| 致谢 | 第1-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章：文献综述 | 第13-18页 |
| ·慢病毒载体简介 | 第13-14页 |
| ·慢病毒载体系统的发展历程 | 第14-16页 |
| ·早期的慢病毒载体 | 第14页 |
| ·慢病毒载体的系统化 | 第14-16页 |
| ·慢病毒表达载体的构建策略 | 第16页 |
| ·慢病毒载体的容量和特点 | 第16页 |
| ·慢病毒载体的优化 | 第16页 |
| ·可调控型载体的设计 | 第16页 |
| ·双基因转移载体设计 | 第16页 |
| ·慢病毒载体制备转基因动物 | 第16-17页 |
| ·展望 | 第17-18页 |
| 第二章 表达sFat-1 基因慢病毒载体的构建及病毒包装 | 第18-34页 |
| ·材料与方法 | 第18-26页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·试剂的配制 | 第19-20页 |
| ·慢病毒载体包装体系的建立 | 第20-22页 |
| ·293T 细胞的培养 | 第20页 |
| ·慢病毒质粒的准备 | 第20-21页 |
| ·慢病毒的包装（磷酸钙转染法） | 第21页 |
| ·LaSRT 法测定病毒滴度 | 第21-22页 |
| ·表达sFat-1 基因和 EGFP 基因双顺反子慢病毒载体的构建 | 第22-24页 |
| ·sFat-1 基因的克隆 | 第22-23页 |
| ·sFat-1 基因与慢病毒载体的连接 | 第23页 |
| ·构建质粒的 PCR 检测 | 第23-24页 |
| ·磷酸钙法与脂质体法包装慢病毒的对比 | 第24-25页 |
| ·脂质体法转染293T 细胞 | 第24页 |
| ·磷酸钙法转染293T 细胞 | 第24-25页 |
| ·病毒滴度检测 | 第25页 |
| ·贴壁和悬浮状态293T 细胞慢病毒包装效果的比较 | 第25-26页 |
| ·转染试剂的配置 | 第25页 |
| ·转染贴壁细胞 | 第25页 |
| ·转染悬浮细胞 | 第25-26页 |
| ·病毒滴度检测 | 第26页 |
| ·结果及分析 | 第26-32页 |
| ·慢病毒包装体系的建立 | 第26页 |
| ·载体的构建 | 第26-28页 |
| ·磷酸钙法与脂质体法包装慢病毒的对比 | 第28-29页 |
| ·贴壁和悬浮状态293T 细胞慢病毒包装效果的比较 | 第29-32页 |
| ·结论与讨论 | 第32-34页 |
| ·慢病毒包装体系的建立 | 第32页 |
| ·载体构建 | 第32页 |
| ·磷酸钙法与脂质体法包装慢病毒的对比 | 第32-33页 |
| ·贴壁和悬浮状态293T 细胞慢病毒包装效果的比较 | 第33-34页 |
| 第三章 利用慢病毒载体制备转基因小鼠胚胎 | 第34-42页 |
| ·材料与方法 | 第34-38页 |
| ·仪器设备 | 第34页 |
| ·试验试剂 | 第34页 |
| ·小鼠来源 | 第34页 |
| ·试剂配制 | 第34-36页 |
| ·小鼠体外受精 | 第36页 |
| ·慢病毒感染精子 | 第36-37页 |
| ·切割透明带[49] | 第37页 |
| ·卵母细胞透明带下显微注射慢病毒 | 第37-38页 |
| ·受精卵透明带下显微注射慢病毒 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-40页 |
| ·慢病毒感染精子后体外受精 | 第38页 |
| ·卵母细胞透明带的切割 | 第38-39页 |
| ·透明带下注射慢病毒 | 第39-40页 |
| ·结论与讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 利用慢病毒载体制备转基因牛胚胎 | 第42-53页 |
| ·材料与方法 | 第42-46页 |
| ·仪器设备 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42-43页 |
| ·牛卵巢来源 | 第43页 |
| ·试剂的配制 | 第43-44页 |
| ·卵母细胞的采集及体外成熟培养 | 第44页 |
| ·精子的体外获能 | 第44页 |
| ·体外受精 | 第44-45页 |
| ·慢病毒感染精子 | 第45页 |
| ·透明带下注射慢病毒 | 第45-46页 |
| ·转基因胚胎的 PCR 检测 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-51页 |
| ·卵母细胞的成熟培养结果 | 第46-47页 |
| ·慢病毒感染精子 | 第47-48页 |
| ·透明带下注射慢病毒 | 第48-51页 |
| ·转基因胚胎的 PCR 检测结果 | 第51页 |
| ·结论与讨论 | 第51-53页 |
| ·慢病毒感染精子 | 第51页 |
| ·透明带下注射慢病毒 | 第51-53页 |
| 第五章 全文总结 | 第53-54页 |
| ·表达sFat-1 基因慢病毒载体的构建 | 第53页 |
| ·慢病毒的包装 | 第53页 |
| ·不同方法制备小鼠和牛转基因胚胎效果的比较 | 第53页 |
| ·切割透明带对小鼠体外受精效率的影响 | 第53页 |
| ·受精过程对慢病毒感染小鼠胚胎效率的影响 | 第53页 |
| ·透明带下注射法制备转基因牛胚胎 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
