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微生物絮凝剂HBF-3的剂型研究和vip3Aa基因对淡紫拟青霉的遗传转化

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第10-11页
第一部分 微生物絮凝剂HBF-3的剂型研究第11-28页
 1 前言第11-19页
   ·絮凝剂简述第11-15页
   ·微生物絮凝剂的研究现状第15-16页
   ·絮凝剂的后处理工艺第16-18页
     ·冷冻干燥第16-17页
     ·旋转蒸发浓缩第17页
     ·防腐剂储存第17-18页
   ·本研究的目的和意义第18-19页
 2 材料与方法第19-21页
   ·材料第19页
     ·菌种及培养基第19页
     ·试剂与仪器第19页
   ·实验方法第19-21页
     ·HBF-3絮凝剂的发酵生产第19页
     ·冷冻干燥第19页
     ·旋转蒸发浓缩第19-20页
     ·絮凝剂的絮凝活性测定第20-21页
 3 结果与分析第21-24页
   ·冷冻干燥后成品活性分析第21页
   ·旋转蒸发浓缩对絮凝活性的影响第21-22页
   ·防腐储存第22-24页
 4 讨论第24-25页
 参考文献第25-28页
第二部分 vip3Aa基因对淡紫拟青霉的遗传转化第28-60页
 1 前言第28-35页
   ·作物的线虫及地下害虫的危害及其防治第28-29页
   ·生防真菌淡紫拟青霉第29-32页
     ·淡紫拟青霉对作物线虫病的生物防治第29-30页
     ·淡紫拟青霉菌剂类型的研究第30-31页
     ·淡紫拟青霉菌作用机理研究第31-32页
     ·淡紫拟青霉菌种改良第32页
   ·苏云金芽胞杆菌营养期杀虫蛋白Vip3A第32-34页
     ·Vip3A研究现状第32-33页
     ·Vip3A蛋白作用机理研究第33-34页
   ·本课题的目的和意义第34-35页
 2 材料与方法第35-46页
   ·实验材料第35-39页
     ·菌株与质粒第35-36页
     ·培养基第36-37页
     ·试剂第37页
     ·仪器第37页
     ·溶剂与缓冲溶液第37-39页
   ·实验方法第39-46页
     ·DNA操作第39页
     ·重组质粒的转化第39-40页
     ·根癌农杆菌介导的淡紫拟青霉遗传转化第40-41页
     ·转化子的Southern blot分析第41-43页
     ·蛋白质SDS-PAGE第43-44页
     ·抗体制备第44页
     ·Western blotting第44页
     ·PCR扩增第44-46页
 3 结果与分析第46-57页
   ·vip3Aa基因的克隆、原核表达和纯化第46-48页
     ·原核表达载体pVIP的构建第46-47页
     ·Vip3Aa蛋白的表达纯化第47-48页
   ·真菌表达载体puPVNT的构建第48-53页
     ·重组质粒pPVT的构建第48-50页
     ·重组质粒pPNT2的构建第50-52页
     ·重组质粒puPVNT的构建第52-53页
   ·质粒puPVNT转化农杆菌LB4404第53-54页
   ·农杆菌介导的遗传转化第54页
   ·淡紫拟青霉vip3Aa转化子的PCR检测第54-56页
   ·淡紫拟青霉vip3Aa转化子的Southern-blot分析第56-57页
 4 讨论第57-60页
参考文献第60-65页
致谢第65页

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