| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 甘露聚糖的功能和应用前景 | 第11-15页 |
| 1.1.1 甘露聚糖的结构和理化性质 | 第11-12页 |
| 1.1.2 甘露聚糖的功能与应用 | 第12-15页 |
| 1.1.2.1 甘露聚糖的功能 | 第12-13页 |
| 1.1.2.2 甘露聚糖的应用 | 第13-15页 |
| 1.2 甘露聚糖的制备 | 第15-16页 |
| 1.2.1 植物来源的甘露聚糖 | 第15-16页 |
| 1.2.1.1 甘露聚糖的植物来源 | 第15页 |
| 1.2.1.2 植物来源的甘露聚糖提取 | 第15-16页 |
| 1.2.2 微生物来源的甘露聚糖 | 第16页 |
| 1.3 枯草芽孢杆菌作为表达宿主的特性 | 第16-19页 |
| 1.3.1 枯草芽孢杆菌的性质 | 第16-17页 |
| 1.3.2 枯草芽孢杆菌转化方法 | 第17-18页 |
| 1.3.3 枯草芽孢杆菌的工业应用 | 第18-19页 |
| 1.3.3.1 枯草芽孢杆菌在食品工程中的应用 | 第18页 |
| 1.3.3.2 枯草芽孢杆菌在医药中的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 本研究的内容与意义 | 第19-21页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第19页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第19-21页 |
| 2 甘露聚糖合酶的克隆与表达 | 第21-33页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料和方法 | 第21-28页 |
| 2.2.1 菌种与质粒 | 第21-22页 |
| 2.2.2 仪器和试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.3 培养基的配置 | 第23页 |
| 2.2.4 实验方法 | 第23-28页 |
| 2.2.4.1 甘露聚糖合酶基因的合成 | 第23页 |
| 2.2.4.2 表达载体的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.4.3 表达载体的转化与鉴定 | 第25-27页 |
| 2.2.4.4 重组菌株的诱导发酵 | 第27页 |
| 2.2.4.5 甘露聚糖的提取与检测 | 第27-28页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第28-32页 |
| 2.3.1 阳性重组菌株的筛选及鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.2 发酵培养基的优化 | 第29-32页 |
| 2.3.2.1 IPTG浓度对重组菌株产甘露聚糖的影响 | 第29-30页 |
| 2.3.2.2 葡萄糖浓度对重组菌株产甘露聚糖的影响 | 第30-31页 |
| 2.3.2.3 诱导温度对重组菌株产甘露聚糖的影响 | 第31-32页 |
| 2.4 本章小结 | 第32-33页 |
| 3 枯草芽孢杆菌合成甘露聚糖途径的构建 | 第33-48页 |
| 3.1 引言 | 第33-34页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第34-41页 |
| 3.2.1 菌种和质粒 | 第34页 |
| 3.2.2 仪器与试剂 | 第34-35页 |
| 3.2.3 培养基的配置 | 第35-36页 |
| 3.2.4 实验方法 | 第36-41页 |
| 3.2.4.1 甘露聚糖合酶基因(ctman S)的克隆 | 第36-37页 |
| 3.2.4.2 甘露聚糖合酶基因重组载体的构建 | 第37-38页 |
| 3.2.4.3 甘露聚糖合酶基因重组载体的转化与鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2.4.4 Mannan合成途径质粒的构建 | 第39-40页 |
| 3.2.4.5 重组质粒的转化与鉴定 | 第40页 |
| 3.2.4.6 不同诱导剂浓度对重组菌产甘露聚糖的影响 | 第40页 |
| 3.2.4.7 不同碳源浓度对重组菌产甘露聚糖的影响 | 第40页 |
| 3.2.4.8 不同诱导温度对重组菌产甘露聚糖的影响 | 第40-41页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第41-47页 |
| 3.3.1 甘露聚糖合酶基因的克隆与重组 | 第41-43页 |
| 3.3.2 Bacillus subtilis合成Mannan途径的构建 | 第43-44页 |
| 3.3.3 Bacillus subtilis168M摇瓶发酵 | 第44页 |
| 3.3.4 发酵培养基的优化 | 第44-47页 |
| 3.3.4.1 木糖浓度对重组菌株产甘露聚糖的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.4.2 葡萄糖浓度对重组菌株产甘露聚糖的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.4.3 诱导温度对重组菌株产甘露聚糖的影响 | 第46-47页 |
| 3.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 4 甘露聚糖合成途径基因过表达分析 | 第48-59页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 实验材料和方法 | 第48-54页 |
| 4.2.1 菌种与质粒 | 第48-49页 |
| 4.2.2 仪器和试剂 | 第49-50页 |
| 4.2.3 培养基的配置 | 第50-51页 |
| 4.2.4 实验方法 | 第51-54页 |
| 4.2.4.1 Bacillus subtilis168M卡那霉素抗性基因的消除 | 第51页 |
| 4.2.4.2 Mannan合成途径操纵子的构建 | 第51-52页 |
| 4.2.4.3 重组质粒的转化与鉴定 | 第52-53页 |
| 4.2.4.4 重组菌株甘露聚糖产量测定 | 第53-54页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第54-58页 |
| 4.3.1 Mannan合成途径操纵子的构建 | 第54-57页 |
| 4.3.2 重组菌株诱导发酵 | 第57-58页 |
| 4.4 本章小结 | 第58-59页 |
| 5 总结与展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
