| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-23页 |
| ·古菌 | 第10-13页 |
| ·硫化叶菌 | 第13-14页 |
| ·硫化叶菌遗传体系 | 第14-16页 |
| ·Mre11蛋白复合物功能 | 第16-19页 |
| ·蛋白质翻译起始 | 第19-22页 |
| ·研究目的及内容 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-36页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·培养基成分及培养条件 | 第23-25页 |
| ·主要分子生物学试剂和由公司完成的实验 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·实验方法及原理 | 第26-36页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态制备和热击转化法 | 第26-27页 |
| ·硫化叶菌感受态制备和电击转化法 | 第27-28页 |
| ·提取硫化叶菌总DNA | 第28页 |
| ·构建硫化叶菌体内表达载体并表达Mre11 | 第28-31页 |
| ·SDS-PAGE和Western-blot | 第31-32页 |
| ·构建含SD序列突变的重组质粒 | 第32-35页 |
| ·β-galactosidase(LacS)酶活分析 | 第35-36页 |
| ·MALDI-TOF鉴定 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-46页 |
| ·构建硫化叶菌超表达载体 | 第36-37页 |
| ·含有Mre11的硫化叶菌重组质粒 | 第37-38页 |
| ·Mre11蛋白Western印迹检测 | 第38-39页 |
| ·表达并共纯化Mre11结合蛋自 | 第39-40页 |
| ·构建双标签载体表达Mre11蛋白 | 第40-41页 |
| ·构建含有SD突变序列的硫化叶菌重组质粒 | 第41-44页 |
| ·STlacS-pZC2、SDN1lacS-pZC2、SDN2lacS-pZC2、SDN3lacS-pZC #2电转化及菌株酶活测定 | 第44-46页 |
| 4 讨论与展望 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 附表 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |