| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-27页 |
| 1 青虾基因研究现状 | 第11-15页 |
| ·卵巢发育相关基因 | 第11-14页 |
| ·卵子成熟调控相关基因 | 第11-12页 |
| ·卵子和胚胎发育相关基因 | 第12-13页 |
| ·卵黄蛋白原代谢相关基因 | 第13-14页 |
| ·免疫相关基因 | 第14页 |
| ·蜕皮相关基因 | 第14-15页 |
| ·性别相关基因 | 第15页 |
| 2 蛋白酶抑制因子研究概述 | 第15-25页 |
| ·蛋白酶抑制因子的分类及特点 | 第15-19页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制因子 | 第16-17页 |
| ·半胱氨酸蛋白酶抑制因子 | 第17页 |
| ·天门冬氨酸蛋白酶抑制因子 | 第17-18页 |
| ·金属蛋白酶抑制因子 | 第18-19页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制因子的分类及特点 | 第19-21页 |
| ·Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子 | 第19页 |
| ·Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制因子 | 第19-20页 |
| ·α-巨球蛋白 | 第20-21页 |
| ·Serpin型丝氨酸蛋白酶抑制因子 | 第21页 |
| ·Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子研究概述 | 第21-25页 |
| ·Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子结构特点 | 第21-23页 |
| ·Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子抑制机制 | 第23-24页 |
| ·Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子生理功能 | 第24-25页 |
| 3 精子明胶酶基因 | 第25页 |
| 4 研究目的与意义 | 第25-27页 |
| 第二章 青虾KAZAL型丝氨酸蛋白酶抑制因子基因的克隆及表达分析 | 第27-51页 |
| 1 实验材料 | 第27-28页 |
| ·实验虾 | 第27-28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28页 |
| 2 实验方法 | 第28-39页 |
| ·青虾总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·实验用品的预处理 | 第28页 |
| ·总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·总RNA检测 | 第29页 |
| ·青虾KSPI基因部分片段的获得 | 第29-30页 |
| ·青虾KSPI的3'RACE | 第30-32页 |
| ·引物的设计 | 第30页 |
| ·反转录 | 第30页 |
| ·3'端扩增 | 第30-32页 |
| ·青虾KSPI的5'RACE | 第32-35页 |
| ·引物的设计 | 第32页 |
| ·反转录 | 第32-34页 |
| ·5'端扩增 | 第34-35页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第35-37页 |
| ·感受态的制备 | 第35-36页 |
| ·PCR产物的回收 | 第36页 |
| ·连接 | 第36页 |
| ·转化 | 第36-37页 |
| ·重组克隆的筛选 | 第37页 |
| ·重组克隆的鉴定 | 第37页 |
| ·序列的测定及分析 | 第37-38页 |
| ·青虾KSPI基因的表达分析 | 第38-39页 |
| ·引物的设计 | 第38页 |
| ·反转录 | 第38页 |
| ·半定量扩增 | 第38-39页 |
| ·荧光定量扩增 | 第39页 |
| 3 结果 | 第39-47页 |
| ·青虾KSPI基因3'端的分离 | 第39-40页 |
| ·青虾KSPI基因5'端的分离 | 第40-41页 |
| ·青虾KSPI基因全长cDNA的获得 | 第41-42页 |
| ·生物信息学分析 | 第42-44页 |
| ·系统发育分析 | 第44-45页 |
| ·青虾KSPI基因在不同组织中的表达分析 | 第45-47页 |
| ·半定量分析 | 第45-46页 |
| ·荧光定量分析 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-51页 |
| 第三章 青虾精子明胶酶(SPERM GELATINASE,SG)基因的克隆及表达分析 | 第51-61页 |
| 1 材料 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-53页 |
| ·青虾总RNA的提取 | 第51页 |
| ·MnSG基因部分片段的获得 | 第51页 |
| ·MnSG基因的3'RACE | 第51-52页 |
| ·引物的设计 | 第51-52页 |
| ·反转录 | 第52页 |
| ·3'端扩增 | 第52页 |
| ·青虾MnSG的5’RACE | 第52页 |
| ·引物的设计 | 第52页 |
| ·反转录 | 第52页 |
| ·5'端扩增 | 第52页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第52页 |
| ·序列的测定及分析 | 第52-53页 |
| ·MnSG基因的表达分析 | 第53页 |
| ·引物的设计 | 第53页 |
| ·反转录 | 第53页 |
| ·半定量扩增 | 第53页 |
| ·荧光定量扩增 | 第53页 |
| 3 结果 | 第53-59页 |
| ·MnSG基因3'端的分离 | 第53-54页 |
| ·MnSG基因5'端的分离 | 第54-55页 |
| ·MnSG基因全长cDNA的获得 | 第55-56页 |
| ·生物信息学分析 | 第56-57页 |
| ·MnSG基因在不同组织中的表达分析 | 第57-59页 |
| ·半定量分析 | 第57-58页 |
| ·荧光定量分析 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 全文结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-73页 |
| 附录 实验试剂及配置 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 已发表或已接受的论文 | 第77页 |