| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 英文缩写词表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-23页 |
| 第一章 细菌耐药性的研究进展 | 第13-19页 |
| 1 耐药性细菌产生的主要原因 | 第13-14页 |
| ·天然耐药性 | 第13页 |
| ·获得耐药性 | 第13-14页 |
| 2 细菌耐药性产生的机制 | 第14-16页 |
| ·细菌耐药产生的生化机理 | 第14-15页 |
| ·细菌产生破坏抗生素结构的酶 | 第14页 |
| ·靶位的改变 | 第14页 |
| ·主动外排系统 | 第14-15页 |
| ·细菌细胞膜通透性的改变 | 第15页 |
| ·细菌生物被膜的形成 | 第15页 |
| ·细菌耐药产生的遗传机理 | 第15-16页 |
| ·自身性基因突变 | 第16页 |
| ·获得外源基因 | 第16页 |
| 3 细菌耐药性的防治措施 | 第16-19页 |
| ·寻找耐药性抑制剂 | 第16-18页 |
| ·灭活酶抑制剂开发 | 第16页 |
| ·噬菌体制剂的研究 | 第16页 |
| ·外排泵抑制剂的开发 | 第16-17页 |
| ·细菌生物被膜抑制剂 | 第17页 |
| ·细菌外膜通透性抑制剂 | 第17页 |
| ·耐药质粒消除剂 | 第17页 |
| ·细菌群体感应抑制剂 | 第17-18页 |
| ·中药耐药抑制剂开发 | 第18页 |
| ·研制抗细菌耐药的非抗生素药物 | 第18-19页 |
| ·抗菌肽 | 第18页 |
| ·调节肠道正常菌群制剂 | 第18页 |
| ·新型的基因工程药物 | 第18页 |
| ·特异性疫苗的研制 | 第18-19页 |
| ·蛋白类特别是酶类抗菌药物 | 第19页 |
| 第二章 中药逆转细菌耐药机制的研究进展 | 第19-23页 |
| 1 中药的抗菌作用及机制 | 第19-20页 |
| ·中药的选择 | 第19页 |
| ·中药的抑菌成分 | 第19页 |
| ·中药成分抗菌机制 | 第19页 |
| ·中药抗菌作用 | 第19-20页 |
| 2 中药逆转细菌耐药机制及实验研究 | 第20-21页 |
| ·中药抑制β-内酰胺酶 | 第20页 |
| ·中药消除R质粒 | 第20-21页 |
| ·中药抑制细菌主动外排泵 | 第21页 |
| ·中药抑制细菌生物膜的形成 | 第21页 |
| ·中药对耐药基因的突变作用 | 第21页 |
| 3 中药逆转存在的问题 | 第21-22页 |
| 4 展望 | 第22-23页 |
| 第二部分 试验部分 | 第23-55页 |
| 试验一 产ESBLs大肠埃希菌中药单体抗菌增效剂的筛选 | 第23-33页 |
| 1 材料与方法 | 第23-28页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·样品来源 | 第23页 |
| ·标准菌株 | 第23页 |
| ·药物 | 第23-24页 |
| ·培养基及其他试剂 | 第24页 |
| ·PCR引物 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-28页 |
| ·抗生素药物母液配制 | 第24-25页 |
| ·中药单体化合物的溶解和稀释 | 第25页 |
| ·细菌的复苏 | 第25页 |
| ·验证产ESBLs菌株 | 第25-26页 |
| ·二倍微孔稀释法测最小抑菌浓度(MICs) | 第26-27页 |
| ·筛选联合β-内酰胺类抗生素对产ESBLs大肠埃希菌有增敏作用的中药单体 | 第27-28页 |
| 2 结果 | 第28-30页 |
| ·12株产ESBLs大肠埃希菌耐药基因电泳图 | 第28-29页 |
| ·5种β-内酰胺类抗生素对ESBLs的抗菌作用 | 第29-30页 |
| ·筛选对产ESBLs大肠埃希菌有增敏作用的单体 | 第30页 |
| 3 讨论 | 第30-32页 |
| ·产ESBLs菌株及其耐药机制 | 第30-31页 |
| ·中药单体抗菌增敏剂的筛选 | 第31-32页 |
| 4 结论 | 第32-33页 |
| 试验二 黄藤素、没食子酸体外单独及联合抗菌作用 | 第33-42页 |
| 1 材料与方法 | 第33-34页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·样本来源 | 第33页 |
| ·培养基、药物及其他试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-34页 |
| ·黄藤素、没食子酸对大肠埃希菌的抗菌增敏作用 | 第33-34页 |
| ·单体与1/2MIC浓度的抗菌药物联合应用对细菌动态生长的影响 | 第34页 |
| 2 结果 | 第34-39页 |
| ·黄藤素、没食子酸对大肠埃希菌的抗菌作用 | 第34页 |
| ·棋盘法联合药敏试验结果 | 第34-36页 |
| ·黄藤素增敏β-内酰胺类抗生素的抗菌作用 | 第34-35页 |
| ·没食子酸增敏β-内酰胺类抗生素的抗菌作用 | 第35-36页 |
| ·黄藤素、没食子酸与1/2MIC浓度的抗菌药物联合应用对细菌生长的影响 | 第36-39页 |
| ·256μg/mL黄藤素与1/2MIC浓度的抗菌药物联合应用对细菌1J动态生长的影响 | 第36-37页 |
| ·256μg/mL黄藤素与1/2MIC浓度的抗菌药物联合应用对细菌3J动态生长的影响 | 第37-38页 |
| ·256μg/mL没食子酸与1/2MIC浓度的抗菌药物联合应用对细菌4J动态生长的影响 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| ·中药对耐药菌的抑菌作用 | 第39-40页 |
| ·中药的抑菌作用 | 第39-40页 |
| ·中药与西药协同抗菌作用 | 第40页 |
| ·黄藤素、没食子酸与β-内酰胺类抗生素联合抑菌试验 | 第40-41页 |
| 4 结论 | 第41-42页 |
| 试验三 黄藤素、没食子酸对ESBLs中超广谱β-内酰胺酶的影响 | 第42-55页 |
| 1 材料与方法 | 第42-45页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·菌株来源及其试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·常用溶液配制 | 第42页 |
| ·引物合成 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| ·256μg/mL黄藤素联合128μg/mL头孢噻肟对大肠埃希1J bla_(CTX-M-1G)的mRNA表达水平的影响 | 第43-45页 |
| ·统计学分析 | 第45页 |
| 2 实验结果 | 第45-52页 |
| ·荧光定量PCR引物的鉴定及引物退火温度 | 第45页 |
| ·bla_(CTX-M-1G)、bla_(CTX-M-9G)、gapA基因定量PCR的特异性 | 第45-52页 |
| ·扩增动力学曲线图 | 第45-46页 |
| ·溶解曲线特异性分析 | 第46-47页 |
| ·基因bla_(CTX-M-1G)、bla_(CTX-M-9G)表达水平的分析 | 第47-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| ·荧光定量PCR方法概述及中药抗菌增效机制的初步探讨 | 第52-53页 |
| ·中西联合在畜牧业中的优势 | 第53-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
