第85页 |
| ·NDV 感染 1 周龄 SPF 鸡后自噬水平检测 | 第85-86页 |
| ·病理组织石蜡切片 | 第86-87页 |
| ·组织中病毒 ELD50测定 | 第87页 |
| ·自噬药物处理 SPF 鸡后存活曲线测定 | 第87页 |
| ·结果 | 第87-94页 |
| ·NDV 感染 1 周龄 SPF 鸡后自噬水平检测 | 第87-89页 |
| ·自噬调控对 NDV 感染引起肺组织病变的影响 | 第89-90页 |
| ·自噬调控对 NDV 感染 SPF 鸡肺中病毒载量的影响 | 第90-91页 |
| ·自噬调控对 NDV 感染引起肠组织病变的影响 | 第91-92页 |
| ·自噬调控对 NDV 感染 SPF 鸡肺中病毒载量的影响 | 第92-93页 |
| ·自噬药物处理 SPF 鸡后存活曲线测定 | 第93-94页 |
| ·讨论 | 第94-96页 |
| 第七章 全文结论 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 作者简介 | 第105页 |
