| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 缩写词 | 第7-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| ·叶绿体发育研究进展 | 第12-17页 |
| ·叶绿体发育基因表达调控网络 | 第13-16页 |
| ·环境因子调控叶绿体发育 | 第16-17页 |
| ·叶绿素(Chlorophyll, Chl) | 第17-20页 |
| ·Chl 的生物合成 | 第17-19页 |
| ·Chl 的分解代谢 | 第19-20页 |
| ·光系统Ⅱ (PSⅡ) | 第20-21页 |
| ·PSⅡ结构和功能 | 第20页 |
| ·PSⅡ的组装 | 第20-21页 |
| ·叶绿素荧光在叶绿体发育研究中的运用 | 第21-24页 |
| ·叶绿素荧光动力学参数 | 第21-22页 |
| ·叶绿素荧光动力学参数生物学意义 | 第22页 |
| ·叶绿素荧光在实践中的应用 | 第22-24页 |
| 2 立题依据 | 第24-26页 |
| 3 材料与方法 | 第26-40页 |
| ·常用仪器 | 第26页 |
| ·实验材料、载体和菌株 | 第26-27页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·质粒载体与菌株 | 第27页 |
| ·实验药品和试剂 | 第27页 |
| ·常用培养基及溶液的配制 | 第27-30页 |
| ·常用培养基的配制 | 第27-28页 |
| ·常用溶液的配制 | 第28页 |
| ·蛋白表达溶液 | 第28-29页 |
| ·拟南芥叶肉细胞原生质体瞬时表达溶液 | 第29页 |
| ·常用抗生素的配制 | 第29页 |
| ·蛋白质提取液的配制 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-40页 |
| ·拟南芥的栽培 | 第30页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第30页 |
| ·电导率的测定 | 第30-31页 |
| ·拟南芥基因组 DNA 的提取 | 第31页 |
| ·拟南芥的杂交 | 第31页 |
| ·图位克隆 | 第31-33页 |
| ·Trizol 法提取拟南芥总 RNA | 第33-34页 |
| ·琼脂糖凝胶回收 DNA | 第34-35页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| ·质粒 DNA 转化大肠杆菌感受态细胞 | 第36页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第36页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| ·重组质粒 DNA 转化农杆菌感受态细胞 | 第37页 |
| ·PEG 介导拟南芥叶肉细胞原生质体瞬时表达方法 | 第37页 |
| ·共聚焦显微镜观察 GFP 与叶绿体自发荧光共定位 | 第37页 |
| ·蛋白原核表达与小量提取与鉴定 | 第37-38页 |
| ·植物蛋白的提取和电泳检测 | 第38页 |
| ·载体构建 | 第38-40页 |
| 4 结果与分析 | 第40-58页 |
| ·突变体的获得 | 第40页 |
| ·突变体 cfl1 的发育表型 | 第40-45页 |
| ·突变体 cfl1 与野生型 Col-0 中叶绿素含量的测定 | 第41-42页 |
| ·突变体 cfl1 与野生型 Col-0 中电导率的测定 | 第42-43页 |
| ·叶绿体显微结构切片分析 | 第43页 |
| ·参与叶绿体合成的相关基因的表达分析 | 第43-44页 |
| ·cfl1 植株的萌发实验 | 第44-45页 |
| ·突变体的遗传学分析 | 第45页 |
| ·突变体的图位克隆 | 第45-50页 |
| ·图位克隆材料的获得 | 第45-46页 |
| ·突变基因粗定位结果 | 第46-47页 |
| ·突变基因细定位结果 | 第47-48页 |
| ·突变基因测序结果 | 第48页 |
| ·突变基因半定量表达分析 | 第48-49页 |
| ·Salk line 突变体表型分析 | 第49-50页 |
| ·回补载体的构建及回补植株的筛选 | 第50-52页 |
| ·回补载体 CFL1::pCAMBIA1300 的构建 | 第50-51页 |
| ·农杆菌浸染法转化拟南芥 | 第51页 |
| ·回补植株的筛选 | 第51-52页 |
| ·CFL1::p-super1300+超表达载体的构建 | 第52-53页 |
| ·Salk line 植株的萌发实验 | 第53-54页 |
| ·CFL1::GFP 载体的构建 | 第54-56页 |
| ·CFL1::pHBT-GFP-NOS 载体的构建及原生质体转化 | 第54-55页 |
| ·CFL1::pEGAD-GFP 稳定表达载体的构建 | 第55-56页 |
| ·pCFL1::pCAMBIA1381-GUS 载体的构建 | 第56页 |
| ·CFL1 蛋白原核表达载体的构建 | 第56-58页 |
| 讨论 | 第58-62页 |
| 结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 附录：载体图谱 | 第74-82页 |
