| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 符号说明 | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-24页 |
| 1. 鼠疫的流行概况 | 第13-14页 |
| 2. 鼠疫菌生物学特性 | 第14-17页 |
| ·鼠疫菌生理生化特性 | 第14-15页 |
| ·鼠疫菌基因组结构 | 第15-16页 |
| ·鼠疫菌毒力决定因子 | 第16-17页 |
| 3. 鼠疫菌与宿主的相互作用 | 第17-18页 |
| 4. 鼠疫菌Ⅲ型分泌系统 | 第18-22页 |
| 5. 鼠疫菌T3SS内蛋白相互作用的研究 | 第22-23页 |
| 6. 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 第一部分 鼠疫菌T3SS三个相关基因功能的研究 | 第24-45页 |
| 1. 实验材料 | 第24-30页 |
| ·菌株、质粒和细胞 | 第24-25页 |
| ·实验所需酶和试剂盒 | 第25页 |
| ·实验所需相关试剂及溶液的配制 | 第25-29页 |
| ·主要仪器 | 第29-30页 |
| 2. 实验方法 | 第30-38页 |
| ·鼠疫菌突变株的构建 | 第30-33页 |
| ·YpCD1.09,YpCD 1.08,YpCD 1.16突变株的低钙响应生长曲线测定 | 第33-34页 |
| ·定量PCR分析(q-PCR) | 第34-35页 |
| ·YopN稳定性的测定 | 第35-36页 |
| ·突变株向细胞内转运效应蛋白的β-内酰胺酶(TEM)报告实验 | 第36-38页 |
| 3. 实验结果与分析 | 第38-43页 |
| ·YpCD1.09,YpCD 1.08,YpCD 1.16突变株的构建 | 第38-39页 |
| ·YpCD1.09,YpCD 1.08,YpCD 1.16突变株的低钙响应生长曲线 | 第39-40页 |
| ·定量PCR分析 | 第40-41页 |
| ·YopN稳定性的分析 | 第41-42页 |
| ·突变株效应蛋白转运效率分析 | 第42-43页 |
| 4. 讨论 | 第43-45页 |
| 第二部分 鼠疫菌YscI和YscF蛋白相互作用的研究 | 第45-62页 |
| 1. 实验材料 | 第45-47页 |
| ·菌株和质粒 | 第45-46页 |
| ·实验主要酶、试剂盒 | 第46页 |
| ·实验所需相关试剂及溶液的配制 | 第46-47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| 2. 实验方法 | 第47-56页 |
| ·pGEX-4T-1-YscI不同截短突变体的构建 | 第47-51页 |
| ·pGEX-4T-1-YscI突变体蛋白的表达与纯化 | 第51-53页 |
| ·pET-32a-YscF蛋白的表达与纯化 | 第53-55页 |
| ·GST-pull down验证YscF与YscI突变体的相互作用 | 第55-56页 |
| 3. 实验结果与分析 | 第56-60页 |
| ·pGEX-4T-1-YscI不同截短突变体和氨基酸突变体的构建 | 第56-57页 |
| ·GST-YscI截短突变体蛋白及GST蛋白的表达与纯化 | 第57-58页 |
| ·His-YscF蛋白的表达与纯化 | 第58-59页 |
| ·GST-pull down验证YscF与YscI截短突变体的相互作用 | 第59-60页 |
| 4. 讨论 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第68页 |
